【正文】 6 , 由每份溶液的一對 pH、 A，可求得一個(gè) Ka, 取平均值即可 . 90 ? 高含量組分的測定 : ? 配制一系列待測組分的濃度相差較小 ， 且待測組分濃度與試液濃度相近的 標(biāo)準(zhǔn)溶液 ， 以其中濃度最小的標(biāo)準(zhǔn)溶液 (Cs)作參比溶液 ， 測定其它標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 ， 以吸光度對測定溶液和參比溶液的濃度差作圖 ， 得一過原點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 92 Tx ? 常規(guī)法 T 0 5 10 50 100 Ts T 0 5 10 50 100 落在測量誤差較大的范圍 落在測量誤差較小的范圍 Tr Ts 示差法 結(jié)論： 示差法通過提高測量的準(zhǔn)確度提高了方法的準(zhǔn)確度 93 紫外可見分光光度法在有機(jī)定性分析中的應(yīng)用 有機(jī)化合物分子的電子躍遷和吸收帶 非鍵軌道 成鍵軌道 成鍵軌道 反鍵軌道 反鍵軌道 ? (nm) HCHO = = n ? ? ? ? ???* ? ? ?* ? ? ?*n ? ?* ? ? ?* n ? ?* 94 躍遷 ? max(nm) ? ? ? ?* ~150(200) n ? ?* ~200 100～ 300 n ? ?* 200～ 800 10～ 100 ? ? ?* ~200 ~104 190 CH2－ CH2 CH2 135 （ C－ C） CH3－ CH2－ CH3 135 （ C－ C） CH3－ CH3 125 （ C－ H） CH4 λmax（ nm） 飽和烴類 ? → ?*躍遷 (飽和烴類 ) （作溶劑） 95 ?max(nm) ? ? max(nm) ? H2O 167 1480 CH3OCH3 184 2520 CH3OH 183 150 CH3NH2 215 600 CH3Cl 173 200 (CH3)2NH 220 100 CH3Br 204 200 (CH3)3N 227 900 CH3I 258 365 n→ ?* 躍遷（含具 n電子的雜原子） 96 n→ ?* 躍遷 （帶孤對電子的雜原子與其他 ?鍵共軛） 280～ 300 飽和醛酮 1000( n→ ?*) 16( n→ ?*) 186 280 CH3COCH3 異辛烷 22 280 CH3－ NO2 EtOH 5 339 CH3N＝ NCH3 H2O 60 214 CH3CONH2 EtOH 41 204 CH3COOH ? ?max(nm） 介質(zhì) 97 π→π* 躍遷（不飽和烴類 ) 6000 173 CH三 CH 14000 175 CH2＝ CH2 ? ?max(nm） π→π* 躍遷 的 ?max短， ? 大 , n→ ?* 躍遷 的 ?max長， ? 小 . 98 電荷遷移躍遷（荷移光譜） 特點(diǎn)：譜帶寬 ,吸收強(qiáng)度大 ,λ max處的 ε 可大于 104 。 4. 比較光譜時(shí) , 溶劑要相同 . 117 常用溶劑的光學(xué)透明區(qū) CHCl3 245 乙醚 210 苯 280 環(huán)己烷 210 己烷 210 CCl4 265 正丁醇 210 庚烷 210 DMF 270 二氯甲烷 235 甲醇 215 丙酮 330 二氧六環(huán) 235 異辛烷 210 吡啶 303 乙醇 210 水 191 硝基甲烷 380 大于以上波長時(shí)使用 對溶劑的要求 1. 低極性 2. 易溶解被測物 3. 穩(wěn)定 4. 在樣品的吸收光譜區(qū)無明顯吸收 。 2 丙酮的 UV吸收光譜圖 溶劑效應(yīng)（形成氫鍵） 無溶劑效應(yīng) ?E1 ?E2 ?E2 ?E1 ?max藍(lán)移 水 乙醇 己烷 A ? 115 溶劑極性增大 ， ? ? ?* 吸收 紅移 O32 C C H = C ( C H )CH3 溶劑效應(yīng) 無溶劑效應(yīng) ?E1 ?E2 ?E2 ?E1 ?max紅移 ? ? 異亞丙基丙酮 例： 異亞丙基丙酮 305 309 315 329 n ? ?* 243 237 238 230 ? ? ?* 水 甲醇 氯仿 正己烷 溶劑 極性增大 ?max藍(lán)移 ?max紅移 116 溶劑極性影響的結(jié)論 : 1. 非極性溶劑可見精細(xì)結(jié)構(gòu) 。 Cx=Cs+△ Cx A Ax △ Cx △ C 91 ? 