基因工程第二章1jun-資料下載頁
2025-01-07 17:55本頁面
【正文】 AATTNHaeⅢ 2, 4HhaI 2, 4, 7HindⅢ 6HpaI 1, 2, 4PstI 1, 2, 4, 7PvuⅡ 2, 4SalI 1, 2, 4, 7ScaI 4 6, 8 SstⅡ 2, 4XbaI 2, 4, 7：亞乙二醇 (45%)； 2:甘油 (12%)； 3：乙醇 (12%)； 4：高酶 /DNA比 (25U/μg) ； 5： Mn++代替 Mg++； 6:。 7:二甲基亞砜 (8%)。 8: 無 NaCl。 抑制星星活性的措施 o 減少酶的用量（可避免過分酶切）o 減少甘油濃度o 保證反應(yīng)體系中無有機(jī)溶劑或乙醇o(jì) 提高離子強(qiáng)度到 100～ 150mM （但不能抑制酶活性）o 降低反應(yīng) pH 至 o 保證使用 Mg++ 作為二價(jià)陽離子一、限制性內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)二、限制性內(nèi)切酶的定義三、限制性內(nèi)切酶的命名四、限制性內(nèi)切酶的分類五、 II型限制內(nèi)切酶的基本特性六、影響酶活性的因素七、限制內(nèi)切酶的用途 第一節(jié) 限制性核酸內(nèi)切酶與 DNA分子的體外切割216。 DNA重組216。 突變分析（ RFLP分析）216。 限制酶（物理）圖譜繪制216。 限制酶的部分酶切與完全酶切七、限制內(nèi)切酶的用途限制性內(nèi)切酶酶切圖譜(Restriction mapping)1. 限制酶對(duì) DNA的酶切方法完全酶切 /消化n 對(duì) DNA上所有的識(shí)別位點(diǎn)都被酶切開。應(yīng)用有限。部分酶切 /消化n DNA上只有部分酶切位點(diǎn)被切開。n 部分酶切的方法： 縮短保溫時(shí)間、降低反應(yīng)溫度、減少酶的用量。完全酶切n 如 EcoR I（ GAATTC）的 4個(gè)位點(diǎn)都被切開。1 2 3 41 2 3 4部分酶切n 4個(gè) EcoR I位點(diǎn)中，僅酶切 2個(gè)位點(diǎn)。1 2 3 41 42. 限制性內(nèi)切酶圖譜定義n DNA上某些限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)的圖譜，可作為 DNA片段的特殊標(biāo)記。也稱 DNA物理圖譜。3. 限制酶酶切圖譜的分析EcoR1NotI EcoRI NotI kb kb kbEcoRINotIEcoRI/NotI kb kb kb kb kb kb4. 酶切產(chǎn)物的檢測(cè)瓊脂糖凝膠電泳法n DNA經(jīng)內(nèi)切酶酶切，然后在瓊脂糖凝膠電泳分析。適合小分子 DNA分析。Southern Blot法n DNA酶切后，電泳分離。后變性后轉(zhuǎn)移到尼龍膜或硝酸纖維膜，然后與同位素標(biāo)記的探針雜交，最后做放射自顯影，檢測(cè)多態(tài)性條帶。n 靜夜四無 鄰 ，荒居舊 業(yè)貧 。三月 21三月 21Thursday, March 11, 2023n 雨中黃葉 樹 ，燈下白 頭 人。 20:41:5820:41:5820:413/11/2023 8:41:58 PMn 1以我獨(dú)沈久，愧君相 見頻 。三月 2120:41:5820:41Mar2111Mar21n 1故人江海 別 ，幾度隔山川。 20:41:5820:41:5820:41Thursday, March 11, 2023n 1乍 見 翻疑夢(mèng)，相悲各 問 年。 三月 21三月 2120:41:5820:41:58March 11, 2023n 1他 鄉(xiāng) 生白 發(fā) ，舊國 見 青山。 11 三月 20238:41:58 下午 20:41:58三月 21n 1比不了得就不比，得不到的就不要。 。三月 218:41 下午 三月 2120:41March 11, 2023n 1行 動(dòng) 出成果，工作出 財(cái) 富。 2023/3/11 20:41:5820:41:5811 March 2023n 1做前，能 夠環(huán)視 四周；做 時(shí) ，你只能或者最好沿著以腳 為 起點(diǎn)的射 線 向前。 8:41:58 下午 8:41 下午 20:41:58三月 21n 沒有失 敗 ，只有 暫時(shí) 停止成功！。 三月 21三月 21Thursday, March 11, 2023n 很多事情努力了未必有 結(jié) 果，但是不努力卻什么改 變 也沒有。 20:41:5820:41:5820:413/11/2023 8:41:58 PMn 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的 積 累。 三月 2120:41:5820:41Mar2111Mar21n 1世 間 成事，不求其 絕對(duì)圓滿 ，留一份不足，可得無限完美。 20:41:5820:41:5820:41Thursday, March 11, 2023n 1不知香 積 寺，數(shù)里入云峰。 三月 21三月 2120:41:5820:41:58March 11, 2023n 1意志 堅(jiān) 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。 11 三月 20238:41:58 下午 20:41:58三月 21n 1楚塞三湘接， 荊門 九派通。 。三月 218:41 下午 三月 2120:41March 11, 2023n 1少年十五二十 時(shí) ，步行 奪 得胡 馬騎 。2023/3/11 20:41:5820:41:5811 March 2023n 1空山新雨后，天氣晚來秋。 8:41:58 下午 8:41 下午 20:41:58三月 21n 楊 柳散和 風(fēng) ，青山澹吾 慮 。三月 21三月 21Thursday, March 11, 2023n 閱讀 一切好 書 如同和 過 去最杰出的人 談話 。20:41:5820:41:5820:413/11/2023 8:41:58 PMn 1越是沒有本 領(lǐng) 的就越加自命不凡。 三月 2120:41:5820:41Mar2111Mar21n 1越是無能的人，越喜 歡 挑剔 別 人的 錯(cuò) 兒。 20:41:5820:41:5820:41Thursday, March 11, 2023n 1知人者智，自知者明。 勝 人者有力，自 勝 者 強(qiáng) 。三月 21三月 2120:41:5820:41:58March 11, 2023n 1意志 堅(jiān) 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。 11 三月 20238:41:58 下午 20:41:58三月 21n 1最具挑 戰(zhàn) 性的挑 戰(zhàn) 莫 過 于提升自我。 三月 218:41 下午 三月 2120:41March 11, 2023n 1業(yè) 余生活要有意 義 ，不要越 軌 。2023/3/11 20:41:5820:41:5811 March 2023n 1一個(gè)人即使已登上 頂 峰，也仍要自 強(qiáng) 不息。 8:41:58 下午 8:41 下午 20:41:58三月 21MOMODAPOWERPOINTLorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感謝您的下載觀看專 家告
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