【正文】 會(huì)(animal models of diabetic complication consortium,AMDCC)制定DN 小鼠模型(m243。x237。ng)的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn):,(1)糖尿腎病小鼠整個(gè)生存期腎小球?yàn)V過率下降超過(chāogu242。)50%。 (2)與同品系同性別同年齡的對照組相比,糖尿腎病小鼠的尿蛋白增加10 倍以上。 (3)糖尿病腎病小鼠腎臟病理改變:有系膜基質(zhì)增生,伴或不伴結(jié)節(jié)硬化和系膜溶解。不同程度的小動(dòng)脈透明樣變?；啄ぴ龊癯^基線水平的50%。小管間質(zhì)纖維化。,第七十二頁，共八十三頁。,7.1.誘發(fā)性I型糖尿病腎病(sh232。n b236。nɡ)模型,1.1 高劑量 STZ 誘導(dǎo)的小鼠糖尿病腎病模型 一次性給予實(shí)驗(yàn)(sh237。y224。n)動(dòng)物≥200 mg/kg 的 STZ 腹腔注射,1.2 低劑量 STZ 誘導(dǎo)的小鼠糖尿病腎病模型(m243。x237。ng) 低劑量( 40mg/kg~5 5 mg/kg )STZ 多次注射誘導(dǎo)糖尿病。,1.3單側(cè)腎切除后誘導(dǎo)的大鼠 DN 模型,不同品系的大鼠( SD, Wistar 和 SHR) 單側(cè)腎臟切除術(shù)加上 3 5 mg/kg~5 0 mg/kg STZ 多次小劑量誘導(dǎo)即可制備模型,第七十三頁，共八十三頁。,7.2.自發(fā)性 I型糖尿病DN 動(dòng)物模型,7.2. 1 型糖尿病腎病(sh232。n b236。nɡ)自發(fā)性動(dòng)物模型,NOD( nonobese diabetic mouse) 小鼠NOD 小鼠是 ICR 近交系小鼠, 大概在 4 周齡~5 周齡起, 小鼠胰腺自發(fā)出現(xiàn)程度不等的炎癥, 24 周齡~3 0周齡時(shí)大多數(shù)胰腺 B 細(xì)胞被破壞出現(xiàn)顯性糖尿病, 進(jìn)而發(fā)展(fāzhǎn)成為 DN, 表現(xiàn)為尿蛋白排泄增加。腎臟病理變化: 系膜細(xì)胞增生, 腎小球毛細(xì)血管基底膜增厚, 細(xì)胞外基質(zhì)增多, 最后出現(xiàn)腎小球硬化.,(2)胰島素 2 Akita 小鼠,因?yàn)?Insulin 2 基因突變, 導(dǎo)致胰島素肽鏈錯(cuò)誤折疊, 選擇性地對胰島 B 細(xì)胞產(chǎn)生蛋白毒性, 導(dǎo)致 B 細(xì)胞分泌(fēnm236。)胰島素能力下降。,Akita 小鼠模型可以出現(xiàn)病理結(jié)構(gòu)表 現(xiàn), 如腎小球系膜擴(kuò)張, 足細(xì)胞數(shù)目減少, 腎小球硬化, 腎間質(zhì)纖維化等,（3）LETL 大鼠 該模型在18 ~ 30 周齡時(shí)會(huì)自發(fā)的出現(xiàn)胰腺淋巴細(xì)胞的侵潤,導(dǎo)致胰島β 細(xì)胞的破壞,最終發(fā)展為1 型糖尿病,第七十四頁，共八十三頁。,第七十五頁，共八十三頁。,7.3人工(r233。ngōng)誘導(dǎo)的2 型糖尿病模型,高脂飲食誘導(dǎo)加STZ腹腔注射是目前最經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的造模(z224。o m243。)方法,高脂飲食可以誘導(dǎo)模型動(dòng)物發(fā)生肥胖、高血糖、高脂血癥、胰島素抵抗等2 型糖尿病患者代謝綜合征的特點(diǎn),再予以小劑量的STZ 即可使其成模。一般大鼠高脂飼料誘導(dǎo)6 ~ 8 周即可出現(xiàn)胰島素抵抗,再 腹腔注射小劑量的STZ30 mg/ kg，成模率可達(dá)79%,第七十六頁，共八十三頁。,2.2 II 型糖尿病腎病(sh232。n b236。nɡ)自發(fā)性動(dòng)物模型,(1) db/db 小鼠 db/db 小鼠是位于小鼠 4 號(hào)染色體的瘦素受體因突變所致的先天肥胖性 2 型糖尿病模型。