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正文內(nèi)容

病原微生物實驗室生物安全管理手冊(參考版)

2024-11-13 11:36本頁面
  

【正文】 應(yīng)在 4℃ 專用冰箱內(nèi)保存 ,并要求雙人雙鎖 ,有嚴格的菌株領(lǐng)取和銷毀制度。 ,未經(jīng)消毒的污水禁止直接排入公共排水系統(tǒng) .以消毒的污物集中倒入專用污物坑 (污物坑的深度 23米 ),不許混入居民生活垃圾。 :先用消毒液浸泡手套 5 分鐘 ,依次除去口罩 ,眼鏡 ,防護 服 ,三角頭巾 ,鞋 ,在浸泡手套后脫去手套。 ( 6)污染物處理及消毒 ,吸管及其他器械 ,需裝載加蓋不漏的容器內(nèi) ,經(jīng)高壓滅菌后 ,拿出實驗室。 ,如發(fā)生氣溶膠污染 ,應(yīng)立即關(guān)閉實驗室 ,用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域 ,24小時后再進行終末消毒。 ,如污染物濺落在身體表面 ,或有割傷 ,燒傷 ,燙傷 ,感染動物咬傷等情況 ,應(yīng)立即進行緊急處理 :皮膚表面用消毒液清洗 ,傷口以碘酒究竟消毒 ,眼睛用無菌生理鹽水沖洗。如出現(xiàn)身體不適現(xiàn)象 ,應(yīng)在實驗室所在地進行醫(yī)學(xué)觀察 .因工作原因必須離開時 ,用口服抗結(jié)核藥物預(yù)防。 ,檢查各實驗室水 ,電 ,防火設(shè)備 ,打開防盜報警裝置。 ,需有兩名工作人員同時進入實驗室。 ( 4)進入實驗室的規(guī)章制度 。一起使用人應(yīng)經(jīng)考核合格后方可操作儀器。 ( 2)實驗室儀器設(shè)備及功能的要求 結(jié)核菌素檢查 時必須在二級生物安全柜內(nèi)進行 ,無菌操作內(nèi)禁放雜物 , 并應(yīng)制定地面 ,門窗 ,墻壁 ,設(shè)施等的定期清潔 ,滅菌規(guī)程 ,操作間沒有紫外線燈 。 ( 1)結(jié)核病細菌學(xué)實驗室要求 結(jié)核病細菌學(xué)實驗室應(yīng)為生物 安全 Ⅲ 級實驗室 ,用于臨床診斷 ,教學(xué) ,屬中度危險 .應(yīng)具備安全設(shè)備 ,緩沖間實驗室條件應(yīng)滿足工作任務(wù)的要求 ,有完善的試驗設(shè)施 ,試驗室的環(huán)境應(yīng)清潔 ,衛(wèi)生 ,安靜 ,無污染 ,試驗室內(nèi)的管線 設(shè)置應(yīng)整齊 ,要有安全管理措施和報警 ,應(yīng)積及急救設(shè)施 ,房間數(shù)量不少于七間 ,包括實驗室準備室 ,培養(yǎng)機制備室 ,顯微鏡檢查室 ,圖片檢查室 ,接種室 ,培養(yǎng)室高壓消毒室等。 痰標(biāo)本需留置在特制的痰盒內(nèi)(直徑 4cm,高 2cm 的光口蓋密閉的塑料盒),并放置在專用的痰標(biāo)本運送箱內(nèi) ,運送過程中切勿倒置 ,嚴防痰液外溢。 ( 1) 標(biāo)本采集人員的防護:痰標(biāo)本有病人自 行留取,采集咽拭子等特殊標(biāo)本,采集人員應(yīng)穿防護服,戴一次性口罩,帽子,戴醫(yī)用手術(shù)手套。 ( 6)試驗室人員應(yīng)做結(jié)核菌素試驗,試驗結(jié)果為陰性時,應(yīng)接種卡介苗,并做好登記記錄。 ( 4)進行結(jié)核菌操作時,需有兩名工作人員同時進入實驗室,盡量避免單獨工作。 ( 3)無論進入實驗室時間長短,必須填寫 工作日志。 4. 支持性文件 全國艾滋病監(jiān)測工作規(guī)范 艾滋病實驗室安全操作及防護措施 (二)、結(jié)核桿菌實驗室生物安全規(guī)程 ( 1)實驗室入口處必須貼上生物危險標(biāo)志,注明危險因子,生物安全級別,試驗室負責(zé)人和相關(guān)負責(zé)人姓名和電話。 標(biāo)本留存轉(zhuǎn)送 陰性標(biāo)本收集血清冷凍保存一年。 結(jié)果登記和報告 將試驗結(jié)果登記在級路標(biāo)和標(biāo)本試劑表上,將 OD值打印結(jié)果貼在原始記錄表上,檢查原始記錄表是否填寫完整,操作者,復(fù)核者簽字。10%的標(biāo)本為灰色帶反應(yīng)。 ,根據(jù)試劑盒要求計算 cutoff 值。 根據(jù)試劑盒說明書要求的陰陽對照 OD 值范圍判斷實驗的準確性,陰陽性對照 OD值在范圍之內(nèi),試驗方可成立,超出范圍,試驗失敗,整個實驗重做。 酶標(biāo)儀讀物 按照試劑盒的要求選擇濾光片,確定空白孔位置,選擇合適達的打印報告格式,讀數(shù)并打印結(jié)果。 ,需加自配的底物應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。按照試劑盒的要求,選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸泡時間,根據(jù)所用酶標(biāo)板的條數(shù)確定洗板道數(shù),根據(jù)酶標(biāo)板的位置調(diào)節(jié)洗頭的位置,然后開始洗板,洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道。 貼好封板膜,按照試劑盒要求的溫度和時間進行溫育,最好選擇濕育方法。加樣要準確, 小心不要使吸頭碰著酶標(biāo)板空上是包被抗原。 根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標(biāo)板條固定在板架上,為了不損壞洗扳機,每道上的酶標(biāo)板條 24 必須保持完整 {不足部分可用廢棄的微孔添充 },檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符,按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測樣品,注意:空白只加標(biāo)本稀釋液。 ,標(biāo)明空白、陰性對照、陽性對照、外部質(zhì)控血清以及檢測樣本的位置:登記日期和實驗起止時間,記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號、效期:整 個實驗過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細登記。 ,按試劑盒要求時間恢復(fù)室溫。檢查并記錄樣品的質(zhì)量 有無嚴重溶血、細菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。 ,檢查并注明送檢單與標(biāo)本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。這樣同時附送檢單。試管上標(biāo)明姓名、時間、編號,將試管放入 專門帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理,在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì),以免碰碎,容器外標(biāo)有HIV檢測專用字樣和生物危害標(biāo)志。同時做好記錄。采血時注意安全,用一次性注射器謹慎操作,防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。 艾滋病病毒抗體 ELISA實驗。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報告實驗室負責(zé)人及生物安全員,視破壞種類按照上述方法進行處理,并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。如果懷疑發(fā)生了破損,應(yīng)當(dāng)將其蓋子擰松;爾后,將整個離心杯高壓滅菌。 如果實驗室的紀錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染,在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤 后,應(yīng)當(dāng)將其棄入污染廢棄物容器。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把,放入污染廢棄物容器中。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。 22 被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時,用布或紙巾覆蓋,爾后將消毒劑傾倒其上,放置 30 分鐘。在生物安全員的監(jiān)督下進行消毒、凈化處理;執(zhí)行這項工作時應(yīng)當(dāng)穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。至少在 1小時內(nèi),任何人員不得進入現(xiàn)場,以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。 實驗室事故可能造成氣溶膠污染,如壓力容器或管道破裂等,立即關(guān)閉實驗室,疏散現(xiàn)場的所有人員,對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。 傷害事故可能導(dǎo)致被強毒微生物感染,例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體,首先進行局部處理,用肥皂和水清洗污染的皮膚,擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液,用肥皂或清水沖洗,用消毒液浸泡或涂抹消毒,并包扎傷口。在其身體狀況未恢復(fù)之前,不得重新進入實驗室工作。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī),并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責(zé)人。令受到傷害的人員立即停止工作,用消毒液清洗未破損的皮膚表面,傷口以碘伏消毒,眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。并填寫生物安全二級實驗室意外情況登記與處理記錄表,實驗室負責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理行動,并檢查處理效果。例如實驗過程中,由于標(biāo)本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等,應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾,等消毒液徹底浸泡 30 分鐘后,對污染的物品進行處理。 3.職責(zé) 遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規(guī)程處理。 21 廣州市蘿崗區(qū)紅十字會醫(yī)院檢驗科管理規(guī)范文件 十二、實驗室應(yīng)急處置預(yù)案 1.目的 規(guī)范緊急情況的處理工作。 ,高壓溫度和時間設(shè)置正確。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用,則廢物必須放在滅菌袋內(nèi)捆好并放在實驗室內(nèi),在存放期間確保袋子無損壞。 ,廢物在滅菌袋中的 體積不能超過袋子體積的 3/4,滅菌袋用橡皮帶捆好,但不能扎得太死,否則蒸汽不能進入所料袋內(nèi)影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后,高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。每 1年保養(yǎng)一次,每月檢測一次消毒效果。 0刻度時,打開高壓滅菌器頂蓋,取出滅菌樣品。 “實行 ”鍵執(zhí)行滅菌程序,此時 “滅菌 ”燈閃爍。 設(shè)定滅菌溫度,先按 “編集 ”鍵,然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度,然后按 “實行 ”鍵,把所設(shè)溫度存進程序。 ,合上高壓滅
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