epo工程細(xì)胞培養(yǎng)方法和反應(yīng)器-資料下載頁
2025-01-26 10:48本頁面
【正文】 續(xù)檢測攝氧率實時檢測細(xì)胞濃度 6. 符合現(xiàn)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(cGMP) 32 Cell igen系列使用的載體 — FibraCel(聚酯片 ) 33 FibraCel的技術(shù)指標(biāo) 34 FibraCel的電鏡照片 無細(xì)胞生長的 FibraCel HEK293細(xì)胞在 FibraCel上生長 4天的情況 HEK293細(xì)胞在 FibraCel上生長 7天的情況 35 FibraCel適用的細(xì)胞種類 36 籃式纖維填充床 37 Celligen系列生物反應(yīng)器工作原理 (P113) 38 用無血清培養(yǎng)基在填充床生物反應(yīng)器生產(chǎn) rHuEPO 文摘 在填充床生物反應(yīng)器用含 5%FBS的 DMEM:F12培養(yǎng)基培養(yǎng)產(chǎn)重組人促紅細(xì)胞生成素 (rHuEPO)的細(xì)胞 CHO8~10d后 ,使用自制的無血清生產(chǎn)培養(yǎng) (SFMp)生 rHuEPO。 SFMp培養(yǎng)基既能維持細(xì)胞生長 ,又能生產(chǎn) EPO,也便于純化分離 rHuEPO。使用填充床生物反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞 ,能維持培養(yǎng) 20~25d,rHuEPO表達(dá)水平達(dá) 12~284mg/L之間 ,反應(yīng)器的產(chǎn)率達(dá) 710mg/L/d,比滾瓶的產(chǎn)率增加 12~14倍。葡萄糖最高消耗量達(dá)到21g/L/d,細(xì)胞培養(yǎng)密度最高達(dá)到 30 107/ml以上 ,每次可收無血清培養(yǎng)上清 80~87L。由于細(xì)胞被固定在聚酯片上 ,培養(yǎng)上清中脫落細(xì)胞很少。觀察了反應(yīng)器的乳酸和氨的含量 ,其結(jié)果表明乳酸和氨含量分別低于 35g/L和 5mmol/L,不影響產(chǎn)物的表達(dá)。經(jīng)過多批培養(yǎng)和生長 HuEPO的結(jié)果表明 ,自行配制的 SFMp培養(yǎng)基在該反應(yīng)器能有效地維持細(xì)胞生長和生產(chǎn) rHuEPO。 鄧?yán)^先等 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所 39 演講完畢，謝謝觀看！
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