epo工程細胞培養(yǎng)方法和反應器-資料下載頁
2025-01-26 10:48本頁面
【正文】 續(xù)檢測攝氧率實時檢測細胞濃度 6. 符合現(xiàn)行藥品生產質量管理規(guī)范(cGMP) 32 Cell igen系列使用的載體 — FibraCel(聚酯片 ) 33 FibraCel的技術指標 34 FibraCel的電鏡照片 無細胞生長的 FibraCel HEK293細胞在 FibraCel上生長 4天的情況 HEK293細胞在 FibraCel上生長 7天的情況 35 FibraCel適用的細胞種類 36 籃式纖維填充床 37 Celligen系列生物反應器工作原理 (P113) 38 用無血清培養(yǎng)基在填充床生物反應器生產 rHuEPO 文摘 在填充床生物反應器用含 5%FBS的 DMEM:F12培養(yǎng)基培養(yǎng)產重組人促紅細胞生成素 (rHuEPO)的細胞 CHO8~10d后 ,使用自制的無血清生產培養(yǎng) (SFMp)生 rHuEPO。 SFMp培養(yǎng)基既能維持細胞生長 ,又能生產 EPO,也便于純化分離 rHuEPO。使用填充床生物反應器培養(yǎng)細胞 ,能維持培養(yǎng) 20~25d,rHuEPO表達水平達 12~284mg/L之間 ,反應器的產率達 710mg/L/d,比滾瓶的產率增加 12~14倍。葡萄糖最高消耗量達到21g/L/d,細胞培養(yǎng)密度最高達到 30 107/ml以上 ,每次可收無血清培養(yǎng)上清 80~87L。由于細胞被固定在聚酯片上 ,培養(yǎng)上清中脫落細胞很少。觀察了反應器的乳酸和氨的含量 ,其結果表明乳酸和氨含量分別低于 35g/L和 5mmol/L,不影響產物的表達。經過多批培養(yǎng)和生長 HuEPO的結果表明 ,自行配制的 SFMp培養(yǎng)基在該反應器能有效地維持細胞生長和生產 rHuEPO。 鄧繼先等 軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所 39 演講完畢，謝謝觀看！
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