【導(dǎo)讀】HCV的結(jié)構(gòu)………………總結(jié)和展望………………………基于NS5B抑制劑的創(chuàng)新藥物設(shè)計…………………病，在世界范圍內(nèi)影響著大約億人口。HCV有六種基因型，在全球的分布。丙肝的潛伏期為兩周至六個月。最初被感染后，大約80%的人。并不會出現(xiàn)任何癥狀?？赡艹霈F(xiàn)的急性癥狀包括發(fā)熱、全身乏力、食欲下降、惡。大約75-85%的新感染者出現(xiàn)慢性肝病，慢性感染者中60-70%會出現(xiàn)慢性肝病，5-20%會出現(xiàn)肝硬化，1-5%會死于肝硬化或肝癌。丙肝是25%肝癌患者的致癌因。每年，有35萬余人死于與丙肝相關(guān)的肝臟疾病。目前，還沒有預(yù)防丙肝的疫苗。干擾素和利巴韋林抗病毒聯(lián)合療法是目前治。療丙肝的主要方法。但干擾素在全球并不能普遍獲得，并不總是耐受良好，有些。結(jié)果，雖然一般認(rèn)為丙肝是可以治愈的，但很多人卻未能痊愈。并且，臨床實踐證明，將多組分、不同機制的藥物連用的雞尾酒療法的效。所以，全球?qū)π聶C制的強效抗HCV藥物的研發(fā)正在如火如荼的進行中，我們也對其產(chǎn)生極大興趣。

　　

【正文】 21中， Aamp。D 公司披露了以下結(jié)構(gòu)骨架： 此專利 披露了 7 個化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見下表（ 活性結(jié)果 pEC50 為TLR7 激動劑誘導(dǎo) SEAP（ secreted alkaline phosphatase）產(chǎn)生達(dá)到此化合物最大水平一半時所需的濃度）。 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 1 pEC50= 2 pEC50= 3 pEC50= 4 pEC50= 48 5 6 7 而在專利 US2020099870A122中， Aamp。D 公司對右側(cè)邊鏈長度以及形狀進行了更深入的研究，披露了以下骨架： 此類化合物是 TLR7 的激動劑，給出了近 20 個化合物結(jié)構(gòu)?，F(xiàn)將部分化合物活性列出： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 4 pEC50= 5 pEC50= 49 6 pEC50= 7 pEC50= 8 pEC50= 而在專利 US2020192153A123中， Aamp。D 公司對右側(cè)邊鏈末端為酯基的情況進行了研究，披露了以下骨架： 此類化合物是 TLR7 的激動劑，給出了近 70 個化合物結(jié)構(gòu)?，F(xiàn)將部分化合物活性列出 （ TLR7@ HEK293） ： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 1 EC50= 3 EC50= 50 15 EC50= 16 EC50= 17 EC50= 18 EC50= 在專利 US2020306610A124中， Aamp。D 公司披露了以下結(jié)構(gòu)骨架： 此專利 披露了約 75 個化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見下表（ MEC， 活性結(jié)果為誘導(dǎo) INF 所需最低濃度）。 化合物結(jié)構(gòu)見下表： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 1 MEC= 2 MEC=3 nM 51 3 MEC=1 nM 4 MEC=1 nM 5 6 MEC=10 nM 7 8 MEC=3 nM 9 MEC=3 nM 10 MEC=1 nM 11 MEC=10 nM 在專利 US2020236348A125中， Gilead Sciences, ： 52 此專利 披露了約 50 個化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見下表 。 TLR7 活性報告 HCV@HEK293 Assay IFN @PBMC Assay EC50 范圍為 ECmax范圍為 ； Examples A,C,D,F,J,N,R,W,Y,AI,AJ,AQ, AS,AU,AY,AW,AZ,BE,BG,BH,and BM 的 IFN ECmax 值小于 5 nM。 