高中生物同步課件：52多聚酶鏈式反應擴增dna片段3人教版選修1-資料下載頁
2024-11-17 23:09本頁面
【導讀】組成DNA分子的基本單位是什么?DNA分子結(jié)構(gòu)有什么特點？DNA分子的復制過程是怎樣的？度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合。模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合。堿基互補配對的原則合成新的DNA鏈。DNA單鏈會與引物Ⅱ結(jié)合，進行DNA的延伸。實質(zhì)上一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器。一種薄壁塑料管，總?cè)莘e為。使反應液混合均勻。及蒸餾水等在使用必須進行高壓滅菌；②分裝試劑，簡化操作程序，使用一次性槍頭?？梢酝ㄟ^計算DNA含量來評價擴增的效果，DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，峰值的大小與DNA的含量有關(guān)。品進行50倍稀釋。紫外分光光度計的讀數(shù)調(diào)節(jié)至零。公式中50的含義：50?g/ml的DNA在標準厚度。為1cm比色杯中的吸光值為1。它具有特異性強、敏感性高、產(chǎn)
【正文】 課題成果評價 1 、 一條 DNA，復制 n次， DNA為： 2n 2 、 a條 DNA，復制 n次， DNA為： a2n （二）實驗中 DNA含量的測定 1 、 原理 可以通過計算 DNA含量來評價擴增的效果，DNA在 260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，峰值的大小與 DNA的含量有關(guān) 。 2 、 過程 ①稀釋 2uLPCR反應液，加入 98uL蒸餾水，即將樣品進行 50倍稀釋 。 ②對照調(diào)零 以蒸餾水作為 空白對照 ，在波長 260nm處，將紫外分光光度計的 讀數(shù)調(diào)節(jié)至零 。 取 DNA稀釋液 100uL至比色杯中，測定 260nm處的 光吸收值 。 ③計算 ④計算 DNA含量（ ?g ）＝ 50 x（ 260nm的讀數(shù)） x稀釋倍數(shù) 公式中 50的含義 ： 50?g /ml的 DNA在標準厚度為 1cm比色杯中的吸光值為 1。 比色杯 四、 課題延伸 例如： PCR產(chǎn)物每輪循環(huán)增加一倍， 30輪循環(huán)擴增量達 230個拷貝（ 109拷貝） PCR技術(shù)是 80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù)。 它具有 特異性強、敏感性高、產(chǎn)率高、 快速、 簡便、重復性好、易自動化 等突出特點。
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