色毛電泳ppt課件-wenkub
2023-05-14 03:25:24 本頁面
【正文】 e capillary electrophoresis高效毛細管電泳在技術(shù)上采取了兩項重要改進： 一是采用了 ,； 二是采用了高達數(shù)千伏的電壓。 電場作用下，毛細管柱中出現(xiàn)： 電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象 。 正離子 ： 兩種效應(yīng)的運動方向一致，在 負極最先流出 ；169。高效毛細管電泳的特點、易自動化 電源、毛細管、檢測器、溶液瓶、分離效率高 在 36種無機及有機陰離子， 離了 24種陽離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔板數(shù)；、消耗少 進樣量極少，水介質(zhì)中進行； 有機物、無機物、生物、中性分子；生物大分子等； 分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學、環(huán)境保護、材料等； 二、高效毛細管電泳 (HPCE)基本原理 basic principles of PHCE 電泳是指帶電離子在電場中的定向移動，不同離子具有不同的遷移速度， 遷移速度與哪些因素有關(guān)？ 當帶電離子以速度 ν 在電場中移動時，受到大小相等、方向相反的電場推動力和平動摩擦阻力的作用。 當液體兩端施加電壓時，就會發(fā)生液體相對于固體表面的移動，這種液體相對于固體表面的移動的現(xiàn)象叫 電滲現(xiàn)象。 電荷均勻分布，整體移動， 電滲流的流動為平流 ， 塞式流動 （譜帶展寬很小）； 液相色譜中的溶液流動為層流， 拋物線流型 ，管壁處流速為零，管中心處的速度為平均速度的 2倍（ 引起譜帶展寬較大引起譜帶展寬較大 ）。V— 外加電壓； Lt— 毛細管總長度； Ld— 進樣到檢測器間毛細管長度2).分離效率（塔板數(shù)） 在 HPCE中，僅存在縱向擴散， σ 2=2Dt 擴散系數(shù)小的溶質(zhì)比擴散系數(shù)大的分離效率高，分離生物大分子的依據(jù)。2).進樣的影響 當進樣塞長度 太大時，引起的峰展寬大于縱向擴散。 細內(nèi)徑毛細管柱，一方面有利于散熱，另一方面比表面積大，又增加了溶質(zhì)吸附的機會。 實際操作時，保持毛細管兩端緩沖溶液平面高度相同。這是最基本、應(yīng)用廣的分離模式；這是最基本、應(yīng)用廣的分離模式；二、毛細管凝膠電泳 capillary gel electrophoresis ， CGE 將聚丙烯酰胺、瓊脂糖等在毛細管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。 特點 ：抗對流性好，散熱性好，分離度極高； 但壽命短 。三、 膠束電動毛細管色譜 （ MECC ， MEKC）micellar electrokiic capillary chromatography， MEKC 在電場力的作用下，膠束在柱中移動。 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導離子 (充滿毛細管 )和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，并以同一速度移動。五、毛細管等速電泳（自學） capillary isotachophoresis ， CITP 3. 不同離子的淌度不同，所形成區(qū)帶的電場強度不同
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