【正文】 。ngy242。ng),應(yīng)用舉例 （1）網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 原理(yu225。nlǐ)：用熒光染料噻唑橙（TO）使RNA染色，再在流式細(xì)胞儀上檢測，根據(jù)熒光的有無和熒光強(qiáng)度的高低，可測定出網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比。 分析參數(shù)有：FSC、SSC、FL1。 分析圖形有：FSC/SSC二維圖、FL1直方圖等。,77,流式細(xì)胞儀,第七十七頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 正常人血液煌焦油藍(lán)活體(hu243。 tǐ)染色：可見顆粒型網(wǎng)織紅細(xì)胞。,78,流式細(xì)胞儀,第七十八頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 正常人血液(xu232。y232。)網(wǎng)織紅細(xì)胞分析：在FSC/SSC二維圖中設(shè)定紅細(xì)胞門R1，血小板門R2。將陰性對照（綠色）與待測標(biāo)本（紅色）的FL1直方圖重疊，設(shè)定界標(biāo)（M1）,使陰性對照的非特異性熒光率小于0.3%。分析待測標(biāo)本中的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率為1.07%。,79,流式細(xì)胞儀,第七十九頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) IDA患者血液煌焦油藍(lán)活體(hu243。 tǐ)染色：網(wǎng)紅增多，可見顆粒型和破網(wǎng)型。,80,流式細(xì)胞儀,第八十頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) IDA患者網(wǎng)織紅細(xì)胞分析：在FSC/SSC二維圖中設(shè)定紅細(xì)胞門R1，血小板門R2。將陰性對照（綠色）與待測標(biāo)本（紅色(h243。ngs232。)）的FL1直方圖重疊，設(shè)定界標(biāo)（M1）,使陰性對照的非特異性熒光率小于0.3%。分析待測標(biāo)本中的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率為4.78%。,81,流式細(xì)胞儀,第八十一頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(j236。 sh249。) AA患者血液煌焦油藍(lán)活體染色：網(wǎng)紅很難見到。,82,流式細(xì)胞儀,第八十二頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) AA患者網(wǎng)織紅細(xì)胞分析：在FSC/SSC二維圖中設(shè)定紅細(xì)胞門R1，血小板門R2。將陰性對照（綠色）與待測標(biāo)本（紅色）的FL1直方圖重疊，設(shè)定界標(biāo)(ji232。 biāo)（M1）,使陰性對照的非特異性熒光率小于0.3%。分析待測標(biāo)本中的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率為0.05%。,83,流式細(xì)胞儀,第八十三頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) HA患者血液(xu232。y232。)煌焦油藍(lán)活體染色：網(wǎng)紅明顯增多，可見各型。,84,流式細(xì)胞儀,第八十四頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) HA患者網(wǎng)織紅細(xì)胞分析：在FSC/SSC二維圖中設(shè)定紅細(xì)胞門R1，血小板門R2。將陰性對照（綠色）與待測標(biāo)本（紅色(h243。ngs232。)）的FL1直方圖重疊，設(shè)定界標(biāo)（M1）,使陰性對照的非特異性熒光率小于0.3%。分析待測標(biāo)本中的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率為29.33%。,85,流式細(xì)胞儀,第八十五頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),應(yīng)用舉例 （2）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 原理：根據(jù)白細(xì)胞CD4CD14抗原表達(dá)的差異，結(jié)合(ji233。h233。)不同白細(xì)胞光散射的特點(diǎn)，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行多參數(shù)分析，可對白細(xì)胞中三類五種白細(xì)胞進(jìn)行較準(zhǔn)確的分類，尤其是對百分比較低的嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)較為適用。 分析參數(shù)有：FSC、SSC、CD45（FL1）、CD14（FL2）等。 