蛋白質(zhì)和主要必需氨基酸的測定(參考版)
2025-05-05 13:42本頁面
【正文】 三、谷物和飼料中 色氨酸的測定 —— 乙醛酸 法 方法原理 ? 谷物中蛋白質(zhì)經(jīng) 木瓜蛋白酶 作用水解出色氨酸，然后在濃硫酸存在的情況下， Fe3+可將乙酸氧化為乙醛酸， 2mol色氨酸能與 1mol乙醛酸縮合，產(chǎn)生 hopkinscole反應(yīng)，生成紅紫色 的化合物 ， 其 紅紫色的強度與色氨酸的含量在一定范圍內(nèi)成正比 ，其最大的吸收峰在 545nm，進行比色測定。 三、谷物和飼料中 色氨酸的測定 —— 乙醛酸 法 目前提出的測定方法很多，歸結(jié)起來有 三類 ： ? 一是找出一種理想的水解方法，使色氨酸和其它的氨基酸一樣，且用離子交換色譜進行測定； ? 二是暴露具有反應(yīng)活性的吲哚環(huán)，然后與某些試劑反應(yīng)生成帶色化合物，進行比色測定； ? 三是 利用色氨酸天然特有的近紫外吸收峰 ，對色氨酸進行分光光度或熒光測定。 ? 改善睡眠 ：色氨酸生成的 5羥色胺 ，能改變睡眠持續(xù)時間 。 ? 預(yù)防糙皮?。?已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人類缺乏色氨酸會患 糙皮病（皮炎） ，常食玉米會發(fā)生。 樣品種類 稱樣量（ mg） ?；瘶悠? 不?；瘶悠? 水 稻 麥 類 普通玉米 高賴氨酸玉米 高 梁 谷 子 大 豆 其它豆類 花生仁 向日葵子 棉 子 700或 800 500 800 700或 500 1000 900 180 275 300 200 125 500或 600 400 600 400或 500 700 700 100 175 200 150 90 ? 色氨酸是重要的必需氨基酸之一 。分別加 30～ 35mL具塞玻璃的或聚四氟乙烯的試管中，標(biāo)明為 A、 B管 (?；瘶悠?)和 C、 D管 (不?；瘶悠?)。而?；笾皇?組氨酸 +精氨酸 ，以上 兩項測定結(jié)果的差值 ，就可計算之 賴氨酸 的含量。如果先將樣品用丙酸酐處理，丙酸酐便將 賴氨酸的 NH2的?；?掩蔽，使其失去和染料結(jié)合的能力。 ? 染料結(jié)合法 DBL法：國內(nèi)外應(yīng)用較廣泛的、簡便易行。 ? 測定方法： 2,4,6— 三硝基苯磺酸 (TNBS法 )、 1氟 2,4二硝基苯法 (FDNB法、 2氯 3,5二硝基吡啶法 (CNPY法 )等。 ? 5．幫助鈣的吸收，治療防止骨質(zhì)疏松癥 ? 6．降低血中甘油三酯的水平，預(yù)防心腦血管疾病的產(chǎn)生。 ? 3．改善失眠，提高記憶力。 ? 對人體的作用 ： ? 1．提高智力、促進生長、增強體質(zhì)。缺乏賴氨酸，人與動物不僅不能正常發(fā)育，還會引起某些疾病。 ? (4) 上機測定。 ? (2) 胱氨酸及色氨酸的水解（鹽酸分解過程中破壞，需另行制備）。 第三節(jié) 氨基酸的測定 一、全氨基酸和游離氨基酸的分析 —— 氨基酸分析儀法 ? 方法原理 氨基酸分析儀的中心是 離子交換層析柱 ，當(dāng) 流動相 (緩沖溶液 )推動 氨基酸 流經(jīng)裝有 陽離子交換樹脂的色譜柱 時 (磺酸型 Na+柱 )，氨基酸與樹脂中的交換基團進行離子 交換 ，當(dāng)用不同的 pH值的緩沖溶液進行 洗脫 時，因交換能力的不同而將氨基酸混合物分開，流出色譜柱的氨基酸再與 茚三酮 在 100℃ 下反應(yīng)生成紫色物質(zhì)
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