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微生物的保藏技術-資料下載頁

2025-01-01 04:39本頁面
  

【正文】 桿菌、放線菌等。 方法:將菌種接種斜面,培養(yǎng)至長出大量的孢子后,洗下孢子制備孢子懸液,加入無菌的沙土管中,減壓干燥,直至將水分抽干,最后用石蠟、膠塞等封閉管口,置冰箱保存。 沙土管保藏:用棉塞塞住安瓿管,放在能夠抽真空的干燥器中,然抽干后將真空干燥器的旋塞關閉即可。不用火焰封口,用時將真空干燥器放氣打開取出,剩余的繼續(xù)抽真空,抽至真空后關閉旋塞保藏即可。 此法簡單易行,并可以將微生物保藏較長時間,適合一般實驗室及以放線菌等為菌種的發(fā)酵工廠采用。 冰凍真空保藏 原理是首先將加有保護劑的細胞樣品先預冷,使其凍結,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分。事實上,從菌體中除去大部分水分后,細胞的生理活動就會停止,因此可以達到長期維持生命狀態(tài)的目的。該方法適用于絕大多數(shù)微生物菌種(包括噬菌體和立克次氏體等)的保存。 達到干燥的樣品可在真空或惰性氣體的密閉環(huán)境中置低溫保存,從而使微生物處于干燥、缺氧及低溫的狀態(tài),生命活動處于休眠,可以達到長期保藏的目的。 用冰升華的方式除去水分,手段比較溫和,細胞受損傷的程度相對較小,存活率及保藏效果均不錯,而且經(jīng)抽真空封閉的菌種安瓿瓶的保存、郵寄、使用均很方便。因此冷凍真空干燥保藏是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法。 注意事項 a、冷凍干燥前的培養(yǎng)條件:首先檢驗菌種純度。一般地說,將待保存的微生物在營養(yǎng)豐富且容易增菌的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)為宜;菌齡以達到對數(shù)生長期為好;若為有芽孢或孢子的微生物,則以芽孢和孢子形成以后進行保存為好;菌液濃度以高為好,如細菌應達到 109~ 1010/ml。 b、菌株號碼等的標記:可在安瓶外側標記或在安瓶內封入標簽。 c、安瓶的準備:將安瓶在 2%HCl中浸泡過夜,自來水沖洗 3次后,蒸餾水刷凈,干燥,塞棉塞,貼標簽,干熱滅菌或溫熱滅菌后, 60℃ 恒溫干燥。 d、添加保護劑:常用的保護劑有脫脂乳、 12%蔗糖、加 %葡萄糖的普通肉湯以及加 %葡萄糖的血清等等。 總結 除上述方法外,各種微生物菌種保藏的方法還有很多,如紙片保藏、薄膜保藏、寄主保藏等。 由于微生物的多樣性,不同的微生物往往對不同的保藏方法有不同的適應性,迄今為止尚沒有一種方法被證明對所有的微生物適宜。 因此,在具體選擇保藏方法時必須對被保藏菌株的特性、保藏物的使用特點及現(xiàn)有條件等進行綜合考慮。對一些比較重要的微生物菌株,則要盡可能多的采用各種不同的手段進行保藏,以免因某種方法的失敗而導致菌種的喪失。 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAIT
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