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正文內(nèi)容

色毛電泳ppt課件(專(zhuān)業(yè)版)

  

【正文】 2. 電泳流和電滲流的方向相反,且 ν 電滲流 ν 電泳 ,負(fù)電膠束以較慢的速度向負(fù)極移動(dòng); 的結(jié)合。 減小吸附的方法和途徑 :加入兩性離子代替強(qiáng)電解質(zhì),兩性離子一端帶正電,另一端帶負(fù)電,帶正電一端與管壁負(fù)電中心作用,濃度約為溶質(zhì)的 1001000倍時(shí),抑制對(duì)蛋白質(zhì)吸附,又不增加溶液電導(dǎo),對(duì)電滲流影響不大 。 電滲現(xiàn)象中整體移動(dòng)著的液體叫 電滲流 ( electroosmotic flow , 簡(jiǎn)稱(chēng) EOF)。? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā),大大減小了溫度效應(yīng),使電場(chǎng)電壓可以很高。? 電壓升高,電場(chǎng)推動(dòng)力大,又可進(jìn)一步使柱徑變小,柱長(zhǎng)增加,? 高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相色譜,理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬(wàn)塊 /米,特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬(wàn)。 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì): 內(nèi)表面帶負(fù)電荷,溶液帶正電荷,電滲流流向陰極; 內(nèi)表面帶正電荷,溶液帶負(fù)電荷,電滲流流向陽(yáng)極; 石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷,電滲流流向陰極石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷,電滲流流向陰極 ;改變電滲流方向的方法: ( 1)毛細(xì)管改性 表面鍵合陽(yáng)離子基團(tuán); ( 2)加電滲流反轉(zhuǎn)劑 內(nèi)充液中加入大量的陽(yáng)離子表面活性劑,將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷,溶液表面帶負(fù)電荷。5).其他影響因素 ( 1)電分散作用對(duì)譜帶展寬的影響 當(dāng)溶質(zhì)區(qū)帶與緩沖溶液區(qū)帶的電導(dǎo)不同時(shí),也造成譜帶展寬;盡量選擇與試樣淌度相匹配的背景電解質(zhì)溶液。 (水相)間分配,疏水性強(qiáng)的組分與膠束結(jié)合的較牢,流出時(shí)間長(zhǎng); ,擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍 ; 1. 根據(jù)等電點(diǎn)差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術(shù); 2. 毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)(合成的具有不同等電點(diǎn)范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物),當(dāng)施加直流電壓( 6~ 8V) 時(shí),管內(nèi)將建立一個(gè)由陽(yáng)極到陰極逐步升高的 pH梯度; 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液 pH有關(guān),在酸性溶液中帶正電荷,反之帶負(fù)電荷。三、 膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜 ( MECC , MEKC)micellar electrokiic capillary chromatography, MEKC 在電場(chǎng)力的作用下,膠束在柱中移動(dòng)。 細(xì)內(nèi)徑毛細(xì)管柱,一方面有利于散熱,另一方面比表面積大,又增加了溶質(zhì)吸附的機(jī)會(huì)。 當(dāng)液體兩端施加電壓時(shí),就會(huì)發(fā)生液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng),這種液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)的現(xiàn)象叫 電滲現(xiàn)象。高效毛細(xì)管電泳分析 high performance capillary electrophoresis高效毛細(xì)管電泳在技術(shù)上采取了兩項(xiàng)重要改進(jìn): 一是采用了 ,; 二是采用了高達(dá)數(shù)千伏的電壓。分離過(guò)程169。電滲流流向陽(yáng)極。( 2) “ 層流 ” 現(xiàn)象對(duì)譜帶展寬的影響 一般情況下
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