db/db 小鼠發(fā)生(fāshēng)糖尿病的病程與人類極為相似, 微血管并發(fā)癥多見,(2) GK 大鼠 GK 大鼠是由對葡萄糖不耐受的Wistar 大鼠重復(fù)近親繁殖多代后產(chǎn)生。這種動(dòng)物模型的特點(diǎn)(t232。diǎn)是中度的高血糖, 外周胰島素抵抗和肥胖表型。GK 大鼠產(chǎn)生 2 型糖尿病腎病主要由于胰島 B 細(xì)胞受損,(3)OLETF 大鼠 OLEFTF 大鼠是膽囊收縮素( CCK) 2A 受體信使 RNA( mRNA) 的表達(dá)完全缺失的 2 型糖尿病大鼠。早期以胰島素抵抗、 糖脂代謝紊亂為主, 以后逐漸出現(xiàn)胰腺功能減退, 胰島纖維化, 晚 期合并 DN,第七十七頁，共八十三頁。,（4）ob/ob 小鼠 , 造成其編碼的蛋白瘦素缺乏(quēf225。), 引起肝脂肪生成和肝糖原異生顯著增加, 高血糖又刺激胰島素分泌, 導(dǎo)致胰島素抵抗。,2.2 II 型糖尿病腎病(sh232。n b236。nɡ)自發(fā)性動(dòng)物模型,(5) Zucker 大鼠 Zucker 大鼠體內(nèi)(tǐ n232。i)編碼瘦素受體的基因錯(cuò)義突變, 表現(xiàn)出高血糖、 高血脂、 高血壓,第七十八頁，共八十三頁。,7.4 II 型糖尿病腎病(sh232。n b236。nɡ)自發(fā)性動(dòng)物模型,第七十九頁，共八十三頁。,7.3基因工程(jīyīn gōngch233。ng)糖尿病腎病動(dòng)物模型,(1) eNOS 敲除鼠敲除上皮一氧化氮合酶( endothelial nitric oxidesynthase, eNOS) 基因(jīyīn)的 C57BLKS / J( BKS)db/db 小鼠, 表現(xiàn)為高血糖、 高血壓、 蛋白尿。,(2)轉(zhuǎn)基因 OVE2 6 小鼠利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)使鈣調(diào)蛋白在 OVE2 6 自發(fā)性糖尿病小鼠胰島 B 細(xì)胞(x236。bāo)中過量表達(dá)。小鼠 2 月齡時(shí)出現(xiàn)蛋白尿, 6 月齡時(shí)出現(xiàn)大量蛋白尿, 9 月齡時(shí)腎小球基底膜增厚, 系膜擴(kuò)張, 出現(xiàn)腎小球硬化和小管間質(zhì)性纖維化等病理改變, 伴有腎小球?yàn)V過率降低.,(3)GIPR( dn) 轉(zhuǎn)基因小鼠通過隨機(jī)誘變和基因修飾獲得, 使得葡萄糖依賴性促胰島素多肽受體隱形表達(dá), 破壞 B 細(xì)胞, 胰島素分泌減少, 形成 DN。進(jìn)而發(fā)展成為 ESRD.對于單基因 DN 的發(fā)病機(jī)制和治療方法的研究具有重要意義,第八十頁，共八十三頁。,Diabetic nephropathy,第八十一頁，共八十三頁。,謝謝(xi232。 xie),第八十二頁，共八十三頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),Animal models of urinary system。易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病或臨床癥狀者也不宜選用。系膜細(xì)胞(x236。bāo)增生及不同程度系膜基質(zhì)增多為主要特征。腎組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)嗜復(fù)紅的蛋白復(fù)合物在腎小球沉積伴有腎小管細(xì)胞(x236。bāo)增生和腎實(shí)質(zhì)纖維化。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一側(cè)輸尿管結(jié)扎，在結(jié)扎后1周內(nèi)該側(cè)腎臟即開始出現(xiàn)腎間質(zhì)纖維化的動(dòng)物模型。摩擦裝置通過套管經(jīng)尿道置入膀胱對膀胱黏膜產(chǎn)生機(jī)械損傷后植入腫瘤細(xì)胞(x236。bāo)。謝謝,第八十三頁，共八十三頁。