【正文】 參與細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的表達(dá) ? 202 蛋白質(zhì)和 DNA螺旋結(jié)構(gòu)比較 蛋白質(zhì)（ α螺旋） DNA（ B—DNA） 構(gòu)成螺旋的主鏈數(shù)目 單股 雙股 主鏈的性質(zhì)和位置 肽鍵、在螺旋內(nèi)側(cè) RP酯鍵 ,在螺旋外側(cè) 穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的氫鍵 主鏈上的 C=0與 HN 形成氫鍵幾乎與軸平行 側(cè)鏈堿基配對(duì)形成 氫鍵與軸垂直 螺距 殘基數(shù) /螺旋 10 側(cè)鏈基團(tuán)的分布 在螺旋外側(cè)、隨機(jī) 在螺旋內(nèi)側(cè)、配對(duì) 。CGGTUGC339。CGUAGGC339。CGGAUGC339。CGTAGGC339。CGGATGC339。GCCTACG339。端帽子結(jié)構(gòu) B. 沉降系數(shù)為 6～ 25 S C. 分子大小不均一 D. 339。 ? 催化性 DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脫氧核苷酸片段，也能序列特異性降解 RNA。1981年，美國(guó)兩位生物化學(xué)家 T. Cech和 S. A. Altman發(fā)現(xiàn)了某些核糖核酸 (RNA)的催化作用，并提出了 核酶 （ Ribozyme)的概念。核酸外切酶?；?3180。 ?核酸外切酶： 5180。 ?RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 專(zhuān)一降解 RNA。 將同種生物的 DNA雜交，可用于痕跡檢驗(yàn)等 分子探針（ probe） : 是指用放射性核素、生物素或其他活性物質(zhì)標(biāo)記的，能與特定的核酸序列發(fā)生特異性互補(bǔ) 的已知 DNA或 RNA片段。犯罪分子只要留下一絲一毫的身體細(xì)胞遺留物，如血液、皮屑、毛發(fā)等，技術(shù)人員就可以把犯罪嫌疑人的 DNA樣本和現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)的遺留物中提取的 DNA樣本通過(guò) DNA雜交，比較它們是否相同，從而確定現(xiàn)場(chǎng)留下的痕跡是否為犯罪嫌疑人的。 在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，能準(zhǔn)確進(jìn)行 親子鑒定的是 DNA檢測(cè) ，檢測(cè)方法并非檢測(cè)出全部堿基順序，而是進(jìn)行 DNA雜交，即把所要檢測(cè)的兩人的 DNA進(jìn)行雜交，再比較差異大小，從而說(shuō)明兩人的血緣關(guān)系，如父子、母女等。每個(gè)人多態(tài)性位點(diǎn)的差別就成為個(gè)人識(shí)別的標(biāo)志。 ? DNA分子雜交的應(yīng)用 ? 將同種生物的 DNA雜交，可用于親子鑒定 人與人之間的 ％的遺傳密碼都相同，但又存在萬(wàn)分之一的差別，使每個(gè)人都 具備區(qū)別于他人的堿基序列 。 ? 研究 DNA分子中某一種基因的位置 ? 定兩種核酸分子間的序列相似性 ? 檢測(cè)某些專(zhuān)一序列在待檢樣品中存在與否 ? 是基因芯片技術(shù)的基礎(chǔ) 核酸分子雜交的應(yīng)用： ? 將不同種生物的 DNA分子進(jìn)行雜交，可以說(shuō)明生物之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近 把人、黑猩猩和長(zhǎng)臂猿的某些 DNA進(jìn)行雜交，發(fā)現(xiàn)人的 DNA和黑猩猩的 DNA雜交后形成的雜交DNA雜合雙鏈區(qū)多于人的 DNA與長(zhǎng)臂猿雜交形成的雜合雙鏈區(qū)，即 人與黑猩猩的 DNA更相似 ，這就說(shuō)明人與黑猩猩的親緣關(guān)系要近于人與長(zhǎng)臂猿的親緣關(guān)系。 核酸分子雜交 (hybridization) 這種雜化雙鏈可以在不同的 DNA與DNA之間形成 ， 也可以在 DNA和 RNA分子間或者 RNA與 RNA分子間形成 。 知識(shí)點(diǎn) 18 DNA復(fù)性 (renaturation) 復(fù)性的條件： ?只有溫度緩慢下降才可以復(fù)性 ?一般認(rèn)為，比 Tm低 25℃ 是復(fù)性的最佳條件。 減色效應(yīng) DNA復(fù)性時(shí)，其溶液 OD260降低。 