【正文】 4. 比較光譜時 , 溶劑要相同 . 117 常用溶劑的光學(xué)透明區(qū) CHCl3 245 乙醚 210 苯 280 環(huán)己烷 210 己烷 210 CCl4 265 正丁醇 210 庚烷 210 DMF 270 二氯甲烷 235 甲醇 215 丙酮 330 二氧六環(huán) 235 異辛烷 210 吡啶 303 乙醇 210 水 191 硝基甲烷 380 大于以上波長時使用 對溶劑的要求 1. 低極性 2. 易溶解被測物 3. 穩(wěn)定 4. 在樣品的吸收光譜區(qū)無明顯吸收 。 2 丙酮的 UV吸收光譜圖 溶劑效應(yīng)（形成氫鍵） 無溶劑效應(yīng) ?E1 ?E2 ?E2 ?E1 ?max藍(lán)移 水 乙醇 己烷 A ? 115 溶劑極性增大 ， ? ? ?* 吸收 紅移 O32 C C H = C ( C H )CH3 溶劑效應(yīng) 無溶劑效應(yīng) ?E1 ?E2 ?E2 ?E1 ?max紅移 ? ? 異亞丙基丙酮 例： 異亞丙基丙酮 305 309 315 329 n ? ?* 243 237 238 230 ? ? ?* 水 甲醇 氯仿 正己烷 溶劑 極性增大 ?max藍(lán)移 ?max紅移 116 溶劑極性影響的結(jié)論 : 1. 非極性溶劑可見精細(xì)結(jié)構(gòu) 。 92 Tx ? 常規(guī)法 T 0 5 10 50 100 Ts T 0 5 10 50 100 落在測量誤差較大的范圍 落在測量誤差較小的范圍 Tr Ts 示差法 結(jié)論： 示差法通過提高測量的準(zhǔn)確度提高了方法的準(zhǔn)確度 93 紫外可見分光光度法在有機(jī)定性分析中的應(yīng)用 有機(jī)化合物分子的電子躍遷和吸收帶 非鍵軌道 成鍵軌道 成鍵軌道 反鍵軌道 反鍵軌道 ? (nm) HCHO = = n ? ? ? ? ???* ? ? ?* ? ? ?*n ? ?* ? ? ?* n ? ?* 94 躍遷 ? max(nm) ? ? ? ?* ~150(200) n ? ?* ~200 100～ 300 n ? ?* 200～ 800 10～ 100 ? ? ?* ~200 ~104 190 CH2－ CH2 CH2 135 （ C－ C） CH3－ CH2－ CH3 135 （ C－ C） CH3－ CH3 125 （ C－ H） CH4 λmax（ nm） 飽和烴類 ? → ?*躍遷 (飽和烴類 ) （作溶劑） 95 ?max(nm) ? ? max(nm) ? H2O 167 1480 CH3OCH3 184 2520 CH3OH 183 150 CH3NH2 215 600 CH3Cl 173 200 (CH3)2NH 220 100 CH3Br 204 200 (CH3)3N 227 900 CH3I 258 365 n→ ?* 躍遷（含具 n電子的雜原子） 96 n→ ?* 躍遷 （帶孤對電子的雜原子與其他 ?鍵共軛） 280～ 300 飽和醛酮 1000( n→ ?*) 16( n→ ?*) 186 280 CH3COCH3 異辛烷 22 280 CH3－ NO2 EtOH 5 339 CH3N＝ NCH3 H2O 60 214 CH3CONH2 EtOH 41 204 CH3COOH ? ?max(nm） 介質(zhì) 97 π→π* 躍遷（不飽和烴類 ) 6000 173 CH三 CH 14000 175 CH2＝ CH2 ? ?max(nm） π→π* 躍遷 的 ?max短， ? 大 , n→ ?* 躍遷 的 ?max長， ? 小 . 98 電荷遷移躍遷（荷移光譜） 特點：譜帶寬 ,吸收強(qiáng)度大 ,λ max處的 ε 可大于 104 。 Cx=Cs+△ Cx A Ax △ Cx △ C 91 ? 測量原理： 當(dāng)試樣中組份的濃度過大時 ， 則 A值很大 ，會產(chǎn)生讀數(shù)誤差 。c(HL). 代入整理： L HLAAK AAap = p H + l g 或 配制一系列 c相同 ,pH不同的溶液 ,測 A. HL、 L 顏色不同 +a L= [ H ] K AA[HL] [L] HL AA89 MO吸收曲線 Aa(HL) Ab (L) 1 2 3 4 5 6 Ab 6 5 4 3 2 1 Aa 350 400 450 500 550 600 ?/nm A 曲線 pH 1 , 2 3 4 5 6 , 由每份溶液的一對 pH、 A，可求得一個 Ka, 取平均值即可 . 