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核酸的組成與結(jié)構(gòu)ppt課件(參考版)

2025-05-15 05:10本頁(yè)面
  

【正文】 。 2. 敘述 RNA種類及其組成結(jié)構(gòu)。 Rnasin: 核糖核酸酶素,是 RNA酶的一種非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑 。 β巰基乙醇和異硫氰酸胍能使細(xì)胞內(nèi)各種 RNA酶失活。 DEPC: 焦碳酸二乙酯,是一種強(qiáng)烈但并不徹底的RNA酶抑制劑,通過和 RNA酶中 His結(jié)合使蛋白質(zhì)變性,抑制RNA酶活性。 (3)溶液配制: 加 %DEPC37℃ 12~16h,高壓除去殘留的 DEPC。制備高質(zhì)量真核細(xì)胞 RNA的關(guān)鍵是在抽提的最初步驟就需要抑制核糖核酸酶的活性,并避免所用玻璃器皿及液體污染微量核糖核酸酸酶。 (4)溫度:冰水。 (2)醋酸鈉為沉淀 DNA、 RNA的最常用鹽類。 (4)標(biāo)準(zhǔn)程序:酚 ——酚 氯仿 ——氯仿。 (2)氯仿還可加速有機(jī)相與水相的分層。 5.原核生物中也有一種 mRNA干擾互補(bǔ) RNA( Mrna interfering plementary RNA, micRNA),也可與特異 mRNA結(jié)合并阻止翻譯。 3.還可作為 DNA復(fù)制的抑制因子,與引物 RNA互補(bǔ)結(jié)合抑制 DNA復(fù)制,及在轉(zhuǎn)錄水平上與 mRNA5′端互補(bǔ),阻止 RNA合成轉(zhuǎn)錄。常與多種特異的蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,形成小分子核內(nèi)核蛋白顆粒( small nuclear ribonucleoprotein particle, snRNP) 48 九、反義 RNA 1.堿基序列正好與有意義 mRNA互補(bǔ)的 RNA,又稱為調(diào)節(jié) RNA。 八、小分子核內(nèi) RNA( snRNA) 真核細(xì)胞核內(nèi)一組小分子 RNA,含 70~300堿基 ,序列中尿嘧啶含量較高,因此又用 U命名。 Symons提出“錘頭”狀二級(jí)結(jié)構(gòu),三個(gè)螺旋區(qū), 13(或 11)個(gè)保守核苷酸序列。 2.核酶的發(fā)現(xiàn)意義 不僅拓寬了生物催化劑的領(lǐng)域,而且對(duì) RNA的生物學(xué)功能開創(chuàng)了一種歷史性的新認(rèn)識(shí): RNA不僅具有儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息的功能,而且還具有生物催化劑的功能,在一定程度上可以說, RNA一身兼有 DNA和蛋白質(zhì)兩大類生物大分子的功能。 41 五、 rRNA 原核生物 真核生物 核糖體 70S 80S 小亞基 30S 40S rRNA 16S(1542個(gè)核苷酸 ) 18S( 1874個(gè)核苷酸) 蛋白質(zhì) 21種 (占總重量的 40%) 33種(占總重量 50%) 大亞基 50S 60S rRNA 23S(2940個(gè)核苷酸 ) 28S( 4718個(gè)核苷酸) 5S(120個(gè)核苷酸 ) (160個(gè)核苷酸 ) 5S(120個(gè)核苷酸 ) 蛋白質(zhì) 31種 (占總重量的 30%) 49種 (占總重量的 35%) 1.核糖體的組成 42 2. rRNA二級(jí)結(jié)構(gòu) : 單鏈 RNA自行盤繞形成局部雙螺旋的多“莖”多“環(huán)”結(jié)構(gòu),螺旋部分稱為“莖”或“臂”非螺旋部分稱為“環(huán)”,在螺旋區(qū), A與 U配對(duì), G與 C配對(duì)。 非編碼區(qū)( untranslated region UTR)位于編碼區(qū)的兩端;5 ′非編碼區(qū)有翻譯起始信號(hào)。 39 ( 2) 3′端多數(shù)帶有多聚 A的尾巴 (polyadenylate tail),其長(zhǎng)度為20~200個(gè) A. ( 3)分子中可能有修飾堿基,主要是甲基化。 38 2. 真核生物 mRNA結(jié)構(gòu)的特點(diǎn) ( 1) 5 ′末端有帽子結(jié)構(gòu)。 (2) mRNA5′端無帽子結(jié)構(gòu), 3 ′端一般無多聚 A的尾巴。在翻譯過程中轉(zhuǎn)運(yùn)各種氨基酸至核糖體,按 mRNA的密碼順序合成蛋白質(zhì)的作用。除氨基酸接受區(qū)外,其余每個(gè)區(qū)都含有一個(gè)突環(huán)和一個(gè)臂。 5SrRNA和 16S rRNA分別構(gòu)成大亞基和小亞基。 2. RNA的分類及其二級(jí)結(jié)構(gòu) ( 1) mRNA:帽子結(jié)構(gòu)和尾巴, 5’端, 7’甲基鳥苷; 3’端, polyA 尾巴。 33 34 35 第二節(jié)、 RNA的組成與結(jié)構(gòu) 一、 RNA的組成 RNA所含的戊糖為 D核糖,堿基為 A、 C、 G、 U。 如
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