DNA的解鏈曲線和 Tm值 DNA熱變性： ?增（高）色效應(yīng)： DNA變性時(shí)其溶液 OD260 增高的現(xiàn)象 知識(shí)點(diǎn) 17 變性引起紫外吸收值的改變 167。 其大小與 G+C含量成正比 。加熱變性氫鍵斷裂緩慢冷卻復(fù)性天然雙鏈 DNA 變性 DNADN A 的變性和復(fù)性DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間 氫鍵斷裂 ,變成單鏈。 方法： 過(guò)量酸，堿，加熱，變性試劑如尿素、 以及某些有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮、甲醛等。 4 8 12 16 消光系數(shù) 8 10－ 3 A G T C U 220 240 260 280 300 320nm 波長(zhǎng) 各種堿基的紫外吸收光譜 167。 4 核酸的理化性質(zhì) 一、核酸的一般理化性質(zhì) 二、 DNA的變性 (denaturation) 三、 DNA的復(fù)性與分子雜交 ? 核酸是酸性較強(qiáng)的多元酸 ? DNA分子的長(zhǎng)度與直徑之比達(dá)到 107，極易在機(jī)械力的作用下發(fā)生斷裂 ? 紫外吸收特性 260nm特征性吸收峰 核酸的一般理化性質(zhì) 核酸的紫外吸收 嘌呤和嘧啶堿基具有共軛雙鍵，這使核苷、核苷酸及核酸可以吸收紫外光，最大吸收峰位于波長(zhǎng) 260nm附近，因此經(jīng)常用 A260（在 260nm處的吸光度）或 OD260（ 260nm處的光密度值）表示核酸的濃度。 m7GpppNm 339。 知識(shí)點(diǎn) 15 核糖體 RNA的結(jié)構(gòu) 70S 80S 50S 30S 60S 40S 31 proteins 23S RNA 5S RNA 21 proteins 16S RNA 49 proteins 28S RNA RNA 33 proteins 18S RNA 原核生物核蛋白體 真核生物核蛋白體 核蛋白體構(gòu)象 局部雙鏈 tRNA rRNA mRNA 三葉草形、倒 L形 含稀有堿基多 反密碼子 CCAOH 339。 3 RNA的空間結(jié)構(gòu)與分類(lèi) 信使 RNA (mRNA) 轉(zhuǎn)運(yùn) RNA (tRNA) 核蛋白體 RNA (rRNA) RNA與 DNA分子組成及結(jié)構(gòu)差異 rRNA (核糖體 RNA) Ribosome RNA ? 約占全部 RNA的 80% ? 是核糖核蛋白體的主要組成部分 。 tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu) Ｔ ψ Ｃ環(huán) 氨基酸臂 DHU環(huán) 反密碼環(huán) 反密碼子 tRNA三級(jí)結(jié)構(gòu)及氫鍵的位置 動(dòng) 畫(huà) tRNA的功能 活化、搬運(yùn)氨基酸到核糖體，參與蛋白質(zhì)的翻譯。 知識(shí)點(diǎn) 13 ? tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)都呈” 三葉草” 形狀，在結(jié)構(gòu)上具有某些共同之處，一般可將其分為五臂四環(huán)：包括 氨基酸接受區(qū) 、 反密碼區(qū) 、 二氫尿嘧啶區(qū)、 T?C區(qū)和可變區(qū) 。 知識(shí)點(diǎn) 12 NN HN HNNOC H3C H3NNN HNNHC H2C H CC H3C H3N HN HOOHHHHN HN HSON,N二甲基鳥(niǎo)嘌呤 N6異戊烯腺嘌呤 雙氫尿嘧啶 4巰尿嘧啶 稀有堿基 tRNA (轉(zhuǎn)移 RNA) Transfer RNA ? 它們的 3， 末端都是 － CCAOH序列 ，已知每一個(gè)氨基酸至少有一個(gè)相應(yīng)的tRNA。 ? 是細(xì)胞里分子量較小的一類(lèi)核酸 ， 鏈長(zhǎng)一般在 7090個(gè)核苷酸之間 。 DNA mRNA 蛋白 轉(zhuǎn)錄 翻譯 原核細(xì)胞 細(xì)胞質(zhì) 細(xì)胞核 DNA 內(nèi)含子 外顯子 轉(zhuǎn)錄 轉(zhuǎn)錄后剪接 轉(zhuǎn)運(yùn) mRNA hnRNA 翻譯 蛋白 知識(shí)點(diǎn) 11 真核細(xì)胞 167。 ? 它的功能是將 DNA的遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)合成基地 – 核糖核蛋白體 。非