bca蛋白濃度測(cè)定-酶標(biāo)儀法-資料下載頁(yè)
2024-10-04 06:13本頁(yè)面
【正文】 時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深，且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度，否則每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。②如果濃度較低，可適當(dāng)?shù)匮娱L(zhǎng)孵育時(shí)間或在較高溫度孵育。）7. 用酶標(biāo)儀測(cè)定562nm下標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的吸光度。8. 用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)量為橫座標(biāo)，用吸光度值A(chǔ)562為縱座標(biāo)，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，用線形回歸計(jì)算公式Y(jié)=A 180。 X + B。根據(jù)樣本的吸光度，計(jì)算待測(cè)樣本的蛋白濃度（注意待測(cè)樣本的稀釋倍數(shù)）。9. 按WB實(shí)驗(yàn)的要求，分裝為每支100μl。10. 內(nèi)容總結(jié)
11. （1）用排槍在各孔中加入200μl BCA工作液，輕輕搖勻，37℃放置30分鐘或室溫放置2小時(shí)
（2）因?yàn)锽CA法測(cè)定時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深，且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度，否則每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線
（3）按WB實(shí)驗(yàn)的要求，分裝為每支100μl
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