【正文】 入 pH緩沖劑，或在進行工業(yè)發(fā)酵時補加酸、堿。 ☆ 磷酸緩沖液： pH值從 ~ K2HPO4+HCl KH2PO4+KCl KH2PO4+KOH K2HPO4+H2O ☆ 加入 CaCO3： CO32 – HCO3 – H2CO3 CO2+H2O +H+ –H– +H+ –H– ☆ 培養(yǎng)基中所含氨基酸、肽、蛋白質(zhì)等物質(zhì)也可起到緩沖作用。 2023/1/15 40 滲透壓 等滲溶液 適宜微生物生長 高滲溶液 細胞發(fā)生質(zhì)壁分離 低滲溶液 細胞吸水膨脹，直至破裂 大多數(shù)微生物適合在等滲的環(huán)境下生長，而有的菌如 Staphylococcus aureus則能在 3mol/L NaCl的高滲溶液中生長。能在高鹽環(huán)境（ ~）生長的微生物常被稱為 嗜鹽微生物（ Halophiles） 。 2023/1/15 41 氧化還原電勢 各種微生物對培養(yǎng)基的氧化還原電勢的要求： 好氧微生物： +~+,(在 ).厭氧微生物：只能在低于 + 兼性厭氧微生物： + 、 + 培養(yǎng)基是多 氧化還原偶 的復雜電化學系統(tǒng) ， 測出的 Eh值僅代表其綜合結(jié)果 。 對微生物影響最大的是：分子氧和分子氫的濃度 培養(yǎng)基中常用的還原劑：巰基乙酸 、 抗壞血酸 、 硫化氫 、半胱氨酸 、 谷胱甘肽 、 二硫蘇糖醇等 。 2023/1/15 42 aw： 水分活度（ w a ter a cti v i t y ）各種微生物生長的水分活度： 0 . 6 ~ 0 . 9 9 之間aw=PP0細菌酵母菌霉菌微生物生長的最低 aw一般： 0 . 90~0. 98嗜鹽菌： 0. 75 （約 5. 5m o l/LNaCl ）一般 ： 0. 87~0 . 91高滲酵母： 0. 61~0. 65 （ 飽和蔗糖液）Sacch ar om yces roux ii( 魯氏酵母 ) ： 0 . 60一般： 0 . 80~0. 87耐旱菌： 0. 65~0 . 75Xerom yces b is po r us （ 雙孢旱霉）： 0 . 602023/1/15 43 以粗代精 以野代家 以廢代好 以國代進 以簡代繁 以氮代朊 以烴代糧 以纖代糖 制備培養(yǎng)基的基本原則 —— 經(jīng)濟節(jié)約 2023/1/15 44 培養(yǎng)基的種類及其應(yīng)用 培養(yǎng)基 根據(jù)培養(yǎng)基的功能區(qū)分 根據(jù)對培養(yǎng)基成分的了解程度劃分 根據(jù)配制后培養(yǎng)基的物理狀態(tài)區(qū)分 根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的類群和營養(yǎng)類型劃分 細菌、放線菌、酵母菌、霉菌 自養(yǎng)微生物、異養(yǎng)微生物、 化學成分確定的合成培養(yǎng)基 化學成分不確定的天然培養(yǎng)基 化學成分部分確定的半合成培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基 選擇壓力培養(yǎng)基 2023/1/15 45 按對培養(yǎng)基成分的了解來分 ①天然培養(yǎng)基 (plex medium)：也稱作 chemically undefined medium。利用 化學成分還不完全清楚或不恒定 的天然物質(zhì)，（如肉湯、蛋白胨、麥芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米粉、牛奶、血清等）制成的培養(yǎng)基，天然培養(yǎng)基比較經(jīng)濟，除實驗室經(jīng)常使用外，更適宜于在生產(chǎn)上用來大規(guī)模地培養(yǎng)微生物和生產(chǎn)微生物產(chǎn)品。 ②合成（組合）培養(yǎng)基 (synthetic medium)：也稱作 chemically defined medium. 由化學成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基，該類培養(yǎng)基的 組成成分精確、清楚 ，重復性強，但微生物生長較慢，且價格昂貴，故一般適于在實驗室范圍內(nèi)他有關(guān)研生物營養(yǎng)需要、代謝、分類鑒定、生物測定以及菌種選育、遺傳分析等方面的研究工作。如高氏培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等 . ③ 半組合培養(yǎng)基 (semidefined medium)：在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加些天然成份，以更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物的需要 .如馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。 2023/1/15 46 按培養(yǎng)基物理狀態(tài)來分 ① 固體培養(yǎng)基 (solid medium)：天然固體營養(yǎng)基質(zhì)制成的培養(yǎng)基，或液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑（瓊脂 ～ 2％ )而呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。為微生物的生長提供營養(yǎng)表面。常用于微生物的分離、純化、計數(shù)等方面的研究。可依使用目的不同而制成斜面、平板等形式。 ② 半固體培養(yǎng)基 (semisolid medium)：在液體培養(yǎng)基中加入 ％的瓊脂構(gòu)成的培養(yǎng)基。常用來觀察細菌運動的特征，以進行菌種鑒定和噬菌體效價滴定等方面的實驗工作。 ③液體培養(yǎng)基 (liquid medium)：液體培養(yǎng)基不含任何凝固劑，菌體與培養(yǎng)基充分接觸，操作方便，常用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)以及在實驗室進行微生物生理代謝等基本理論的研究工作?？蓳?jù)培養(yǎng)后的濁度判斷微生物的生長程度。 2023/1/15 47 按培養(yǎng)基用途來分 ①基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (minimum medium): 是含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基； 另外基礎(chǔ)培養(yǎng)基也可作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分（如制備糖發(fā)酵培養(yǎng)基時）。 ② 選擇性培養(yǎng)基 (selective medium)：是根據(jù)某種或某一類群微生物的特殊營養(yǎng)需要，或?qū)δ撤N化合物的敏感性不同而設(shè)計出來的一類培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來。 ③ 鑒別性培養(yǎng)基 (differential medium)：用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基，在普通培養(yǎng)基中加入能與某種代謝產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)的指示劑或化學藥品，從而產(chǎn)生某種明顯的特征性變化，以區(qū)別不同的微生物，例：伊紅美蘭乳糖培養(yǎng)基（ Eosin Methylene Blue）。 2023/1/15 48 按培養(yǎng)基用途來分 ④加富培養(yǎng)基 (enriched medium)：在普通培養(yǎng)基中加入某些特殊的營養(yǎng)物，如血、血清、動、植物組織液或其他營養(yǎng)物質(zhì)（或生長因子）的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。用來培養(yǎng)營養(yǎng)要求苛刻的微生物，或用以 富集（數(shù)量上占優(yōu)勢） 和分離某中微生物。 ⑤基因工程的載體上常帶有個中遺傳學標記，當這樣的載體攜帶目的基因轉(zhuǎn)入受體菌時，由于標記基因所對應(yīng)的遺傳表型是互補的，因此在培養(yǎng)基中施加合適的選擇壓力，將受體菌接入這種壓力培養(yǎng)基，形成的菌落的受體菌就是克隆子，即基因工程目的菌，而非克隆子則不生長。 2023/1/15 49 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH