蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)(參考版)
2025-05-17 06:26本頁面
【正文】 臨用前取原液 15 ml，加蒸餾水至 100 ml，用粗濾紙過濾后，最終濃度為 %。所以常用來測定蛋白質(zhì)含量。反應(yīng)速度快，約在 2分鐘左右時間達(dá)到平衡，在室溫一小時內(nèi)穩(wěn)定。在酸性溶液中，其以游離存在呈棕紅色；當(dāng)它與蛋白質(zhì)通過疏水作用結(jié)合后變?yōu)樗{(lán)色。白明膠分子中無色氨酸，所以不呈此反應(yīng)。靜置后，觀察在兩液界面上出現(xiàn)的紅紫色環(huán)，于水浴中微熱，可幫助顏色形成。待各管出現(xiàn)黃色后，于室溫下逐滴加入 10%氫氧化鈉溶液至堿性，觀察顏色變化。 （ 2）在一小塊濾紙上滴一滴 %甘氨酸溶液，風(fēng)干后，再在原處滴一滴 %茚三酮乙醇溶液，在微火旁烘干顯色，觀察紫紅色斑點的出現(xiàn)。觀察紫玫瑰色的出現(xiàn)。添加要避免過量硫酸銅，否則，生成的藍(lán)色氫氧化銅能掩蓋粉紅色。冷后，加 10%氫氧化鈉溶液約 1ml，振蕩混勻，再加 1%硫酸銅溶液 1滴，再振蕩。用微火加熱使尿素熔化，尿素放出氨 。 （ 一）雙縮脲反應(yīng) 原理
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