微生物的保藏技術(shù)-資料下載頁
2025-01-01 04:39本頁面
【正文】 桿菌、放線菌等。 方法：將菌種接種斜面，培養(yǎng)至長出大量的孢子后，洗下孢子制備孢子懸液，加入無菌的沙土管中，減壓干燥，直至將水分抽干，最后用石蠟、膠塞等封閉管口，置冰箱保存。 沙土管保藏：用棉塞塞住安瓿管，放在能夠抽真空的干燥器中，然抽干后將真空干燥器的旋塞關(guān)閉即可。不用火焰封口，用時將真空干燥器放氣打開取出，剩余的繼續(xù)抽真空，抽至真空后關(guān)閉旋塞保藏即可。 此法簡單易行，并可以將微生物保藏較長時間，適合一般實驗室及以放線菌等為菌種的發(fā)酵工廠采用。 冰凍真空保藏 原理是首先將加有保護(hù)劑的細(xì)胞樣品先預(yù)冷，使其凍結(jié)，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分。事實上，從菌體中除去大部分水分后，細(xì)胞的生理活動就會停止，因此可以達(dá)到長期維持生命狀態(tài)的目的。該方法適用于絕大多數(shù)微生物菌種（包括噬菌體和立克次氏體等）的保存。 達(dá)到干燥的樣品可在真空或惰性氣體的密閉環(huán)境中置低溫保存，從而使微生物處于干燥、缺氧及低溫的狀態(tài)，生命活動處于休眠，可以達(dá)到長期保藏的目的。 用冰升華的方式除去水分，手段比較溫和，細(xì)胞受損傷的程度相對較小，存活率及保藏效果均不錯，而且經(jīng)抽真空封閉的菌種安瓿瓶的保存、郵寄、使用均很方便。因此冷凍真空干燥保藏是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法。 注意事項 a、冷凍干燥前的培養(yǎng)條件：首先檢驗菌種純度。一般地說，將待保存的微生物在營養(yǎng)豐富且容易增菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)為宜；菌齡以達(dá)到對數(shù)生長期為好；若為有芽孢或孢子的微生物，則以芽孢和孢子形成以后進(jìn)行保存為好；菌液濃度以高為好，如細(xì)菌應(yīng)達(dá)到 109～ 1010/ml。 b、菌株號碼等的標(biāo)記：可在安瓶外側(cè)標(biāo)記或在安瓶內(nèi)封入標(biāo)簽。 c、安瓶的準(zhǔn)備：將安瓶在 2%HCl中浸泡過夜，自來水沖洗 3次后，蒸餾水刷凈，干燥，塞棉塞，貼標(biāo)簽，干熱滅菌或溫?zé)釡缇螅?60℃ 恒溫干燥。 d、添加保護(hù)劑：常用的保護(hù)劑有脫脂乳、 12%蔗糖、加 %葡萄糖的普通肉湯以及加 %葡萄糖的血清等等。 總結(jié) 除上述方法外，各種微生物菌種保藏的方法還有很多，如紙片保藏、薄膜保藏、寄主保藏等。 由于微生物的多樣性，不同的微生物往往對不同的保藏方法有不同的適應(yīng)性，迄今為止尚沒有一種方法被證明對所有的微生物適宜。 因此，在具體選擇保藏方法時必須對被保藏菌株的特性、保藏物的使用特點及現(xiàn)有條件等進(jìn)行綜合考慮。對一些比較重要的微生物菌株，則要盡可能多的采用各種不同的手段進(jìn)行保藏，以免因某種方法的失敗而導(dǎo)致菌種的喪失。 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAIT
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