色毛電泳ppt課件(已修改)
2025-05-11 03:25 本頁(yè)面
【正文】 167。310 高效毛細(xì)管電泳分析High performance capillary electrophoresis,HPCE 在電解質(zhì)溶液中，位于電場(chǎng)中的帶電離子在電場(chǎng)力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象， 稱(chēng)之為 電泳電泳 。由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷移速率不同，可實(shí)現(xiàn)分離。 1937年， Tiselius(瑞典 )將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳， 第一次 將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和 α 、 β 、 γ 球蛋白； 發(fā)現(xiàn) 樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定； 第一次 發(fā)明 自由溶液電泳； 第一臺(tái)電泳儀 ； 1948年， 獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng) ；一、概述 generalization經(jīng)典電泳分析 traditional electrophoresis 利用電泳現(xiàn)象對(duì)某些 化學(xué)或生物物質(zhì)化學(xué)或生物物質(zhì) 進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫電泳法或電泳技術(shù)。 按形狀分類(lèi)： U型管電泳、柱狀電泳、板電泳； 按載體分類(lèi)：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳； 傳統(tǒng)電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無(wú)法與其他分析相比。 1981年， Jenson和 Luckas， 用 75m內(nèi)徑石英毛細(xì)管進(jìn)行電泳分析，柱效高達(dá) 40萬(wàn) /m， 促進(jìn)電泳技術(shù)發(fā)生了根本變革，迅速發(fā)展成為可與 GC、 HPLC相媲美的嶄新的分離分析技術(shù) —— 高效毛細(xì)管電泳 。高效毛細(xì)管電泳分析 high performance capillary electrophoresis高效毛細(xì)管電泳在技術(shù)上采取了兩項(xiàng)重要改進(jìn)： 一是采用了 ,； 二是采用了高達(dá)數(shù)千伏的電壓。? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā)，大大減小了溫度效應(yīng)，使電場(chǎng)電壓可以很高。? 電壓升高，電場(chǎng)推動(dòng)力大，又可進(jìn)一步使柱徑變小，柱長(zhǎng)增加，? 高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相色譜，理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬(wàn)塊 /米，特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬(wàn)。分離過(guò)程169。 電場(chǎng)作用下，毛細(xì)管柱中出現(xiàn)： 電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象 。169。 帶電粒子的 遷移速度 =電泳 +電滲流； 兩種速度的矢量和 。169。 正離子 ： 兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向一致，在 負(fù)極最先流出 ；169。 中性粒子 無(wú)電泳現(xiàn)象，受電滲流影響， 在陽(yáng)離子后流出 ；169。 陰離子 ： 兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向相反 。 ν 電滲流 ν 電泳 時(shí) ,陰離子在負(fù)極最后流出 ,在這種情況下 ,不但可以按類(lèi)分離 ,除中性粒子外 ,同種類(lèi)離子由于受到的電場(chǎng)力大小不一樣也同時(shí)被相互分離。高效毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)、易自動(dòng)化 電源、毛細(xì)管、檢測(cè)器、溶液瓶、分離效率高 在 36種無(wú)機(jī)及有機(jī)陰離子， 離了 24種陽(yáng)離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔板數(shù)；、消耗少 進(jìn)樣量極少，水介質(zhì)中
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