色毛電泳ppt課件(更新版)
【正文】 時，管內(nèi)將建立一個由陽極到陰極逐步升高的 pH梯度； 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液 pH有關(guān)，在酸性溶液中帶正電荷，反之帶負(fù)電荷。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。5).其他影響因素 （ 1）電分散作用對譜帶展寬的影響 當(dāng)溶質(zhì)區(qū)帶與緩沖溶液區(qū)帶的電導(dǎo)不同時，也造成譜帶展寬；盡量選擇與試樣淌度相匹配的背景電解質(zhì)溶液。分離度可按譜圖直接由下式計算： — 區(qū)帶展寬 factors influenced the efficiency—band broadening 1).縱向擴(kuò)散的影響 在 HPCE中，縱向擴(kuò)散引起的峰展寬： σ 2=2Dt 由擴(kuò)散系數(shù)和遷移時間決定。 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì)： 內(nèi)表面帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極； 內(nèi)表面帶正電荷，溶液帶負(fù)電荷，電滲流流向陽極； 石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極 ；改變電滲流方向的方法： （ 1）毛細(xì)管改性 表面鍵合陽離子基團(tuán)； （ 2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑 內(nèi)充液中加入大量的陽離子表面活性劑，將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷，溶液表面帶負(fù)電荷。 陰離子 ： 兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向相反 。? 電壓升高，電場推動力大，又可進(jìn)一步使柱徑變小，柱長增加，? 高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相色譜，理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬塊 /米，特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬。167。? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā)，大大減小了溫度效應(yīng)，使電場電壓可以很高。 中性粒子 無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響， 在陽離子后流出 ；169。 電滲現(xiàn)象中整體移動著的液體叫 電滲流 （ electroosmotic flow ， 簡稱 EOF）。3).分離度 影響分離度的主要因素；工作電壓 V； 毛細(xì)管有效長度與總長度比；有效淌度差。 減小吸附的方法和途徑 ：加入兩性離子代替強(qiáng)電解質(zhì)，兩性離子一端帶正電，另一端帶負(fù)電，帶正電一端與管壁負(fù)電中心作用，濃度約為溶質(zhì)的 1001000倍時，抑制對蛋白質(zhì)吸附，又不增加溶液電導(dǎo)，對電滲流影響不大 。 其具有多孔性，類似分子篩的作用，試樣分子按大小分離。 2. 電泳流和電滲流的方向相反，且 ν 電滲流 ν 電泳 ，負(fù)電膠束以較慢的速度向負(fù)極移動； 的結(jié)合。假設(shè) “ 2” 號中離子擴(kuò)散到 “ 3” 號，該區(qū)電場強(qiáng)度大，離子被加速，返回到 “ 2” 區(qū)；當(dāng) “ 2” 號中離子跑到 “ 1” 號區(qū)，離子被減速使之歸隊； 4. 特點：界面明顯，富集、濃縮作用； 在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液，以電滲流為流動相，試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動色譜過程；六、毛細(xì)管電滲色譜（自學(xué)） capillary electroosmostic chromatography ， CEC提
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