色毛電泳ppt課件-wenkub
2023-05-14 03:25:24 本頁(yè)面
【正文】 e capillary electrophoresis高效毛細(xì)管電泳在技術(shù)上采取了兩項(xiàng)重要改進(jìn)： 一是采用了 ,； 二是采用了高達(dá)數(shù)千伏的電壓。 電場(chǎng)作用下，毛細(xì)管柱中出現(xiàn)： 電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象 。 正離子 ： 兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向一致，在 負(fù)極最先流出 ；169。高效毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)、易自動(dòng)化 電源、毛細(xì)管、檢測(cè)器、溶液瓶、分離效率高 在 36種無(wú)機(jī)及有機(jī)陰離子， 離了 24種陽(yáng)離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔板數(shù)；、消耗少 進(jìn)樣量極少，水介質(zhì)中進(jìn)行； 有機(jī)物、無(wú)機(jī)物、生物、中性分子；生物大分子等； 分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料等； 二、高效毛細(xì)管電泳 (HPCE)基本原理 basic principles of PHCE 電泳是指帶電離子在電場(chǎng)中的定向移動(dòng)，不同離子具有不同的遷移速度， 遷移速度與哪些因素有關(guān)？ 當(dāng)帶電離子以速度 ν 在電場(chǎng)中移動(dòng)時(shí)，受到大小相等、方向相反的電場(chǎng)推動(dòng)力和平動(dòng)摩擦阻力的作用。 當(dāng)液體兩端施加電壓時(shí)，就會(huì)發(fā)生液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)，這種液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)的現(xiàn)象叫 電滲現(xiàn)象。 電荷均勻分布，整體移動(dòng)， 電滲流的流動(dòng)為平流 ， 塞式流動(dòng) （譜帶展寬很?。?； 液相色譜中的溶液流動(dòng)為層流， 拋物線流型 ，管壁處流速為零，管中心處的速度為平均速度的 2倍（ 引起譜帶展寬較大引起譜帶展寬較大 ）。V— 外加電壓； Lt— 毛細(xì)管總長(zhǎng)度； Ld— 進(jìn)樣到檢測(cè)器間毛細(xì)管長(zhǎng)度2).分離效率（塔板數(shù)） 在 HPCE中，僅存在縱向擴(kuò)散， σ 2=2Dt 擴(kuò)散系數(shù)小的溶質(zhì)比擴(kuò)散系數(shù)大的分離效率高，分離生物大分子的依據(jù)。2).進(jìn)樣的影響 當(dāng)進(jìn)樣塞長(zhǎng)度 太大時(shí)，引起的峰展寬大于縱向擴(kuò)散。 細(xì)內(nèi)徑毛細(xì)管柱，一方面有利于散熱，另一方面比表面積大，又增加了溶質(zhì)吸附的機(jī)會(huì)。 實(shí)際操作時(shí)，保持毛細(xì)管兩端緩沖溶液平面高度相同。這是最基本、應(yīng)用廣的分離模式；這是最基本、應(yīng)用廣的分離模式；二、毛細(xì)管凝膠電泳 capillary gel electrophoresis ， CGE 將聚丙烯酰胺、瓊脂糖等在毛細(xì)管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。 特點(diǎn) ：抗對(duì)流性好，散熱性好，分離度極高； 但壽命短 。三、 膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜 （ MECC ， MEKC）micellar electrokiic capillary chromatography， MEKC 在電場(chǎng)力的作用下，膠束在柱中移動(dòng)。 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導(dǎo)離子 (充滿毛細(xì)管 )和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，并以同一速度移動(dòng)。五、毛細(xì)管等速電泳（自學(xué)） capillary isotachophoresis ， CITP 3. 不同離子的淌度不同，所形成區(qū)帶的電場(chǎng)強(qiáng)度不同
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