《色毛電泳》ppt課件(文件)
【正文】 (ν =μE )， 淌度大的離子區(qū)帶電場(chǎng)強(qiáng)度??； 沿出口到進(jìn)口，將不同區(qū)帶依次排序 4? ? ? ?電場(chǎng)強(qiáng)度依次增大。所有試樣都按前導(dǎo)離子的速度等速向陽極前進(jìn)，逐漸形成各自獨(dú)立的區(qū)帶而分離。 （水相）間分配，疏水性強(qiáng)的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時(shí)間長(zhǎng)； ，擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍 ； 1. 根據(jù)等電點(diǎn)差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術(shù)； 2. 毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)（合成的具有不同等電點(diǎn)范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物），當(dāng)施加直流電壓（ 6～ 8V） 時(shí)，管內(nèi)將建立一個(gè)由陽極到陰極逐步升高的 pH梯度； 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液 pH有關(guān)，在酸性溶液中帶正電荷，反之帶負(fù)電荷。柱便宜、易制備。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。四、高效毛細(xì)管電泳分離模式分離類型八種分離類型，介紹常用的幾種；根據(jù)試樣性質(zhì)不同，采用不同的分離類型；每種機(jī)理的選擇性不同；一、毛細(xì)管區(qū)帶電泳capillary zone electrophoresis ， CZE 帶電粒子的遷移速度 =電泳和電滲流速度的矢量和。5).其他影響因素 （ 1）電分散作用對(duì)譜帶展寬的影響 當(dāng)溶質(zhì)區(qū)帶與緩沖溶液區(qū)帶的電導(dǎo)不同時(shí)，也造成譜帶展寬；盡量選擇與試樣淌度相匹配的背景電解質(zhì)溶液。 3).焦耳熱與溫度梯度的影響電泳過程產(chǎn)生的焦耳熱可由下式計(jì)算：?m— 電解質(zhì)溶液的摩爾電導(dǎo)； I— 工作電流： cm— 電解質(zhì)濃度； 散熱過程中，在毛細(xì)管內(nèi)形成溫度梯度（中心溫度高），破壞了塞流，導(dǎo)致區(qū)帶展寬。分離度可按譜圖直接由下式計(jì)算： — 區(qū)帶展寬 factors influenced the efficiency—band broadening 1).縱向擴(kuò)散的影響 在 HPCE中，縱向擴(kuò)散引起的峰展寬： σ 2=2Dt 由擴(kuò)散系數(shù)和遷移時(shí)間決定。 parameters and relation in HPCE1).遷移時(shí)間（保留時(shí)間） HPCE兼具有電化學(xué)的特性和色譜分析的特性。 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì)： 內(nèi)表面帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極； 內(nèi)表面帶正電荷，溶液帶負(fù)電荷，電滲流流向陽極； 石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極 ；改變電滲流方向的方法： （ 1）毛細(xì)管改性 表面鍵合陽離子基團(tuán)； （ 2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑 內(nèi)充液中加入大量的陽離子表面活性劑，將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷，溶液表面帶負(fù)電荷。淌度 μ ： 單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的平均電泳速度。 陰離子 ： 兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向相反 。 帶電粒子的 遷移速度 =電泳 +電滲流； 兩種速度的矢量和 。? 電壓升高，電場(chǎng)推動(dòng)力大，又可進(jìn)一步使柱徑變小，柱長(zhǎng)增加，? 高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相
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