90 ? 高含量組分的測定 : ? 配制一系列待測組分的濃度相差較小 ， 且待測組分濃度與試液濃度相近的 標(biāo)準(zhǔn)溶液 ， 以其中濃度最小的標(biāo)準(zhǔn)溶液 (Cs)作參比溶液 ， 測定其它標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 ， 以吸光度對測定溶液和參比溶液的濃度差作圖 ， 得一過原點的標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 Vsp 滴定劑吸收 Vsp 被滴物吸收 Vsp 滴定劑與待測物均吸收 Vsp 產(chǎn)物吸收 86 絡(luò)合物組成的測定 1. 摩爾比法 : 固定 cM ,改變 cR 1:1 3:1 c(R)/c(M) A 3,0 87 2. 等摩爾連續(xù)變化法 : M R M R nn?MR (c c c ）?? 常數(shù)M:R=1:1 cM/c cM/c M:R=1:2 0 1 0 1 88 一元弱酸離解常數(shù)的測定 HL H＋ ＋ L HLHL L= [ H L ] + [ L ]KccAKK???? ? ? ??+ L++aaa(HL)[ H ] ( H L )=++ [ H ] + [ H ]Ka＝ [H+][L]/[HL] 高酸度下，幾乎全部以 HL存在，可測得 AHL＝ εHL 83 多組分的測定 ?x?1, ?y?1, ?x?2, ?y?2由 x,y標(biāo)液 在 ?1, ?2處分別測得 . a) 在 ?1處測組分 x, 在 ?2處測組分 y. b) 在 ?1處測組分 x。由加入待測試樣濃度由低至高依次測定上述溶液的吸收光譜，作一定波長下濃度與吸光度的關(guān)系曲線，得到一條直線。 標(biāo)準(zhǔn)加入法 ? 樣品組成比較復(fù)雜，難于制備組成匹配的標(biāo)樣時用標(biāo)準(zhǔn)加入法。 ? 3)分析條件的選 ? 定量分析方法 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 標(biāo)準(zhǔn)加入法 82 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，由低濃度至高濃度依次測定其吸收光譜，作一定波長下濃度與吸光度的關(guān)系曲線，在一定范圍內(nèi)應(yīng)得到通過原點的直線，即標(biāo)準(zhǔn)曲線。 一般可檢測 104105 mol/l的微量組分，通過某些特殊方法 (如膠束增溶 )可檢測 106107 mol/l的組分。尤其在醫(yī)院的常規(guī)化驗中， 95%的定量分析都用此法。12MoO3+12NH4NO3+12H2O 磷鉬黃 (?小 ) 磷鉬 (V)藍(lán) (?大 ) Sn2+ 80 3. 蛋白質(zhì)測定 — 溴甲酚綠、考馬司亮藍(lán)等 4. 氨基酸測定 — 茚三酮 (紫色化合物 ) 5. 水質(zhì)檢測 : NH4+、 NO Mn2+、 Fe2+、SO4 Hg2+ 6. 藥物含量測定 — 比吸光系數(shù)定量；荷移光譜法測定 . 7. 紫外吸收 (UV): NO NO SO4SO3 CO3 SCN、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋白質(zhì)等。 ? 3．控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶? ? 由測量誤差可知，當(dāng)吸光度在 ～ ，測量誤差最小，所以應(yīng)盡量控制吸光度在此范圍進(jìn)行測定。 ? 當(dāng) T= A=，濃度的測量誤差最小。 ? T%在 80～ 10%即 A=1～ 。對于化學(xué)因素，前面巳經(jīng)講過，現(xiàn)在我們來看儀器測量不準(zhǔn)引入的誤差。 如 測汽水中的 Fe 3. 顯色劑或其他試劑也有吸收， 空白溶液 作參比 例 :鄰二氮菲光度法測 Li2CO3中的 Fe， 參比溶液為不含 Li2CO3樣品的所有試劑 。 Fe3+, Cu2+ FeSSal（紫紅） Cu2+ pH= SSal 測 Fe3＋ :(控制 pH) 75 2. 物理法 — 選擇適當(dāng)?shù)臏y定波長 515 655 415 500 釷 偶氮砷 III 鈷 亞硝基紅鹽 A A 絡(luò)合物 絡(luò)合物 試劑 試劑 ?/nm