《色毛電泳》ppt課件-文庫吧
2025-04-14 03:25 本頁面
【正文】 進(jìn)行； 有機(jī)物、無機(jī)物、生物、中性分子；生物大分子等； 分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料等； 二、高效毛細(xì)管電泳 (HPCE)基本原理 basic principles of PHCE 電泳是指帶電離子在電場中的定向移動(dòng)，不同離子具有不同的遷移速度， 遷移速度與哪些因素有關(guān)？ 當(dāng)帶電離子以速度 ν 在電場中移動(dòng)時(shí)，受到大小相等、方向相反的電場推動(dòng)力和平動(dòng)摩擦阻力的作用。電場力： FE = qE 阻 力： F = fν故： qE = fνq— 離子所帶的有效電荷；E — 電場強(qiáng)度；ν— 離子在電場中的遷移速度；f — 平動(dòng)摩擦系數(shù) ( 對于球形離子： f =6πηγ； γ — 離子的表觀液態(tài)動(dòng)力學(xué)半徑； η — 介質(zhì)的粘度； )所以，遷移速度：（ 球形離子 ） 物質(zhì)離子在電場中 差速遷移 是電泳分離的基礎(chǔ)。淌度 μ ： 單位電場強(qiáng)度下的平均電泳速度。 1. HPCE中 電滲流現(xiàn)象 當(dāng)固體與液體接觸時(shí)，固體表面由于某種原因帶一種電荷，則因靜電引力使其周圍液體帶有相反電荷，在液 固界面形成雙電層，二者之間存在電位差 。 當(dāng)液體兩端施加電壓時(shí)，就會發(fā)生液體相對于固體表面的移動(dòng)，這種液體相對于固體表面的移動(dòng)的現(xiàn)象叫 電滲現(xiàn)象。 電滲現(xiàn)象中整體移動(dòng)著的液體叫 電滲流 （ electroosmotic flow ， 簡稱 EOF）。 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì)： 內(nèi)表面帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極； 內(nèi)表面帶正電荷，溶液帶負(fù)電荷，電滲流流向陽極； 石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極 ；改變電滲流方向的方法： （ 1）毛細(xì)管改性 表面鍵合陽離子基團(tuán)； （ 2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑 內(nèi)充液中加入大量的陽離子表面活性劑，將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷，溶液表面帶負(fù)電荷。電滲流流向陽極。 電荷均勻分布，整體移動(dòng)， 電滲流的流動(dòng)為平流 ， 塞式流動(dòng) （譜帶展寬很?。?； 液相色譜中的溶液流動(dòng)為層流， 拋物線流型 ，管壁處流速為零，管中心處的速度為平均速度的 2倍（ 引起譜帶展寬較大引起譜帶展寬較大 ）。 電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的 5～ 7倍； 各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度為： ν + =ν 電滲流 + ν +ef 陽離子運(yùn)動(dòng)方向與電滲流 一致 ； ν =ν 電滲流 ν ef 陰離子運(yùn)動(dòng)方向與電滲流 相反 ； ν 0 =ν 電滲流 中性粒子運(yùn)動(dòng)方向與電滲流一致；（ 1）可一次完成陽離子、陰離子、中性粒子的分離；（ 2）改變電滲流的大小和方向可改變分離效率和選擇性，如同改變 LC中的流速；（ 3）電滲流的微小變化影響結(jié)果的重現(xiàn)性
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