[農(nóng)學(xué)]糧油檢驗-維生素(參考版)
2024-10-19 17:48本頁面
【正文】 二者之差即為樣品中 VB2的熒光強度。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 34 五、熒光法測定核黃素 3）測定 經(jīng)凈化處理的樣品提取液，以 440nm為激發(fā)波長，525nm為熒光波長，測定其熒光強度。對于含淀粉高的樣品，加淀粉酶水解；含蛋白質(zhì)高的樣品，加木瓜蛋白酶水解。當(dāng)用連二亞硫酸鈉還原 VB2為無熒光的物質(zhì)后，測定樣液中的熒光強度，還原前后熒光強度之差，即為樣品中 VB2的熒光強度，與標準比較定量。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 31 五、熒光法測定核黃素 用酸水解樣品，使 VB2游離進入酸溶液中。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 30 第七節(jié) 食品中維生素的測定 五、熒光法測定核黃素 核黃素微溶于水，水溶液中呈黃綠色熒光，不溶于有機溶劑，在強酸中穩(wěn)定，堿性溶液中光照易分解。 引起熒光淬滅的因素： 、溴離子、氰酸根離子是典型的熒光淬滅劑 ，溶液中溶質(zhì)分子自撞。 ③氧化硫胺素時，過量的堿性鐵氰化鉀氧化硫色素。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 28 四、硫胺素的測定 ，影響測定結(jié)果的因素有： ①儀器的不穩(wěn)定，引起熒光讀數(shù)的波動。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 27 四、硫胺素的測定 4）測定 用硫酸奎寧溶液校正熒光分光光度計。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 26 四、硫胺素的測定 ② 硫胺素的氧化、萃取同步進行，硫胺素被氧化后，生成憎水性的硫色素而進入正丁醇中，同時避免了硫色素被鐵氰化鉀的氧化。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 25 四、硫胺素的測定 3）氧化硫胺素 在樣液管中，加 15%氫氧化鈉溶液，準確加一定量的正丁醇，加堿性鐵氰化鉀溶液，劇烈振搖，待分層后，取正丁醇溶液脫水。用一定量的熱 25%酸性氯化鉀分次洗滌柱子，將被吸附的硫胺素洗脫，收集洗脫液，即為提純的硫胺素。 樣品進行酸解和酶解的目的，是將結(jié)合的、被淀粉及蛋白質(zhì)吸附的硫胺素釋放。 2021/11/10 國家糧食儲備局標準質(zhì)量中心 23 四、硫胺素的測定 水解、酶解樣品 → 酸提取 → 凈化 → 堿性氧化 → 熒光測定 → 結(jié)果計算 1）提取硫胺素 將樣品粉碎加酸并打成勻漿，高壓鍋中高壓酸解，冷卻，加入糖化酶進行酶解?；罨玫母∈?，必須做回收實驗，回收率要在 92%以上。熒光法測定硫色素時，激發(fā)波長為 365nm，發(fā)射波長為 435nm。 國標 GB/T1470093規(guī)定了飼料原料、配合飼料、維生素預(yù)混料等樣品中維生素的測定方法。測定硫胺素時，可采用經(jīng)重氮化反應(yīng)后的比色法進行，也可以采用在堿性條件下，用鐵氰化鉀氧化為硫色素，進行熒光法或高壓液相色譜法分析。測定樣液的吸光
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