高中生物同步課件：52多聚酶鏈式反應擴增dna片段2人教版選修1-資料下載頁
2024-11-17 23:09本頁面
【導讀】通常將DNA的羥基“－OH”末端稱為3’端，盤旋而成的規(guī)則結構。側，構成基本骨架；排列在鏈的內側。堿基對的組成有特定的規(guī)律：即腺嘌呤一定。有絲分裂間期或減數(shù)第一次分裂前的間期。細胞核（主要）、線粒體、葉綠體。由一個DNA形成兩個完全相同的DNA的過程。此，DNA復制需要引物。內復制出上百萬份的DNA拷貝。夠自動調控溫度的儀器。制在體外反復進行。和DNA序列測定等。⑴過程：將微量離心管放在離心機上,離心約10s。將離心管放入PCR儀上，設置好PCR儀的循環(huán)程序。模板DNA經加熱至900C以上。一定時間后，使模板DNA雙鏈或經。結合，為下輪反應作準備。板DNA單鏈的互補序列配對結合。復制的原理，合成一條新的DNA鏈。水等在使用必須進行高壓滅菌；可以通過計算DNA含量來評價擴增的效果，DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，峰值的大小與DNA的含量有關。分光光度計的讀數(shù)調節(jié)至零。g/ml的DNA在厚度為1cm比色杯中的吸光。它具有特異、敏感、產率高、快
【正文】 含量來評價擴增的效果，DNA在 260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，峰值的大小與 DNA的含量有關。 ⑵ 對照調零 以蒸餾水作為空白對照，在波長 260nm處，將紫外分光光度計的讀數(shù)調節(jié)至零。 取 DNA稀釋液 100uL至比色杯中，測定 260nm處的光吸收值 ⑶ 計算 DNA含量 (?g)＝ 50 (260nm的讀數(shù) )稀釋倍數(shù) 50： 1 ?g /ml的 DNA在厚度為 1cm比色杯中的吸光值為 ⑴ 稀釋 2uLPCR反應液，加入 98uL蒸餾水，即將樣品進行 50倍稀釋 . 光吸收 波長／ nm 260 240 220 280 比色杯 課題延伸 PCR技術是 80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自動化等突出特點 PCR儀加熱使 （ ） 變性 , 復性使引物與模板 DNA（ ） ,延伸需將反應溫度升至中溫 ( ),在（ ） 的 作 用 下 , 以 （ ） 為原料 ,以 （ ）為復制的起點 ,合成新鏈 。 如此重復改變反應溫度 ,經（ ） 三個階段為一個循環(huán) ,每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍 ,一般樣品是經過 30次循環(huán) ,最終使基因放大了數(shù)百萬倍 。 將擴增產物進行電泳 ,經溴化乙錠染色 ,在紫外燈照射下肉眼能見到擴增特異區(qū)段的 DNA帶 。 模板 互補Taq聚合酶 四種脫氧核苷酸 引物 變性、復性和延伸 72℃ 實驗總結
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