【正文】 ?掌握紫外 — 可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要組成部件及各部件的要求。 在選定的兩個(gè)波長(zhǎng)處干擾組分應(yīng)具 有相同的吸收。 （三）、雙波長(zhǎng)分光光度計(jì) 由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過(guò)兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長(zhǎng)（ ?1和 ?2）的單色光；利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過(guò)光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度差值 ΔA 對(duì)于多組分混合物、混濁試樣（如生物組織液）分析，以及存在背景干擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長(zhǎng)分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。 由于兩束光 同時(shí) 分別通過(guò)參比池和樣品池，能自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差 。 ，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長(zhǎng)的函數(shù)記錄下來(lái)。 光源： 鎢燈，氘燈；色散元件：光柵；檢測(cè)器：光電管。 752型 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。波長(zhǎng)范圍： 360800nm。 二、分光光度計(jì)構(gòu)造原理 （一）單光束分光光度計(jì) 優(yōu)點(diǎn)：結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，價(jià)格便宜。兩極 電壓 75~100V。 結(jié)構(gòu)：真空密封管、光敏陰極、倍增極、陽(yáng)極 4. 最后放出的光電子 比最初多到 106倍以上， 最大電流可達(dá) 10μA，電流經(jīng)負(fù)載電阻轉(zhuǎn)變 為電壓信號(hào)送入放大器。 ，又會(huì)發(fā)射出更多的電子。 Material Science 光電倍增管：檢測(cè)微弱光信號(hào)的光電元件 原理： ，相鄰電極間加一定電壓。 Material Science HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 規(guī)格： 、 、 、 、 。 在高精度的分析測(cè)定中（紫外區(qū)尤其重要），吸收池要挑選配對(duì)。 石英吸收池：紫外和可見(jiàn)區(qū) 玻璃吸收池：可見(jiàn)區(qū) 為減少光的損失，吸收池的光學(xué)面必須完全垂直于光束方向 。 M aterial Science HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science （二） 單色器 ① 入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器； ② 準(zhǔn)光裝置：使入射光成為平行光束； ③ 色散元件：復(fù)合光分解成單色光；光柵或棱鏡 ④ 聚焦裝置：將所得單色光聚焦至出射狹縫； ⑤ 出射狹縫 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science （三）金屬離子影響下的配位體 ? → ?*躍遷 ? 配位體一般含有生色團(tuán) 、 助色團(tuán) ， 與金屬離子配位后 ， 配位體的共軛結(jié)構(gòu)發(fā)生改變 ，導(dǎo)致吸收光譜藍(lán)移或紅移 ? 定量分析要求：絡(luò)合物與配位劑的最大吸收波長(zhǎng)之差 （ 反襯度 ） 應(yīng)在 60nm以上 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science h? h? HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 ? 配位體配位場(chǎng)強(qiáng)弱順序： IBrClFOHC2O42=H2OSCN吡啶 =NH3乙二胺 聯(lián)吡啶 鄰二氮菲 NO2CN ? dd躍遷概率小， ?小， ，定量分析中應(yīng)用價(jià)值不大 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science 二、無(wú)機(jī)化合物的吸收光譜 金屬離子絡(luò)合物 的吸收光譜 （一） dd 配位場(chǎng)躍遷 ? 過(guò)渡金屬離子具有未充滿(mǎn)的 d軌道 ? 受配位體配位場(chǎng)的影響，原來(lái)能量相同的 d軌道發(fā)生能級(jí)分裂，分裂后 d軌道之間的能量差稱(chēng)為 分裂能 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 ①選用低極性溶劑，以獲得特征精細(xì)結(jié)構(gòu)； ②很好溶解被測(cè)物，具有良好化學(xué)和光化學(xué)穩(wěn)定性； ③溶劑在樣品的吸收光譜區(qū)無(wú)明顯吸收。 Material Science 極性溶劑使精細(xì)結(jié)構(gòu)消失 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science 26 HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 它們本身沒(méi)有生色功能 ， 但當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時(shí) ， 就會(huì)發(fā)生 nπ共軛作用 ，使生色團(tuán)的吸收波長(zhǎng)紅移 ， 且強(qiáng)度增加 。 Material Science HEBEI NORMAL UNIVERSITY, College of Chemistry amp。 Material Science ?max (nm) ? max() (K) E 帶 ???* 184 nm 50000 E1吸收帶 無(wú)精細(xì)結(jié)構(gòu) 204 nm 7000 E2吸收帶 低分辨率精細(xì)結(jié)構(gòu) B帶 254 nm 200 B吸收帶 ???* 和苯環(huán)