【正文】 生產(chǎn)臭氧的原料主要是空氣和電能，一般通過(guò)高頻臭氧發(fā)生器來(lái)制取。 臭氧滅菌消毒的原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解為氧分子（姚）和單個(gè)氧原子（ O），后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌有極強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將細(xì)菌殺死?！痹诟戒浺坏?4 點(diǎn)中強(qiáng)調(diào)了設(shè)備清洗是必要的驗(yàn)證內(nèi)容之一。而對(duì)于主要污染途徑的表面，常見(jiàn)的消毒滅菌方法有：紫外線燈照射，臭氧接觸，過(guò)氧乙酸、甲醛、乳酸等氣體熏蒸，消毒劑噴灑等。而在實(shí)際生產(chǎn)中，由于機(jī)器的運(yùn)行、人員的進(jìn)出，建筑物的表面均會(huì)產(chǎn)生塵粒，從而滋生細(xì)菌并極易再吹落；特別是人員的污染幾乎是 唯一 的細(xì)菌來(lái)源，一個(gè)人每小時(shí)約散發(fā) 1000 個(gè)死皮細(xì)胞（相當(dāng)于 20 微米 大小的粒子〕，因此人身凈化必須 嚴(yán)格按 SOP 執(zhí)行（人手需經(jīng)消毒液浸泡或噴灑）； 無(wú)菌室的室內(nèi)建筑材料、設(shè)施設(shè)備等應(yīng)能經(jīng)受藥物的消毒滅菌處理；潔凈服的質(zhì)地應(yīng)光滑、不產(chǎn)生靜電、不脫落纖維和顆粒性物質(zhì)，也就是要選用不產(chǎn)生靜電或經(jīng)防靜電處理的材料；潔凈服的洗滌、干燥、整理，必須在潔凈室環(huán)境中進(jìn)行，必要時(shí)應(yīng)按要求滅菌（無(wú)菌衣必須經(jīng)高溫消毒滅菌）；物料、容器、設(shè)備、儀器進(jìn)人無(wú)菌室應(yīng)做嚴(yán)格的消毒滅菌處理；定期進(jìn)行室內(nèi)消毒滅菌操作，等等，以使?jié)崈羰以趧?dòng)態(tài)狀態(tài)下也符合 GMP 的規(guī)定要求。與控制廠房設(shè)施污染有關(guān)的主要是空氣與表面。 用平均菌落數(shù)判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。測(cè)試報(bào)告的編寫(xiě)格式見(jiàn) 下 表 。 最少培養(yǎng)皿數(shù)參考表 潔凈度級(jí)別 所需 Ф 90mm 的培養(yǎng)皿數(shù)（沉降 計(jì)） 100 14 10000 2 100000 2 5） 采樣點(diǎn)的位置可以同懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)。 3） 測(cè)試時(shí)間對(duì)單向流，如 100 級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái) ，測(cè) 試應(yīng)在凈化空凋系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于 10min 后開(kāi)始；對(duì)非單向，如 10000 級(jí)、 100000 級(jí)以上的凈化房間 ，測(cè) 試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于 30min 后開(kāi)始。 注意事項(xiàng) 測(cè)試用具要做滅菌處理，以確保測(cè)試的可靠性、正確性；采取一切措施防止人為對(duì)樣 本的污染；對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù) 做 詳細(xì)的記錄；由于細(xì)菌種類(lèi)繁多，差別甚大 ， 計(jì)數(shù) 時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。 2）培養(yǎng) ： 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于 3035℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。此外，用擦拭法收集培養(yǎng)的建筑物表面（墻壁、地板、天花板等）以及操作人員衣著上的細(xì)菌亦屬于沉降菌測(cè)試的內(nèi)容。 ②若某側(cè)點(diǎn)的 浮游菌平均濃度超過(guò)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對(duì)此區(qū)域先行消毒，然后重新采樣2 次， 2 次側(cè)試結(jié)果必須合格。測(cè)試報(bào)告的格 18 式如 下 表。 采 樣點(diǎn)布置 參考圖 采樣量根據(jù)日常檢測(cè)及環(huán)境驗(yàn)證確定，每次最小采樣量見(jiàn) 下 表 。 采樣點(diǎn)的位置可以同懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)。 17 最少采樣點(diǎn)數(shù)目表 面積（ S） m2 100 10000 100000 驗(yàn)證 監(jiān)測(cè) 驗(yàn)證 監(jiān)測(cè) 驗(yàn)證 監(jiān)測(cè) S10 23 1 2 1 2 — 10≤ S20 4 2 2 1 2 — 20≤ S40 8 3 2 1 2 — 40≤ S100 16 4 4 1 2 — 100≤ S200 40 — 10 — 3 — 200≤ S400 80 — 20 — 6 — 400≤ S 160 — 40 — 13 — 注： ，對(duì)于 100 級(jí)的單向流 潔凈 室（包括層流工作臺(tái)），指的是送風(fēng)口面積；對(duì)于 l0000級(jí)、 I00000 級(jí)的非單向流潔凈室，指的是房間面積。 測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級(jí)別的工作服。 ? 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)做詳細(xì)記錄。 4）菌落計(jì)數(shù)用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用 510 倍放大鏡檢查是否有遺漏。 關(guān)閉真空泵，放人培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。必須定期對(duì)恒溫培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。 ④注意事項(xiàng)：采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造；采樣管?chē)?yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑；采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)點(diǎn)的高度定，盡量減少?gòu)澢?；真空抽氣泵的排氣量?yīng)與采樣器匹況，宜采用無(wú) 油 真空抽氣泵，必要時(shí)可在排氣口安裝氣體過(guò)濾器，真空抽氣泵安裝的 16 位置必須適當(dāng)，一般裝在采樣器下面。校驗(yàn)的項(xiàng)目有：定時(shí)器、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速、流量計(jì)。 狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣，通過(guò)采樣器的縫隙式平板，將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋 轉(zhuǎn)的平板培養(yǎng)基表面上，附著的活微生物粒子經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。在適宜的生長(zhǎng)條件下，將收集到的浮游菌讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落 進(jìn) 行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境中單位體積空氣中菌落數(shù)的多少。浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以 下 近似公式： Ng= N Vs f T 式中， Ng為在 f 面 積上的細(xì)菌沉降數(shù) (CFU)； N 為空氣中的浮游菌濃度 (CFU/m 3）； Vs為含菌粒子沉降速度（ cm/s)； T 為沉降時(shí)間 (s)。 細(xì)菌很微小，人們的肉眼看不見(jiàn)。墓級(jí)別界限。 