【正文】 最靈敏。 棱鏡： 依據(jù)不同波長光通過棱鏡時折射率不同 . 玻璃 350～ 3200nm, 石英 185～ 4000 nm 入射狹縫 準(zhǔn)直透鏡 棱鏡 聚焦透鏡 出射狹縫 白光 λ 1 λ 2 800 600 500 400 45 光柵： 在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的 等寬度等間距 條 痕 (600、 1200、 2400條 /mm )。 ? c）溶劑作用： ? 溶劑對吸收光譜的影響是比較大的， 溶劑不同時 ，物質(zhì)的 吸收光譜不同 。 36 ? a）離解作用： ? 在可見光區(qū)域的分析中常常是將待測組分同某種試劑反應(yīng)生成有色配合物來進(jìn)行測定的。 ? 另外，當(dāng)溶液中含有 懸浮物或膠粒 等散射質(zhì)點時，入射光通過溶液時就會有一部分光因 散射而損失 掉，使透過光強(qiáng)度減小，測得的吸光度增大，從而引起 偏離吸收定律 。但在紫外可見光分光光度法中，入射光是由連續(xù)光源經(jīng)分光器分光后得到的，這樣得到的入射光并不是真正的單色光 ，而是 一個有限波長寬度的復(fù)合光， 這就可能造成對吸收定律的偏離。 cm1) ? 由 ε=aM , 得 : ? a= ε/M ? = ε /251=(L 27 吸光度與光程的關(guān)系 A = abc b 2b 光源 檢測器 顯示器 參 比 28 吸光度與濃度的關(guān)系 A = abc c 2c 光源 檢測器 顯示器 參 比 29 吸光度與波長的關(guān)系 A = abc 紅 紅 光源 檢測器 顯示器 參 比 藍(lán)綠光 紅光 30 朗伯 比爾定律的適用條件 1. 單色光 應(yīng)選用 ?max處或肩峰處測定 . 3. 稀溶液 濃度增大，分子之間作用增強(qiáng) . 2. 吸光質(zhì)點形式不變 離解、絡(luò)合、締合會破壞線性關(guān)系 , 應(yīng)控制條件 (酸度、濃度、介質(zhì)等 ). 31 溶液濃度的測定 A＝ ? b c 工作曲線法 (校準(zhǔn)曲線 ) 朗伯 比爾定律的分析應(yīng)用 0 c(mg/mL) A * Ax cx 32 ? 例題 ： 已知某化合物的相對分子量為 251，將此化合物用已醇作溶劑配成濃度為 m mol 26 ? 對于 K的這兩種表示方法，它們之間的關(guān)系為： ? ελ=aM ? M為吸光物質(zhì)的分子量。 ? 的單位 : L 25 K 吸光系數(shù) Absorptivity a 的單位 : L 20 光吸收基本定律 :朗伯 比爾定律 朗伯定律 :(1760) A=lg(I0/It)=k1b 當(dāng)入射光的 ? ,吸光物質(zhì)的 c 一定時 ,溶液的吸光度 A與液層厚度 b成正比 . 比爾定律 (1852) A=lg(I0/It)=k2c 當(dāng)入射光的 ? ,液層厚度 b 一定時 ,溶液的吸光度 A與吸光物質(zhì)的 c成正比 . 21 朗伯 比爾定律 意義 : 當(dāng)一束平行單色光通過均勻、透明的吸光介質(zhì)時，其吸光度與吸光質(zhì)點的濃度和吸收層厚度的乘積成正比 . A=lg(I0/It)=kbc 22 透光率 (透射比） T（ Transmittance） t0=ITIA = lg(I0/It) = lg(1/T) = — lgT = Kbc 吸光度 A (Absorbance） = 1 0 = 1 0K b c ATI0 It 入射光 透過光 23 吸光度 A、透射比 T與濃度 c 的關(guān)系 A T (%) c A=kbc k b cT = 1 0100 80 60 40 20 24 ? 比例常數(shù) K的幾種表示方法： ? 吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式中的比例常數(shù)叫“ 吸收系數(shù) ” ， 它的大小可表示出 吸光物質(zhì)對某波長光的吸收本領(lǐng) （ 即吸收程度 ） 。 4)不同濃度的同一種物質(zhì) ，在某一定波長下吸光度 A 有差異，在 λmax 處吸光度 A 的差異最大 。 其中最高的那個峰叫 最大吸收峰 ， 它的最高點所對應(yīng)的波長叫 最大吸收波長 ， 用 λmax表示。 以波長為橫坐標(biāo)，吸收程度為縱坐標(biāo)作圖所得曲線。 10 ?