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2025-09-11 18:27本頁面
【正文】 分離心 10min，回收細(xì)菌細(xì)胞 3. 將管倒置 1min，以使最后殘留的痕量培養(yǎng)液流盡 50 40 30 20 50 40 30 20 50 40 30 20 50 40 30 20 離心 Your pany slogan LOGO 5. 以 10ml用冰預(yù)冷的 CaCl2重懸每份沉淀，放于冰上 ， 4℃ 4000轉(zhuǎn) /分離心 10min，回收細(xì)菌細(xì)胞； 6 .每 50ml初始培養(yǎng)物用 2ml冰預(yù)冷的 CaCl2 (內(nèi)含15%甘油 )重懸每份沉定，此時(shí)，可以迅速將細(xì)胞分裝成小份，液氮中冰凍， 70℃ 貯存?zhèn)溆谩? 50 40 30 20 50 40 30 20 離心 100ul/管 分裝 低溫凍存 Your pany slogan LOGO 注意事項(xiàng) 1. 所用器具的潔凈程度 2. 培養(yǎng)基的裝量：培養(yǎng)基體積 /三角瓶容量 =100ml/500ml， 50ml/250ml。 3. 培養(yǎng)基的 pH值。接種前的 pH值在，菌搖好后，不要低于 ，最好在 。 4. 培養(yǎng)后的 OD600值 = Your pany slogan LOGO ? 培養(yǎng)基中的各種離子。經(jīng)驗(yàn)證明，當(dāng)培養(yǎng)基中存在一定量的 Mg2+離子時(shí)，該方法制得的感受態(tài)要相對較高。 50 40 30 20 20分鐘后 離心 100ul/管 分裝 注意事項(xiàng) MgCl2 MgCl2 20mM Your pany slogan LOGO ? 培養(yǎng)溫度。文獻(xiàn)及經(jīng)驗(yàn)告訴我們，較低的溫度培養(yǎng)有利于感受態(tài)的形成，這樣可以獲得較高的感受態(tài)，但太低又不實(shí)用． 注意事項(xiàng) Your pany slogan LOGO ? 此外文獻(xiàn)報(bào)道，在保存感受態(tài)時(shí)，DMSO要比甘油的效果要好，它會使感受態(tài)的效率增加。 注意事項(xiàng) Your pany slogan LOGO ? 液氮速凍也會使感受態(tài)的效率提高，因此推薦用液氮速凍感受態(tài)，然后保存于超低溫冰箱內(nèi)。至于在液氮中保存 12小時(shí)以后再轉(zhuǎn)入超低溫冰箱。 注意事項(xiàng) Your pany slogan LOGO 本章結(jié)束，同學(xué)們現(xiàn)見！
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