UCL= M 十 t SE 式中， UCL 為平均值均值的 95%置信上限， 粒 /m 3； t 為 95%置信上限的 t 分布系數(shù)，見(jiàn) 下表。 式中， A 為某一采樣點(diǎn)的平均粒子濃度，粒 /m3； C 為某一采樣點(diǎn)的粒子濃度（ i＝ 1， 2， ? ，n），粒 /m3； N 為某一采樣點(diǎn)上的采樣次數(shù) 。 2） 對(duì)于單向流，計(jì)數(shù)器采樣管口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流，采樣管口宜向上。 采樣點(diǎn)的位置，一般在離地面 高度的水平面上均勻布置；采樣點(diǎn)多于 5 個(gè)時(shí)，也可以在離地面 高度的區(qū)域內(nèi)分層布置．但每層不少于 5 點(diǎn)。測(cè)試時(shí)間：對(duì)單向流，測(cè)試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 10min 后開(kāi)始；對(duì)非單向流，測(cè)試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 30min 后開(kāi)始。靜態(tài)測(cè)試 ( at rest test)是指潔凈室（區(qū)）凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)己處于正常運(yùn)行狀態(tài)，工藝設(shè)備已安裝，潔凈室（區(qū)）內(nèi)沒(méi)有生產(chǎn)人員的情況下進(jìn)行的測(cè)試。 6） 必須按照儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器做檢定，以保證測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性。 2）采樣管口置采樣點(diǎn)采樣時(shí)，在確認(rèn)計(jì)數(shù)穩(wěn)定后方可開(kāi)始連續(xù)讀數(shù)。 懸浮粒子的測(cè)試方法所使用的儀器有：光散射粒子計(jì)數(shù)器（用于粒徑 ≥ m 的懸浮粒子計(jì)數(shù)）；濾膜顯微鏡（用于粒徑 ≥ 5μ m 的懸浮粒子計(jì)數(shù)）。 第六節(jié) 潔凈度測(cè)定 在 HVAC 系統(tǒng)驗(yàn)證的程序中，潔凈度測(cè)定當(dāng)屬于性能確認(rèn)階段。浮游菌測(cè)定需要專(zhuān)門(mén)的采樣器，其帶有真空抽氣泵，流量計(jì)、定時(shí)器等。激光粒于計(jì)數(shù)器有手提式和臺(tái)式兩種規(guī)格。 四 激光粒子計(jì)數(shù)器 激光粒子計(jì)數(shù)器用于潔凈度檢測(cè)。風(fēng)量罩專(zhuān)用于測(cè)量送風(fēng)和回風(fēng)口的風(fēng)量， 計(jì)數(shù) 單位為 m3/h。因此，潔凈廠房中的空氣平衡是一項(xiàng)非常重要并且技術(shù)性強(qiáng)調(diào)試復(fù)雜的工作。在過(guò)濾器阻力監(jiān)測(cè)方面，還可以用差壓開(kāi)關(guān)進(jìn)行報(bào)警控制，或用差壓變送器將差壓信號(hào)送到控制計(jì)算機(jī)中。將它們裝在房間墻壁上．可直接讀取差壓值（有的帶電信號(hào)輸出功能）。 二 差壓表 差壓表主要用于潔凈室差壓指示。阻容法將濕度顯示數(shù)值轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)輸出， 為濕度計(jì)的小型集成化、自動(dòng)化控制提供了可行性。無(wú)特殊要求時(shí)，溫度應(yīng)控制在 18~26℃，相對(duì)濕度控制在 45％ ~65％。濕度被定義為，氣體中的水蒸汽含量，常用單位有 g/L, ppm, mmHg、 露點(diǎn)及相對(duì)濕度（％）等。這些儀表對(duì)生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)行測(cè)量、控制、監(jiān)督和保護(hù)，既是 GMP 系統(tǒng)在線控制的眼睛；又有著“腦 ”和“手 ” 的作用，是制藥工業(yè)自動(dòng)控制系統(tǒng)的必要組成部分。 