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色毛電泳ppt課件-閱讀頁

2025-05-14 03:25本頁面
  

【正文】 加二極管陣列,光譜信息熒光 1015~ 1017 靈敏度高,樣品需衍生激光誘導(dǎo)熒光 1018~ 1020 靈敏度極高,樣品需衍生電導(dǎo) 1018~ 1019 離子靈敏,需專用的裝置;三、毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣方式 injection method of HPCE 進(jìn)樣量:毛細(xì)管長度的 1%2%;納升級(jí)、非常??;1. 流體力學(xué)進(jìn)樣方式 ( 1)進(jìn)樣端加壓 ( 2)出口端抽真空 ( 3)虹吸進(jìn)樣 毛細(xì)管一端插入樣品瓶,加電壓;2. 電動(dòng)進(jìn)樣方式 進(jìn)樣不均:電歧視現(xiàn)象,淌度大的離子比淌度大的進(jìn)樣量大; 離子丟失:淌度大且與電滲流方向相反的離子可能進(jìn)不去; 特別適合黏度大的試樣; 3. 擴(kuò)散進(jìn)樣 試樣通過擴(kuò)散作用進(jìn)入分離柱端口處。 正離子 :兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向一致,在負(fù)極最先流出; 中性粒子 :無電泳現(xiàn)象,受電滲流影響,在陽離子后流出; 陰離子 :兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向相反; ν 電滲流 ν 電泳 時(shí) ,陰離子在負(fù)極最后流出; 同種類離子由于 差速遷移 被相互分離。 其具有多孔性,類似分子篩的作用,試樣分子按大小分離。 蛋白質(zhì)、 DNA等的荷 /質(zhì)比與分子大小無關(guān), CZE模式很難分離,采用 CGE能獲得良好分離, DAN排序的重要手段。 無膠篩分技術(shù) :采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺。 ,其濃度達(dá)到臨界濃度,形成一疏水內(nèi)核、外部帶負(fù)電的膠束。 2. 電泳流和電滲流的方向相反,且 ν 電滲流 ν 電泳 ,負(fù)電膠束以較慢的速度向負(fù)極移動(dòng); 的結(jié)合。在其等電點(diǎn)時(shí),呈電中性,淌度為零;四、毛細(xì)管等電聚焦(自學(xué)) capillary isoelectric focusing, CIEF 4. 聚焦:具有不同等電點(diǎn)的生物試樣在電場力的作用下遷移,分別到達(dá)滿足其等電點(diǎn) pH的位置時(shí),呈電中性,停止移動(dòng),形成窄溶質(zhì)帶而相互分離; 5. 陽極端裝稀磷酸溶液,陰極端裝稀 NaOH溶液; 6. 加壓將毛細(xì)管內(nèi)分離后的溶液推出經(jīng)過檢測器檢測; 7. 電滲流在 CIEF中不利,應(yīng)消除或減小。 2. 負(fù)離子分析時(shí),前導(dǎo)電解質(zhì)的淌度大于試樣中所有負(fù)離子的。陰極進(jìn)樣,陽極檢測。假設(shè) “ 2” 號(hào)中離子擴(kuò)散到 “ 3” 號(hào),該區(qū)電場強(qiáng)度大,離子被加速,返回到 “ 2” 區(qū);當(dāng) “ 2” 號(hào)中離子跑到 “ 1” 號(hào)區(qū),離子被減速使之歸隊(duì); 4. 特點(diǎn):界面明顯,富集、濃縮作用; 在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液,以電滲流為流動(dòng)相,試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動(dòng)色譜過程;六、毛細(xì)管電滲色譜(自學(xué)) capillary electroosmostic chromatography , CEC提
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