《色毛電泳》ppt課件-全文預覽
【正文】 色譜，理論塔板數(shù)高達幾十萬塊 /米，特殊柱子可以達到數(shù)百萬。 按形狀分類： U型管電泳、柱狀電泳、板電泳； 按載體分類：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳； 傳統(tǒng)電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無法與其他分析相比。167。 1937年， Tiselius(瑞典 )將蛋白質混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進行自由溶液電泳， 第一次 將人血清提取的蛋白質混合液分離出白蛋白和 α 、 β 、 γ 球蛋白； 發(fā)現(xiàn) 樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定； 第一次 發(fā)明 自由溶液電泳； 第一臺電泳儀 ； 1948年， 獲諾貝爾化學獎 ；一、概述 generalization經(jīng)典電泳分析 traditional electrophoresis 利用電泳現(xiàn)象對某些 化學或生物物質化學或生物物質 進行分離分析的方法和技術叫電泳法或電泳技術。? 毛細管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā)，大大減小了溫度效應，使電場電壓可以很高。169。 中性粒子 無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響， 在陽離子后流出 ；169。電場力： FE = qE 阻 力： F = fν故： qE = fνq— 離子所帶的有效電荷；E — 電場強度；ν— 離子在電場中的遷移速度；f — 平動摩擦系數(shù) ( 對于球形離子： f =6πηγ； γ — 離子的表觀液態(tài)動力學半徑； η — 介質的粘度； )所以，遷移速度：（ 球形離子 ） 物質離子在電場中 差速遷移 是電泳分離的基礎。 電滲現(xiàn)象中整體移動著的液體叫 電滲流 （ electroosmotic flow ， 簡稱 EOF）。 電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的 5～ 7倍； 各種電性離子在毛細管柱中的遷移速度為： ν + =ν 電滲流 + ν +ef 陽離子運動方向與電滲流 一致 ； ν =ν 電滲流 ν ef 陰離子運動方向與電滲流 相反 ； ν 0 =ν 電滲流 中性粒子運動方向與電滲流一致；（ 1）可一次完成陽離子、陰離子、中性粒子的分離；（ 2）改變電滲流的大小和方向可改變分離效率和選擇性，如同改變 LC中的流速；（ 3）電滲流的微小變化影響結果的重現(xiàn)性；在 HPCE中，控制電滲流非常重要 。3).分離度 影響分離度的主要因素；工作電壓 V； 毛細管有效長度與總長度比；有效淌度差。分離效率明顯下降；理想情況下，進樣塞長度 ： W inj= (24D t )1/2實際操作時進樣塞長度小于或等于毛細管總長度的 1%～ 2%。 減小吸附的方法和途徑 ：加入兩性離子代替強電解質，兩性離子一端帶正電，另一端帶負電，帶正電一端與管壁負電中心作用，濃度約為溶質的 100100
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