分離科學(xué)與進(jìn)展中科大lecture(4)(參考版)
2024-10-22 11:56本頁面
【正文】 因此在聚酰胺薄層上展開劑洗脫能力的大小順序大致是： ? 水 乙醇 甲醇 丙酮 稀氫氧化銨（鈉）溶液 甲酰胺 二甲基甲酰胺 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 ? 點(diǎn)樣：基本與紙色譜類似 ? 展開：上行展開、下行展開、徑向展開（高效板）、雙向展開、連續(xù)展開（上行或下行）、程序控制多次展開法（ PMD）、加壓薄層展開 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 。 薄層層析中展開劑的 選擇、點(diǎn)樣和展開 ? 聚酰胺薄層：聚酰胺薄層與各類化合物形成氫鍵的能力不但取決于其本身，也與溶劑的介質(zhì)有關(guān)。其性能穩(wěn)定，層析展開后斑點(diǎn)保持圓形不拖尾，分離效果極好，理論塔板數(shù)可達(dá)數(shù)千，為一般薄層的十倍。前面一段為濃縮區(qū)，由孔穴直徑極大的（ ~50mm）、表面積很小、吸附能力極弱的硅膠鋪成；后面的薄層由一般的硅膠吸附劑鋪成，試樣中的各種組分將在兩種薄層的交界處發(fā)生濃縮，然后在進(jìn)入后一種種薄層層析展開，可大大改善分離效果。例如要降低硅膠的活度，可以在硅膠中加入一定量的硅藻土，也有將硅膠 氧化鋁混合鋪層。不含粘合劑（用時需另加）的硅膠稱為硅膠 H。吸附劑的選擇與柱層析相似 薄層層析的吸附劑和薄層 ? 氧化鋁：鋪層時不加粘合劑，直接用干粉鋪層，這樣的層析稱為“干板”或“軟板”加入煅石膏作粘合劑的氧化鋁稱為氧化鋁 G，用氧化鋁 G加水調(diào)成糊狀，鋪層并活化后使用的層析稱為“硬板”。對于一對組分斑點(diǎn)，層析時它們移動的距離分別為 x1， x2，兩個斑點(diǎn)寬為 w1， w2，則分離度可按如下定義： ? Rs = 2 [(x2x1)/(w1+w2)] 薄層層析的分離度 ? 經(jīng)推導(dǎo) Rs和比移值 Rf、分配系數(shù) KD、薄層的理論塔板數(shù) N’間有如下關(guān)系 可見 Rf = 0或 1時無分離 薄層層析的分離度 ? 對于一定的層析系統(tǒng)和被分離組分而言 Rf = Rs最大，一般說來當(dāng) Rf = ~ 可以獲得較好的分離效果 薄層層析的吸附劑和薄層 ? 薄層層析用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、纖維素、聚酰胺等。 薄層層析法的速率理論 ? 擴(kuò)散項常數(shù)： b = 2gDm/qdp Dm是溶質(zhì)分子在展開劑中的擴(kuò)散系數(shù)； dp是吸附劑顆粒的平均直徑； g是溶劑的表面張力； q是溶劑的速度常數(shù)。通常擴(kuò)散項是主要的，當(dāng)吸附劑顆粒小，展開距離較長時尤其如此 ? 因此分子擴(kuò)散是塔板高度增大的主要原因。樣品原點(diǎn)與液面的距離應(yīng)合適。 薄層層析法的速率理論 ? 幾個必要的假設(shè)： ； 2.展開劑的組成恒定不變； 意一點(diǎn)在任何時候展開劑的流速恒定不變； 稍慢。具有分離效率高、分離速度快、靈敏度高，顯色方法多，應(yīng)用面廣等優(yōu)點(diǎn) 薄層層析法的理論基礎(chǔ) ? 由于毛細(xì)作用（展開劑在薄層中存在的各種粗細(xì)毛細(xì)管中流動）和展開劑蒸汽的吸附作用（改變展開劑的流速），薄層層析的理論比各種柱層析要復(fù)雜得多 ? 溶劑在薄層中的流速與展開劑的表面張力 g、粘度 h，以及吸附劑的種類、粒度、均勻度等因素有關(guān)，和展開距離也有關(guān)。 紙層析的點(diǎn)樣和展開 ? 試樣應(yīng)溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲?，如乙醇、氯仿、丙酮?盡量避免用水作溶劑 ，因斑點(diǎn)易擴(kuò)散，且不易揮發(fā)除去 ? 液體試樣可直接點(diǎn)樣，點(diǎn)樣可使用玻璃毛細(xì)管或微量注射器，并排點(diǎn)樣斑點(diǎn)相距 為佳，點(diǎn)樣處距濾紙條的一端約 ~2cm。 ? 紙層析的分離機(jī)理除了分配作用之外，還可能存在吸附和交離子交換作用。 柱層析的操作 層析分離（注意點(diǎn)）： (1)溶解樣品溶劑極性應(yīng)與洗脫劑相近； (2)加樣時注意勿使吸附層受到擾動； (3)試樣盡可能濃； (4)對于難溶于與洗脫劑極性相近的溶劑中的試樣可采用干法上樣； (5)展開時洗脫劑時的流速控制在 ~2mL/min； (6)洗脫方法 [分段洗脫、分別測定；分步洗脫（先弱后強(qiáng)）、切開樣品帶再洗脫 ] 紙層析 ? 紙層析是在濾紙上進(jìn)行的色層分離方法。 ? 濕法裝柱：先在柱內(nèi)加入已選定的洗脫劑，將下端旋塞稍打開，同時將吸附劑緩緩加入管柱，吸附劑一面沉淀一面添加。 柱層
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