第五節(jié) 制藥環(huán)境監(jiān)測(cè)儀表及其校準(zhǔn) GMP 規(guī)定生產(chǎn)環(huán)境應(yīng)符合空氣潔凈度的要求，而凈化系統(tǒng)工程中空氣中的微粒、微生物、溫度、濕度、壓力、潔凈度等參數(shù)需要儀器儀表來(lái)采 集。 四）懸浮粒子 、浮游菌和沉降菌的預(yù)測(cè)定 潔凈室中的懸浮粒子及微生物數(shù)的預(yù)測(cè)定是為最終的環(huán)境評(píng)價(jià)作準(zhǔn)備，以便在測(cè)定時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)解決。無(wú)特特殊要求時(shí)，溫度應(yīng)控制在 1826℃ ，相對(duì)濕度控制在 45％一 65％。 我國(guó) GMP（ 1998）第十六條規(guī)定：“潔凈室（區(qū)）的窗戶、天棚及進(jìn)人室內(nèi)的管道、風(fēng)口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均 應(yīng)密封。這一項(xiàng)測(cè)定應(yīng)在風(fēng)量測(cè)定之后進(jìn)行。 房間的換氣次數(shù) n 可由下式計(jì)算出： 1 2 n+LAHLLn ??? ? … （ 次 /時(shí) ） 式中， L1， L2， ?， Ln，為房間各送風(fēng)口的風(fēng)量， m3/h； A 為房間面積， m2； H 為房間高度，m。直接測(cè)量法使用的儀表是風(fēng)量罩，可直接將罩子套住風(fēng)口，就可讀數(shù)。 風(fēng)量測(cè)試及換氣次數(shù)的計(jì)算 HVAC 系統(tǒng)風(fēng)量的測(cè)定內(nèi)容，包括測(cè)定總送風(fēng)量、新風(fēng)量、一次回風(fēng)量、二次回風(fēng)量、排風(fēng)量、以及各 干 、支風(fēng)道內(nèi)風(fēng)量和送（回）風(fēng)口的風(fēng)量等。 氣流流向的測(cè)定 高效過(guò)濾器的氣流流向的測(cè)定主要用于層流工作臺(tái)及層流罩。 除濕器測(cè)試的項(xiàng)目 處理風(fēng)機(jī)和再生風(fēng)機(jī)的轉(zhuǎn)速、電流、電壓、風(fēng)量；蒸汽的壓力或電加熱的功率；再生排放溫度。 其他文件 1） 潔凈室溫度、相對(duì) 濕度記 錄； 2）房間壓差記錄； 3） 高效過(guò)濾器 (HEPA）的風(fēng)速及氣流流型報(bào)告 ； 4） 機(jī)組調(diào)試及空氣平衡報(bào)告； 10 5） 測(cè)試儀器的校正和校驗(yàn)證書(shū)； 6） 懸浮粒子和微生物的預(yù)檢； 7） 調(diào)試中發(fā)生的主要 問(wèn) 題及采取的糾正措施； 8） 相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（監(jiān)測(cè)、運(yùn)行及維護(hù)）的草案。 第四節(jié) 廠房與設(shè)施的運(yùn)行確認(rèn) 制藥企業(yè)的空調(diào)凈化系統(tǒng)安裝調(diào)試完成后，就要檢查空調(diào)凈化系統(tǒng)與設(shè)計(jì)要求的相符性，要在實(shí)際測(cè)試的基礎(chǔ)上確立系統(tǒng)的運(yùn)行參數(shù)（標(biāo)準(zhǔn)），在保證氣流方向符合要求的前提下，測(cè)試并確定潔凈室的風(fēng)量、換氣次數(shù)及各潔凈室的壓差范圍。 對(duì) HVAC 系統(tǒng)調(diào)試及驗(yàn)證的儀器儀表的種類(lèi)和規(guī)格較多，制藥企業(yè)不必一一配齊，有些是專(zhuān)業(yè)測(cè)試單位配備的。 潔凈室潔凈度測(cè)定用的儀器 1） 光散射式白熾光粒子計(jì)數(shù)器（如 Royco 202； 2） 激光粒子計(jì)數(shù)器（如 LASX 型）。 將它們裝在凈化設(shè)備上或房間的墻上 ， 可直接讀得風(fēng)壓值，并加以記錄。 HVAC 系統(tǒng)常用的電工儀表 1） 轉(zhuǎn)數(shù)表。 測(cè)量風(fēng)速的儀表 1）葉輪風(fēng)速儀。 測(cè)量空氣相對(duì)濕度（ RH， relative humidity）的儀表 1）普通干濕球溫度計(jì)。當(dāng)然試驗(yàn)名稱(chēng)就不再叫 DOP法了。而高效過(guò)濾器其效率與穿透率存在以下的關(guān)系： K＝（ 1 一 a） x 100% 式中， K 為高效過(guò)濾器穿透率，％ ； a 為高效過(guò)濾器效率，％。配套的氣溶膠光度計(jì)，是一種測(cè)定和顯示氣溶膠濃度的儀器。若層流裝置過(guò)濾器的泄漏試驗(yàn)和空氣流速測(cè)試均符合規(guī)定，潔凈室的潔凈度是不難達(dá)到的 國(guó)際上及國(guó)內(nèi)一些制藥企業(yè)多采用 DOP 法檢漏。 在潔凈室中，高效過(guò)濾器是實(shí)現(xiàn)高潔凈度空氣凈化的關(guān)鍵設(shè)備。 空調(diào)設(shè)備所用的儀表及測(cè)試儀器的一覽表及檢定報(bào)告 空調(diào)設(shè)備包括空調(diào)器及除濕機(jī)，其所附的儀表主要有壓力表、流量計(jì)、風(fēng)壓表等。 風(fēng)管及空調(diào)設(shè)備清潔的確認(rèn) 清潔級(jí)別小于 10 萬(wàn)級(jí)的 HVAC 系統(tǒng)的通風(fēng)管道必須進(jìn)行清洗。醫(yī)藥工業(yè)空調(diào)凈化系統(tǒng)的風(fēng)管材料宜采用鍍鋅薄鋼板、 PVC 板、不銹鋼板，不宜采用玻璃鋼風(fēng)管。 空氣處理設(shè)備的安裝確認(rèn)主要是指機(jī)器設(shè)備安裝后，對(duì)照設(shè)計(jì)圖紙及供應(yīng)商提供的技術(shù)資料，檢查安裝是否符合設(shè)計(jì)及安裝規(guī)范。制藥企業(yè)可根據(jù) GMP 及驗(yàn)證要求選取檢測(cè)項(xiàng)目。 3）測(cè)試記錄和操作規(guī)程。 下面對(duì) HVAC 系統(tǒng)的安裝確認(rèn)從兩個(gè)方面進(jìn)行討論。在清掃和系統(tǒng) 初步調(diào)整后，連續(xù)運(yùn)行一段時(shí)間，然后進(jìn)行檢漏等項(xiàng)目測(cè)定。主要內(nèi)容有以下 幾 個(gè)方面： 1） HVAC 系 統(tǒng)和工藝布置的平面圖、剖面圖及系統(tǒng)圖； 2） 對(duì)空氣環(huán)境條件，即潔凈度級(jí)別、溫度、濕度、風(fēng)速等的要求： 3） 空氣處理方案； 4）送回風(fēng)量、排風(fēng)量及氣流組織； 5）人凈、物凈的方案； 6） 潔凈室的使用情況； 7）廠區(qū)及其周?chē)廴厩闆r。該系統(tǒng)是由空氣處理裝置（包括熱源）、空氣輸送和分配設(shè)備等組成的完整系統(tǒng)。竣工驗(yàn)收的檔案內(nèi)容有：綜合性文件資料；可行性研究報(bào)告；選址及勘察文件資料；設(shè)計(jì)文件資料；工程建設(shè)施工文件資料；工藝設(shè)備資料；生產(chǎn)技術(shù)準(zhǔn)備、試生產(chǎn)資料；外事工作文件資料；竣工驗(yàn)收文件資料；其他有關(guān)資料。 單項(xiàng)工程質(zhì)量評(píng)定分優(yōu)良或合格兩種。 從國(guó)外成套引進(jìn)技術(shù)的建設(shè)項(xiàng)目的竣工驗(yàn)收，還應(yīng)按與外商簽汀的合同及有關(guān)規(guī)定辦 理。 3)對(duì)于建設(shè)項(xiàng)目，已按設(shè)計(jì)要求建成，符合前述驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，具備投產(chǎn)或使用條件，并做好所屬單項(xiàng)工程的竣工驗(yàn)收工作后，即可由該建設(shè)項(xiàng)目的驗(yàn)收委員會(huì)辦理竣工驗(yàn)收手續(xù)。承包商在完成上述工作和準(zhǔn)備好竣工資料后，即可向業(yè)主提交竣工驗(yàn)收?qǐng)?bào)告。 5 二）竣工 驗(yàn)收 的條件 對(duì)制藥企業(yè)的新建項(xiàng)目而言，必須在完成以下項(xiàng)目后，才符合竣工驗(yàn)收的條件： 1） 生產(chǎn)性項(xiàng)目和輔助性公用設(shè)施，已按設(shè)計(jì)要求完成，能滿足生產(chǎn)使用； 2） 空調(diào)凈化系統(tǒng)完成風(fēng)量平衡，潔凈室完成粒子測(cè)定，并有書(shū)面報(bào)告； 3） 主要工藝設(shè)備、配套設(shè)施經(jīng)單機(jī)試車(chē)和聯(lián)動(dòng)負(fù)荷試車(chē)合格； 4） 生產(chǎn)準(zhǔn)備工作能適應(yīng)投產(chǎn)的需要； 5） 環(huán)境保護(hù)設(shè)施、勞動(dòng)安全衛(wèi)生設(shè)施、消防設(shè)施己按