分析圖形有：CD45/SSC二維圖、CD14/SSC二維圖、 FSC/SSC二維圖、CD45/CD14二維圖、 CD45/CD14/SSC三維圖等。,86,流式細(xì)胞儀,第八十六頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 正常人血液白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：CD45FITC / CD14PE 雙染色。進(jìn)行FSC、SSC、CD4CD14四參數(shù)分析(fēnxī)，可將白細(xì)胞分為三類五種。在二維圖上，不同顏色代表不同細(xì)胞。計(jì)數(shù)15000個(gè)細(xì)胞，各種細(xì)胞百分率如下：L32.8%、B0.91%、M6.54%、N57.E2.38%。,紅色(h243。ngs232。)淋巴細(xì)胞（L） 黃色嗜堿性粒細(xì)胞（B） 天藍(lán)單核細(xì)胞（M） 深藍(lán)中性粒細(xì)胞（N） 品紅嗜酸性粒細(xì)胞（E）,87,流式細(xì)胞儀,第八十七頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 正常人血液白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：CD45FITC / CD14PE 雙染色。以SSC、CD4CD14三參數(shù)作三維圖分析。在三維圖上，不同顏色代表不同細(xì)胞。計(jì)數(shù)15000個(gè)細(xì)胞，各種(ɡ232。 zhǒnɡ)細(xì)胞百分率如下：L32.8%、B0.91%、M6.54%、N57.E2.38%。,紅色淋巴細(xì)胞（L） 黃色嗜堿性粒細(xì)胞（B） 天藍(lán)(tiānl225。n)單核細(xì)胞（M） 深藍(lán)中性粒細(xì)胞（N） 品紅嗜酸性粒細(xì)胞（E）,88,流式細(xì)胞儀,第八十八頁，共九十四頁。,V 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用(y236。ngy242。ng),白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 慢粒患者血液白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：CD45FITC / CD14PE 雙染色。在SSC/CD45二維圖和SSC/CD45/CD14三維圖上，不同細(xì)胞各自分布于不同的平面或空間?？梢夿、E、N增多(zēnɡ duō)（細(xì)胞密度分布增大），分別為：B8.9%、E6.22%、N72.56%。,紅色(h243。ngs232。)L 黃色B 天藍(lán)M 深藍(lán)N 品紅E,89,流式細(xì)胞儀,第八十九頁，共九十四頁。,VI 流式細(xì)胞儀實(shí)例(sh237。l236。),目前，在臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域內(nèi)應(yīng)用較為(ji224。o w233。i)廣泛的流式細(xì)胞儀主要是美國BD公司和美國Coulter公司生產(chǎn)的各型流式細(xì)胞儀。,90,流式細(xì)胞儀,第九十頁，共九十四頁。,VI 流式細(xì)胞儀實(shí)例(sh237。l236。),FACS Vantage 科研型流式細(xì)胞儀 儀器功能強(qiáng)大，可配置多種激光光源、進(jìn)行多色熒光參數(shù)（可達(dá)5色以上）分析，并可進(jìn)行細(xì)胞分選?？筛鶕?jù)需要對儀器的設(shè)置進(jìn)行靈活、方便的調(diào)節(jié)(ti225。oji233。)，能適應(yīng)不同的科研目的。,91,流式細(xì)胞儀,第九十一頁，共九十四頁。,VI 流式細(xì)胞儀實(shí)例(sh237。l236。),FACS Calibur 臨床型流式細(xì)胞儀 儀器設(shè)計(jì)精巧，配置兩種激光光源（488nm、635nm），可用于1~4色熒光分析，有細(xì)胞分選功能。該儀器操作簡便，并配備了自動進(jìn)樣裝置，可十分(sh237。fēn)方便地進(jìn)行大批量標(biāo)本測試。,92,流式細(xì)胞儀,第九十二頁，共九十四頁。,流 式 細(xì) 胞 儀,地址(d236。zhǐ)：武漢市武昌區(qū)紫陽路275號 湖北中醫(yī)學(xué)院紫陽校區(qū)檢驗(yàn)系 郵編：430064 電話：02788073859 Email：,93,流式細(xì)胞儀,第九十三頁，共九十四頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),流 式 細(xì) 胞 儀。流式細(xì)胞儀。更加普及化是指儀器更易于使用，使之成為實(shí)驗(yàn)室里更常用的儀器。前者的激光光斑為橢圓形，光斑直徑(zh237。j236。ng)大于被檢細(xì)胞體積。電壓脈沖定量分析與數(shù)字轉(zhuǎn)換（2）：脈沖高度。熒光分辨率：表示儀器測量所能達(dá)到的最大精度，通常用變異系數(shù)表示。前向角散射光靈敏度：以前向角散射光能檢測到的最小顆粒直徑(zh237。j236。ng)表示。白血病MICM分型認(rèn)為免疫學(xué)分型對每一例急性白血病診斷都是必不可少的，對下列情況意義更大：,第九十四頁，共九十四頁。