高中生物同步課件：52多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段2人教版選修1-資料下載頁(yè)
2024-11-17 23:09本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】通常將DNA的羥基“－OH”末端稱為3’端，盤(pán)旋而成的規(guī)則結(jié)構(gòu)。側(cè)，構(gòu)成基本骨架；排列在鏈的內(nèi)側(cè)。堿基對(duì)的組成有特定的規(guī)律：即腺嘌呤一定。有絲分裂間期或減數(shù)第一次分裂前的間期。細(xì)胞核（主要）、線粒體、葉綠體。由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程。此，DNA復(fù)制需要引物。內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。夠自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。制在體外反復(fù)進(jìn)行。和DNA序列測(cè)定等。⑴過(guò)程：將微量離心管放在離心機(jī)上,離心約10s。將離心管放入PCR儀上，設(shè)置好PCR儀的循環(huán)程序。模板DNA經(jīng)加熱至900C以上。一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)。結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。復(fù)制的原理，合成一條新的DNA鏈。水等在使用必須進(jìn)行高壓滅菌；可以通過(guò)計(jì)算DNA含量來(lái)評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果，DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰，峰值的大小與DNA的含量有關(guān)。分光光度計(jì)的讀數(shù)調(diào)節(jié)至零。g/ml的DNA在厚度為1cm比色杯中的吸光。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快
【正文】 含量來(lái)評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果，DNA在 260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰，峰值的大小與 DNA的含量有關(guān)。 ⑵ 對(duì)照調(diào)零 以蒸餾水作為空白對(duì)照，在波長(zhǎng) 260nm處，將紫外分光光度計(jì)的讀數(shù)調(diào)節(jié)至零。 取 DNA稀釋液 100uL至比色杯中，測(cè)定 260nm處的光吸收值 ⑶ 計(jì)算 DNA含量 (?g)＝ 50 (260nm的讀數(shù) )稀釋倍數(shù) 50： 1 ?g /ml的 DNA在厚度為 1cm比色杯中的吸光值為 ⑴ 稀釋 2uLPCR反應(yīng)液，加入 98uL蒸餾水，即將樣品進(jìn)行 50倍稀釋 . 光吸收 波長(zhǎng)／ nm 260 240 220 280 比色杯 課題延伸 PCR技術(shù)是 80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、 快速、 簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出特點(diǎn) PCR儀加熱使 （ ） 變性 , 復(fù)性使引物與模板 DNA（ ） ,延伸需將反應(yīng)溫度升至中溫 ( ),在（ ） 的 作 用 下 , 以 （ ） 為原料 ,以 （ ）為復(fù)制的起點(diǎn) ,合成新鏈 。 如此重復(fù)改變反應(yīng)溫度 ,經(jīng)（ ） 三個(gè)階段為一個(gè)循環(huán) ,每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍 ,一般樣品是經(jīng)過(guò) 30次循環(huán) ,最終使基因放大了數(shù)百萬(wàn)倍 。 將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳 ,經(jīng)溴化乙錠染色 ,在紫外燈照射下肉眼能見(jiàn)到擴(kuò)增特異區(qū)段的 DNA帶 。 模板 互補(bǔ)Taq聚合酶 四種脫氧核苷酸 引物 變性、復(fù)性和延伸 72℃ 實(shí)驗(yàn)總結(jié)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1