化合物結(jié)構(gòu)見下表： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) A C D F J N R W 53 Y AI AJ AQ AS AU AY AW AZ BE BG BH BM 并且，上表中化合物 W的活性在專利 US2020200836A126中被深入報道。 而在專利 US2020098248A127中， Gilead Science, 更深入的研究，披露了以下骨架： 54 此類化合物是 TLR7 的激動劑，給出結(jié)構(gòu)的 59 個化合物中多數(shù)化合物的活性（ MEC）接近 1nM?，F(xiàn)將部分代表性結(jié)構(gòu)列出： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) D E F G M O P T X AE 在專利 US2020202484A128中， Gilead Sciences, ： 55 此專利 披露了約 70 個化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見下表 。 項目 TLR7 活性報告 HCV@HEK293 Assay EC50 范圍為 IFN@PMBC Assay ECmax范圍為 ； 部分化合物結(jié)構(gòu)見下表： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 1 2 3 4 5 6 7 8 56 9 10 11 12 13 14 15 16 Pfizer 公司 US2020264448A129專利披露了 250 個化合物結(jié)構(gòu)，骨架如下： 部分活性結(jié)果與結(jié)構(gòu)見下表（ 活性結(jié)果 ED50為 TLR7激動劑增加干擾素 IFN釋放從而使 PBL/HCV復(fù)制水平降低 50%時的濃度）。 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 57 1 ED50=30 nM 2 ED50=5 nM 4 ED50=72 nM 5 ED50=42 nM 6 ED50=17 nM 注：化合物 1228 在 10μM 濃度下對 HCV的復(fù)制都表現(xiàn)出大于 50%的抑制。 而在專利 US2020098294A130中， Dennis A. Carson 公司披露了以下骨架： 此類化合物是 HCV治療藥物的前藥，但在專利中并沒有提及機理是否是通過 TLR 途徑實現(xiàn)，然而鑒于其與上述 Anadys 化合物結(jié)構(gòu)的相似性，也將其進展列出。 部分化合物活性及結(jié)構(gòu)見下表： 項目 活性報告 58 IFNα@ PBMCs TLR7 (EC50=the concentration of pound at which 50% of the maximal IFN concentration was achieved) 59 在專利 US2020308609A131中， GlaxoSmithKline LLC 公司披露了以下化合物： 其活性結(jié)果如下表所示： 項目 活性報告 IFNα@ PBMCs（冷藏） pEC50 （以 1μM resiquimod作參照） IFNα@ PBMCs（新鮮） pEC50≥9 （以 1μM resiquimod作參照） TNF@ PBMCs（新鮮） pEC50≤ （以 1μM resiquimod作參照） AllergenDriven Cytokine Assay @ PBMCs（新鮮） EC50≈ μM IFNα@ BALBc mice 鼻內(nèi)給藥 21029 pg/mL Stability testing 在 Q1A 和 Q1B 條件下穩(wěn)定 、 擴環(huán) 8羥基腺嘌呤類 在專利 US2020203301A13 US2020071354A133中， Gilead Sciences, 司披露了以下骨架： 此專利 披露了約 120 個化合物結(jié)構(gòu)，并進行了比較深入的生物學(xué)活性研究 .60 部分高活性（ IFNα MEC=）化合物結(jié)構(gòu)如下 : TLR7 活性報告 IFN @PMBC Assay (IFNα MEC=引起 IFNα的產(chǎn)生比空白試驗高三倍的最低濃度 ) 2 4 9 21 24 37 40 49 56 59 83 89 61 93 96 99 104 110 113 結(jié)構(gòu)多樣性舉例 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 57 64 66 P 62 67 70 80 81 P 其它的生物活性測試情況見下表： 項目 活性報告 HCV