sdspage電泳ppt課件(2)(參考版)
2025-01-17 07:31本頁面
【正文】 電泳開始時氯離子泳動率最大，超過蛋白，因此在后面形成低電導(dǎo)區(qū)，而電場強(qiáng)度與低電導(dǎo)區(qū)成反比，因而產(chǎn)生較高的電場強(qiáng)度，使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動，形成以穩(wěn)定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成一中間層 。電泳開始后， HCL解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。 思考題 : ? 1. SDS在該電泳方法中的作用是什么？ ? 2. 在 SDSPAGE中 TEMED和 AP的作用 ? 濃縮膠的作用是有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經(jīng)過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個狹窄的區(qū)帶。 （ 5） 剝膠時要小心 ,保持膠完好無損 ,染色要充分。 （ 3） 梳子需一次平穩(wěn)插入 ,梳口處不得有氣泡 ,梳底需水平 。 （ 2） 凝膠配制過程要迅速 , 催化劑 TEMED要在注膠前再加入 ,否則凝結(jié)無法注膠 。 ? ：用蒸餾水漂洗數(shù)次 ， 再用脫色液脫色 ， 至蛋白質(zhì)條帶 清晰 。 加入電極緩沖液 pH 濃縮膠 pH 通電 分離膠 pH 加入樣品 ?上樣及電泳 開始電流恒定在 10mA，當(dāng)進(jìn)入分離膠后改為 20mA，溴酚藍(lán)距凝膠邊緣約 5mm時，停止電泳。 開始 8V/cm（
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1