《色毛電泳》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 色譜，理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬(wàn)塊 /米，特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬(wàn)。 按形狀分類： U型管電泳、柱狀電泳、板電泳； 按載體分類：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳； 傳統(tǒng)電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無(wú)法與其他分析相比。167。 1937年， Tiselius(瑞典 )將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳， 第一次 將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和 α 、 β 、 γ 球蛋白； 發(fā)現(xiàn) 樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定； 第一次 發(fā)明 自由溶液電泳； 第一臺(tái)電泳儀 ； 1948年， 獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng) ；一、概述 generalization經(jīng)典電泳分析 traditional electrophoresis 利用電泳現(xiàn)象對(duì)某些 化學(xué)或生物物質(zhì)化學(xué)或生物物質(zhì) 進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫電泳法或電泳技術(shù)。? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā)，大大減小了溫度效應(yīng)，使電場(chǎng)電壓可以很高。169。 中性粒子 無(wú)電泳現(xiàn)象，受電滲流影響， 在陽(yáng)離子后流出 ；169。電場(chǎng)力： FE = qE 阻 力： F = fν故： qE = fνq— 離子所帶的有效電荷；E — 電場(chǎng)強(qiáng)度；ν— 離子在電場(chǎng)中的遷移速度；f — 平動(dòng)摩擦系數(shù) ( 對(duì)于球形離子： f =6πηγ； γ — 離子的表觀液態(tài)動(dòng)力學(xué)半徑； η — 介質(zhì)的粘度； )所以，遷移速度：（ 球形離子 ） 物質(zhì)離子在電場(chǎng)中 差速遷移 是電泳分離的基礎(chǔ)。 電滲現(xiàn)象中整體移動(dòng)著的液體叫 電滲流 （ electroosmotic flow ， 簡(jiǎn)稱 EOF）。 電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的 5～ 7倍； 各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度為： ν + =ν 電滲流 + ν +ef 陽(yáng)離子運(yùn)動(dòng)方向與電滲流 一致 ； ν =ν 電滲流 ν ef 陰離子運(yùn)動(dòng)方向與電滲流 相反 ； ν 0 =ν 電滲流 中性粒子運(yùn)動(dòng)方向與電滲流一致；（ 1）可一次完成陽(yáng)離子、陰離子、中性粒子的分離；（ 2）改變電滲流的大小和方向可改變分離效率和選擇性，如同改變 LC中的流速；（ 3）電滲流的微小變化影響結(jié)果的重現(xiàn)性；在 HPCE中，控制電滲流非常重要 。3).分離度 影響分離度的主要因素；工作電壓 V； 毛細(xì)管有效長(zhǎng)度與總長(zhǎng)度比；有效淌度差。分離效率明顯下降；理想情況下，進(jìn)樣塞長(zhǎng)度 ： W inj= (24D t )1/2實(shí)際操作時(shí)進(jìn)樣塞長(zhǎng)度小于或等于毛細(xì)管總長(zhǎng)度的 1%～ 2%。 減小吸附的方法和途徑 ：加入兩性離子代替強(qiáng)電解質(zhì)，兩性離子一端帶正電，另一端帶負(fù)電，帶正電一端與管壁負(fù)電中心作用，濃度約為溶質(zhì)的 100100
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1