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微生物的保藏技術(shù)(參考版)

2025-01-03 04:39本頁面
  

【正文】 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。 因此,在具體選擇保藏方法時必須對被保藏菌株的特性、保藏物的使用特點及現(xiàn)有條件等進(jìn)行綜合考慮。 總結(jié) 除上述方法外,各種微生物菌種保藏的方法還有很多,如紙片保藏、薄膜保藏、寄主保藏等。 c、安瓶的準(zhǔn)備:將安瓶在 2%HCl中浸泡過夜,自來水沖洗 3次后,蒸餾水刷凈,干燥,塞棉塞,貼標(biāo)簽,干熱滅菌或溫?zé)釡缇螅?60℃ 恒溫干燥。一般地說,將待保存的微生物在營養(yǎng)豐富且容易增菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)為宜;菌齡以達(dá)到對數(shù)生長期為好;若為有芽孢或孢子的微生物,則以芽孢和孢子形成以后進(jìn)行保存為好;菌液濃度以高為好,如細(xì)菌應(yīng)達(dá)到 109~ 1010/ml。因此冷凍真空干燥保藏是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法。 達(dá)到干燥的樣品可在真空或惰性氣體的密閉環(huán)境中置低溫保存,從而使微生物處于干燥、缺氧及低溫的狀態(tài),生命活動處于休眠,可以達(dá)到長期保藏的目的。事實上,從菌體中除去大部分水分后,細(xì)胞的生理活動就會停止,因此可以達(dá)到長期維持生命狀態(tài)的目的。 此法簡單易行,并可以將微生物保藏較長時間,適合一般實驗室及以放線菌等為菌種的發(fā)酵工廠采用。 沙土管保藏:用棉塞塞住安瓿管,放在能夠抽真空的干燥器中,然抽干后將真空干燥器的旋塞關(guān)閉即可。 三、干燥保藏法 沙土管保存 冷凍真空保藏 沙土管保存 主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏,如:芽孢桿菌、放線菌等。當(dāng)冷凍菌融化后,應(yīng)盡量避免再次冷凍,否則菌體的存活率將顯著下降。 ? ⑦就動物細(xì)胞而言,應(yīng)在- 20℃ 范圍內(nèi)以 1℃/min 左右的速度緩慢降溫,此后必須盡快降到貯藏溫度;而對絕大多 數(shù)微生物而言,則不必如此,如結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜的原蟲則可在- 35℃ 范圍內(nèi)進(jìn)行緩慢降溫,而噬菌體則必需采用上述的二階段法進(jìn)行冷凍 ; ? ⑧若進(jìn)行長期保存,則貯藏溫度越低越好; ? ⑨取用冷凍保存的菌種時,應(yīng)采取速融措施,即在 35~ 40℃ 溫水中輕輕振蕩使之迅速融解。同樣,也可添加各種糖類、去纖維血液和脫脂牛乳等具有良好保護(hù)效果的溶劑,但對有些微生物而言,不加保護(hù)劑時更有效。 菌種保藏的共同注意點: ? 嚴(yán)格的無菌操作; ? 用于保存的微生物在生長前必須處于它生長良好的狀態(tài); ? 保藏過程中要防止退化的發(fā)生(不同的保藏方法,分別有不同的保存時間。此外,也可用 φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。 低溫冰箱保存法 ? 一、適用范圍 - 20℃ 、- 50℃ 或- 85℃ ? 二、保藏方
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