/nm 顏色 互補(bǔ)光 400 ～ 450 紫 黃綠 450 ～ 480 藍(lán) 黃 480 ～ 490 綠藍(lán) 橙 490 ～ 500 藍(lán)綠 紅 500 ～ 560 綠 紅紫 560 ～ 580 黃綠 紫 580 ～ 610 黃 藍(lán) 610 ～ 650 橙 綠藍(lán) 650 ～ 760 紅 分子對光的吸收與吸收光譜 不同顏色的可見光波長及其互補(bǔ)光 藍(lán)綠 11 ? 物質(zhì)的顏色與吸收光的關(guān)系 ： ? 當(dāng)白光照射到物質(zhì)上時，如果物質(zhì)對白光中某種顏色的光產(chǎn)生了選擇性的吸收，則物質(zhì)就會顯示出一定的顏色。平常所見的白光（日光、白熾燈光等）是一種復(fù)合光，它是由各種顏色的光按一定比例混合而得的。 這樣 ，分子振動產(chǎn)生的吸收光譜中 ， 包括轉(zhuǎn)動光譜 ， 故常稱為振 轉(zhuǎn)光譜 。 8 分子吸收光譜類型 ? 遠(yuǎn)紅外光譜 、 紅外光譜 、 紫外 可見光譜 三類 。 6 ? 由圖可見，在每一個 電子能級 上有許多間距較小的 振動能級 ，在每一個 振動能級 上又有許多間距更小的 轉(zhuǎn)動能級 。 ? （ 3）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動。 電子躍遷同時，伴有振動轉(zhuǎn)動能級的躍遷，帶狀光譜。 3 波長范圍： 100 ~ 800 nm。L1, 104%～ 105% –準(zhǔn)確度 能夠滿足微量組分的測定要求： 相對誤差 2～ 5％ （ 1～ 2％） –操作 簡便快速 –應(yīng)用廣泛 基于被測物質(zhì)的分子對紫外 可見光具有選擇性吸收的特性而建立起來的分析方法。 結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。 ? （ 2）原子核在其平衡位置附近的相對振動。 即電子光譜中總包含有振動能級和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶。 ? ? 當(dāng)用光照射分子時，分子就要 選擇性的吸收 某些波長（頻率）的光而由 較低的能級 E躍遷到較高能級E‘上，所 吸收的光的能量就等于兩能級的能量之差： △ E= E‘－ E 光的 頻率 為： γ=△ E/h ? 或光 的 波長 為： λ=hc/△ E 7 ? ? 由于分子 選擇性的吸收 了某些波長的光，所以這些光的 能量就會降低 ，將這些波長的 光及其所吸收的能量 按一定順序排列起來，就得到了分子的 吸收光譜。 在分子振動時同時有分子的轉(zhuǎn)動運動 。 9 ： 1．可見光的顏色和互補(bǔ)色： 在可見光范圍內(nèi)，不同波長的光的顏色是不同的。能 復(fù)合成白光的兩種顏色的光叫互補(bǔ)色光。如果我們讓各種不同波長的光分別通過被測物質(zhì)，分別測定物質(zhì)對不同波長光的吸收程度。峰越高， 表示物質(zhì)對相應(yīng)波長的光的 吸收程度越大 。 19 3) 吸收曲線 可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì) 定性分析 的依據(jù)之一。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長的重要依據(jù)。下面就介紹 K的幾種不同的表示方法。L1表示時， K叫“吸光系數(shù)”，用 a 表示， A＝ a b c 它表示的是當(dāng) c=1g/L、 b=1cm時溶液的吸光度。L1表示時， K叫“ 摩爾吸光系數(shù) ” 用 ? 表示 . ? －摩爾吸光系數(shù) Molar Absorptivity A＝ ? b c 它表示的是 當(dāng) c=1mol/L， b=1cm時 ，物質(zhì)對波長為 λ的光的 吸光度 。摩爾吸光系數(shù)越大，表示物質(zhì)對波長為 λ的光的吸收能力越強(qiáng)，同時在分光光度法中測定的靈敏度也越大。 mol1 A C 34 ? 偏離吸收定律的原因： ? 1) 入射光為非單色光： ? 嚴(yán)格地說吸收定律只適用于入射光為單色光的情況。 35 ? 2) 非平行光和光的散射： ? 當(dāng)入射光是非平行光時，所有光通過介質(zhì)的光的 光程不同 ，引起小的偏離。 3）溶劑作用 。 ? b）酸效應(yīng)： ? 如果待測組分包括在一種酸堿平衡體系中，溶液的酸度將會使得待測組分的 存在形式發(fā)生變化 ，而導(dǎo)致對吸收定律的偏離。 可見光區(qū)： 鎢燈，碘鎢燈 (320～ 2500nm) 紫外區(qū)： 氫燈，