核酸的組成與結(jié)構(gòu)ppt課件-wenkub
2023-05-27 05:10:15 本頁面
【正文】 森） Franklin RE， 1920－ 1958） 和同事威爾金斯在 1951年率先采用 X射線衍射技術(shù)拍攝到 DNA晶體照片，為推算出 DNA分子呈螺旋結(jié)構(gòu)的結(jié)論， 提供了決定性的實驗依據(jù) 。 （ 1）要點： DNA分子是由兩條同軸反向互相纏繞的多核甘酸鏈組成的雙螺旋結(jié)構(gòu)；糖和磷酸排在外面構(gòu)成骨架 ,兩鏈相應(yīng)的核甘酸的堿基互相配對由氫鍵連接排列在內(nèi)側(cè)；雙螺旋直徑為 20A，螺距為 34A,包含 10對堿基。核酸序列分析技術(shù)是最重要的分子生物學(xué)研究技術(shù)，主要包括： Sanger雙脫氧法和 Maxam and Gillbert化學(xué)法。 二級結(jié)構(gòu)（ Secondary structure）： 雙螺旋（ double helix） 三股螺旋（ triple helix） 三（高）級結(jié)構(gòu)（ Tertiary structure）： 超螺旋（ supercoil） 4 （一） DNA的一級結(jié)構(gòu) 指 DNA分子中 4種核苷酸的連接方式和排列順序。1 第三章 核酸的組成與結(jié)構(gòu) 本章重點： DNA和 RNA的組成 、 結(jié)構(gòu)和功能 。 1. Chargaff法則 Chargaff于 19461950年根據(jù)紙層析、離子交換層析和紫外分光光度試驗結(jié)果提出查伽夫定則：四種堿基的數(shù)量不是等量的；同一物種 DNA堿基組成不變，而物種間則有很大不同；嘌呤堿基總量與嘧啶堿基的總量相等 (A+G=T+C)，且腺嘌呤與胸腺嘧啶數(shù)相等“ A”=“T” 、鳥嘌呤與胞嘧啶數(shù)相等 “ G”=“C”。基于化學(xué)法的 DNA序列自動分析儀已成為常規(guī)實驗設(shè)備。 （ 2）意義： DNA雙螺旋模型結(jié)構(gòu)同時表明， DNA可以按堿基互補配對原則進行半保留復(fù)制，而在此之前對復(fù)制方式人們對一無所知； DNA核苷酸順序規(guī)定該基因編碼蛋白質(zhì)的氨基酸順序；DNA中的遺傳信息就是堿基序列；并存在某種遺傳密碼 (geic code)，將核苷酸序列譯成蛋白質(zhì)氨基酸順序。但“科學(xué)玫瑰”沒等到分享榮耀，在研究成果被承認之前就已凋謝。 ADNA： 為 DNA的脫水構(gòu)型，右手螺旋，每螺旋為 11個核苷酸對。 后，與另一側(cè)片段對稱重復(fù)。 （ 3）反轉(zhuǎn)重復(fù)（ inverted repeated)： 由反方向互補的兩個 DNA片段組成，兩個反轉(zhuǎn)重復(fù)序列又叫回文序列(palindrome sequence)。 多聚嘧啶和多聚嘌呤組成的 DNA螺旋區(qū)段，其序列中有較長的鏡像重復(fù)時，形成局部三股配對，并互相盤繞的三股螺旋，其中兩股的堿基按 WatsonCrick方式配對，第三股多聚嘧啶（鏡像重復(fù)）通過 TAT和 CGC配對，而處于雙螺旋的大溝中。 分子內(nèi)三鏈 DNA于 1987年由 Mirkin在超螺旋中發(fā)現(xiàn)，其形成要求雙螺旋中存在連續(xù)的嘌呤或嘧啶序列，而且必須是鏡像重復(fù)序列。 c. 真核生物的染色體多為線形分子，但 DNA均與蛋白質(zhì)相結(jié)合，同樣具有超螺旋形式。 22 23 c. 松旋效應(yīng)緊旋效應(yīng)： 形成超負螺旋時，旋轉(zhuǎn)方向與 DNA雙螺旋方向相反，旋轉(zhuǎn)結(jié)果使 DNA分子內(nèi)部張力減小，稱為松旋效應(yīng)（在自然條件下共價封閉環(huán)狀 DNA呈負超螺旋結(jié)構(gòu) ）；與負超螺旋相反，形成正超螺旋時的旋轉(zhuǎn)方向與 DNA雙螺旋方向相同，結(jié)果加大了 DNA分子內(nèi)部張力，具有緊旋效應(yīng)。 T（ twisting number）：纏繞數(shù)，即雙螺旋的圈數(shù)。 24 25 26 27 （ 5） DNA的超螺旋密度（ λ） λ =（ LL0） /L0 L0是指松馳環(huán)形 DNA的 L值，天然 DNA的超螺旋密度一般為~，平均每 100個螺旋出現(xiàn) 39個負超螺旋。 28 29 （ 6）不同類型 DNA的高級結(jié)構(gòu)及性質(zhì) a. 超螺旋使環(huán)狀 DNA分子變得更致密，在超速離心和在凝膠電泳中的遷移速度都增加 。 d. 坍縮 DNA：當閉
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