suppression Assay Cytokine expression induction assay@獼猴 Cytokine expression induction assay @mice Cytokine expression induction assay @ healthy woodchucks 抗 WHV血清轉(zhuǎn)化 @慢性感染 woodchucks 而在專利 US2020204627A134中， Gilead Sciences, 架： 63 此類化合物是 TLR7 或其它 TLR 亞型激動劑， 部分化合物活性見下表（ IFNα@ PBMCs） ： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) A MEC=d B MEC=c C MEC=a D MEC=e E MEC=b F MEC=c G MEC=c 注： a=1nM， b=19nM， c=1099nM， d=1001000nM， e=1000nM， 、 艾沙托立賓（ Isatoribine）衍生物類 64 鳥嘌呤核糖核苷類似物艾沙托立賓（ ANA245）及其前藥（ ANA975）是目前臨床研究最多的口服 TLR7 激動劑。其中，艾沙托立賓進入到治療 HCV 感染的Ⅱ期臨床實驗。在原理驗證階段艾沙托立賓表現(xiàn)出良好的耐受性，以 800mg最大劑量給藥， 8/12 個病人顯示出統(tǒng)計性的病毒載量降低，幅度 ，并且在此過程中伴隨著劑 量依賴的 IFN刺激的 2,5OAS和 ISG15產(chǎn)生的系統(tǒng)性增加。艾沙托立賓使病毒載量降低的幅度中等，考慮到相對較高的給藥劑量，反映出其在 TLR7 受體上較弱的藥理作用（ primary pharmacology），還需要改進出更強效的類似物。 Anadys 聯(lián)合 Novartis 開發(fā)了 ANA975 作為口服制劑。發(fā)現(xiàn)也具有良好的耐受性，并且能夠有效的產(chǎn)生艾沙托立賓。但隨后，由于在動物毒性研究中發(fā)現(xiàn)其會劑量依賴導(dǎo)致強烈的免疫刺激， Anadys 終止了針對 HCV 病人的一個 28 天的Ⅰ b 期臨床項目。隨后，對 ANA975 配方 的進一步研究也被終止，由此分析，每日給藥的劑量無法達(dá)到足夠的治療指數(shù)。 但是艾沙托立賓的另一個前藥（ ANA773）也在被研發(fā)作為 HCV治療藥物，并且看上去其效果好于 ANA975。然而由于最近 Roche 宣布收購了 Anadys，此項目前途未卜。 在專利 US2020054590A135中， Anadys 公司披露了以下骨架： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 1 2 65 3 4 5 6 7 8 活性結(jié)果未見。 部分化合物結(jié)構(gòu)見下表： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 1 2 3 4 5 6 66 7 而在專利 US2020258928A136， US2020316327A137 中， Gilead Science, Inc.公司披露了以下兩個骨架： 此類化合物是 HCV治療藥物的前藥，但在專利中并沒有提及機理是否是通過 TLR 途徑實現(xiàn)，然而鑒于其與上述 Anadys 化合物結(jié)構(gòu)的相似性，也將其進展列出。 部分化合物 活性見下表： No. R7 R8 EC90（ μM） No. R4 R8 EC90（ μM） 15 Me 11 iPr OMe 16 Me OEt 12 Me 17 iPr OEt 14 cPn OH 23 cBu OMe 24 cPn OMe 、 Bitriazolyl Acyclonucleoside類 另一類 鳥嘌呤核糖核苷類似物是 Peng38等報道的如下所示雙三氮雜環(huán)類化合物。 67 據(jù)此合成了以下幾個化合物（顯示部分）： 編號 結(jié)構(gòu) 編號 結(jié)構(gòu) 3i 7 3g 8 9 選擇化合物 3i測試器 TLR7活性，結(jié)果如下： 項目 活性報告 TLR7 、 三氮唑類（ Triazole） 在專利 WO2020030996 A139中， Coley Pharmaceutical Group, 了以下兩個化合物，它們是 TLR7 和 TLR8 的強效激動劑。 68 其活性結(jié)果如下表所示： 項目 活性報告 人 TLR7@ HEK293 EC50= 52377 EC50= 52378 人 TLR8@ HEK293 EC50=？ 523