色毛電泳ppt課件(參考版)
2025-05-02 03:25本頁(yè)面
【正文】 五、毛細(xì)管等速電泳（自學(xué)） capillary isotachophoresis ， CITP 3. 不同離子的淌度不同，所形成區(qū)帶的電場(chǎng)強(qiáng)度不同(ν =μE )， 淌度大的離子區(qū)帶電場(chǎng)強(qiáng)度??； 沿出口到進(jìn)口，將不同區(qū)帶依次排序 4? ? ? ?電場(chǎng)強(qiáng)度依次增大。所有試樣都按前導(dǎo)離子的速度等速向陽(yáng)極前進(jìn)，逐漸形成各自獨(dú)立的區(qū)帶而分離。 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導(dǎo)離子 (充滿(mǎn)毛細(xì)管 )和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，并以同一速度移動(dòng)。 （水相）間分配，疏水性強(qiáng)的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時(shí)間長(zhǎng)； ，擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍 ； 1. 根據(jù)等電點(diǎn)差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術(shù)； 2. 毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)（合成的具有不同等電點(diǎn)范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物），當(dāng)施加直流電壓（ 6～ 8V） 時(shí)，管內(nèi)將建立一個(gè)由陽(yáng)極到陰極逐步升高的 pH梯度； 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液 pH有關(guān)，在酸性溶液中帶正電荷，反之帶負(fù)電荷。三、 膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜 （ MECC ， MEKC）micellar electrokiic capillary chromatography， MEKC 在電場(chǎng)力的作用下，膠束在柱中移動(dòng)。柱便宜、易制備。 特點(diǎn) ：抗對(duì)流性好，散熱性好，分離度極高； 但壽命短 。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。這是最基本、應(yīng)用廣的分離模式；這是最基本、應(yīng)用廣的分離模式；二、毛細(xì)管凝膠電泳 capillary gel electrophoresis ， CGE 將聚丙烯酰胺、瓊脂糖等在毛細(xì)管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。四、高效毛細(xì)管電泳分離模式分離類(lèi)型八種分離類(lèi)型，介紹常用的幾種；根據(jù)試樣性質(zhì)不同，采用不同的分離類(lèi)型；每種機(jī)理的選擇性不同；一、毛細(xì)管區(qū)帶電泳capillary zone electrophoresis ， CZE 帶電粒子的遷移速度 =電泳和電滲流速度的矢量和。 實(shí)際操作時(shí)，保持毛細(xì)管兩端緩沖溶液平面高度相同。5).其他影響因素 （ 1）電分散作用對(duì)譜帶展寬的影響 當(dāng)溶質(zhì)區(qū)帶與緩沖溶液區(qū)帶的電導(dǎo)不同時(shí)，也造成譜帶展寬；盡量選擇與試樣淌度相匹配的背景電解質(zhì)溶液。 細(xì)內(nèi)徑毛細(xì)管柱，一方面有利于散熱，另一方面比表面積大，又增加了溶質(zhì)吸附的機(jī)會(huì)。 3).焦耳熱與溫度梯度的影響電泳過(guò)程產(chǎn)生的焦耳熱可由下式計(jì)算：?m— 電解質(zhì)溶液的摩爾電導(dǎo)； I— 工作電流： cm— 電解質(zhì)濃度； 散熱過(guò)程中，在毛細(xì)管內(nèi)形成溫度梯度（中心溫度高），破壞了塞流，導(dǎo)致區(qū)帶展寬。2).進(jìn)樣的影響 當(dāng)進(jìn)樣塞長(zhǎng)度 太大時(shí)，引起的峰展寬大于縱向擴(kuò)散。分離度可按譜圖直接由下式計(jì)算： — 區(qū)帶展寬 factors influenced the efficiency—ban
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