測量原理： 當(dāng)試樣中組份的濃度過大時(shí) ， 則 A值很大 ，會產(chǎn)生讀數(shù)誤差 。 Vsp 滴定劑吸收 Vsp 被滴物吸收 Vsp 滴定劑與待測物均吸收 Vsp 產(chǎn)物吸收 86 絡(luò)合物組成的測定 1. 摩爾比法 : 固定 cM ,改變 cR 1:1 3:1 c(R)/c(M) A 3,0 87 2. 等摩爾連續(xù)變化法 : M R M R nn?MR (c c c ）?? 常數(shù)M:R=1:1 cM/c cM/c M:R=1:2 0 1 0 1 88 一元弱酸離解常數(shù)的測定 HL H＋ ＋ L HLHL L= [ H L ] + [ L ]KccAKK???? ? ? ??+ L++aaa(HL)[ H ] ( H L )=++ [ H ] + [ H ]Ka＝ [H+][L]/[HL] 高酸度下，幾乎全部以 HL存在，可測得 AHL＝ εHL由加入待測試樣濃度由低至高依次測定上述溶液的吸收光譜，作一定波長下濃度與吸光度的關(guān)系曲線，得到一條直線。 ? 3)分析條件的選 ? 定量分析方法 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 標(biāo)準(zhǔn)加入法 82 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ? 配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，由低濃度至高濃度依次測定其吸收光譜，作一定波長下濃度與吸光度的關(guān)系曲線，在一定范圍內(nèi)應(yīng)得到通過原點(diǎn)的直線，即標(biāo)準(zhǔn)曲線。尤其在醫(yī)院的常規(guī)化驗(yàn)中， 95%的定量分析都用此法。 ? 3．控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶? ? 由測量誤差可知，當(dāng)吸光度在 ～ ，測量誤差最小，所以應(yīng)盡量控制吸光度在此范圍進(jìn)行測定。 ? T%在 80～ 10%即 A=1～ 。 如 測汽水中的 Fe 3. 顯色劑或其他試劑也有吸收， 空白溶液 作參比 例 :鄰二氮菲光度法測 Li2CO3中的 Fe， 參比溶液為不含 Li2CO3樣品的所有試劑 。 ?反應(yīng)生成的有色化合物 組成恒定，穩(wěn)定 。 68 有機(jī)顯色劑 CH3－ C－ C－ CH3 HO－ N N－ OH ＝ ＝ N N OH COOH SO3H OO型： N N N O H OH ON型 ： PAR N H N H N S N S型 ： 雙硫腙 測定很多重金屬離子，如：鉛、鋅、銅、銀、汞、鎘等。 64 測量誤差公式推導(dǎo) : dA = d(lgT) = d() = dd=cAcArd 34 d==( lg )cTEc T TA= lgT T lgT 最大時(shí)，即 (TlgT) ′= 0 時(shí)誤差最小 , 算得 lgT= , T=% , A = 65 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 A T/% Er r0. 43 4lg( 0. 01 )cTEc T TT??????() 濃度測量的相對誤差與 T(或 A)的關(guān)系 實(shí)際工作中，應(yīng)控制 T在 10～ 70％ , A在 ～ (調(diào) c, b, ?) 66 顯色劑與顯色反應(yīng) 顯色反應(yīng)：在光度分析中將試樣中的待測組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。cm2) B方法比 A方法的靈敏度高 . A. 用鄰二氮菲光度法測定鐵時(shí)， ε508＝ 104 L ? 相同的物質(zhì) , M小則靈敏度高 . 3210= = ( g /c m ) 1 0 .0 0 MMS ????變換單位 : bcmcmol/L=bcM106 ?g/1000cm2 60 例 1 鄰二氮菲光度法測鐵 ?(Fe)=, b=2cm , A= 計(jì)算 ? 、 S 和 解： c(Fe)= mg/L= 103/ = 105(mol 104～ 105 為中等靈敏度 。 光電池，光電管，光電倍增管 47 硒光電池（ Barrierlayer photocell） 適用于 300800 nm, 在 500600 nm范圍