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基因工程相關(guān)技術(shù)ppt課件(已修改)

2025-09-23 18:27 本頁面
 

【正文】 第五章 : 基因工程基本技術(shù) 主 講教師 : 楊應(yīng)斌 答疑 電話 : 13667665876 Email: 基因工程 概論 Your pany slogan LOGO 酶切 目的基因 載體 M 瓊 脂糖凝 膠 回收技 術(shù) 目的基因 線性載體 連接反應(yīng) 感受態(tài)大 腸桿菌 轉(zhuǎn) 化 電 泳技 術(shù) 篩選 鑒 定 重 組載 體 引言 Your pany slogan LOGO 本章內(nèi)容 ?核酸的瓊脂糖凝膠電泳 ?聚丙烯酰胺凝膠電泳 ?瓊脂糖凝膠 DNA片段的回收 ?感受態(tài)大腸桿菌的制備 Your pany slogan LOGO 核酸瓊脂糖 凝膠電泳 Your pany slogan LOGO 瓊脂糖凝膠電泳原理與操作 Your pany slogan LOGO 核酸的瓊脂糖凝膠電泳 — 注意事項(xiàng) 準(zhǔn)備干凈的配膠板和電泳槽 選擇電泳方法 適合的電泳緩沖液 電泳的合適電壓和溫度 DNA樣品的純度和狀態(tài) DNA的上樣 Marker的選擇 凝膠的染色和觀察 正確選擇凝膠濃度 Your pany slogan LOGO 準(zhǔn)備干凈的配膠板和電泳槽 注意 :DNA酶污染的儀器可能會降解 DNA,造成條帶信號弱、模糊甚至缺失的現(xiàn)象 Your pany slogan LOGO 選擇電泳方法 1.一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以; 2.如果需要分辨率高的電泳,特別是只有幾個 bp的差別應(yīng)該選擇聚丙烯酰胺凝膠電泳; 3.用普通電泳不合適的巨大 DNA鏈應(yīng)該使用脈沖凝膠電泳。注意巨大的 DNA鏈用普通電泳可能跑不出膠孔導(dǎo)致缺帶。 Your pany slogan LOGO 適合的電泳緩沖液 常用的緩沖液有 TAE和TBE,而 TBE比 TAE有著更好的緩沖能力。 注意電泳緩沖液多次使用后,離子強(qiáng)度降低,PH值上升,緩沖性能下降,可能使 DNA電泳產(chǎn)生條帶模糊和不規(guī)則的 DNA帶遷移的現(xiàn)象。 電 泳 緩 沖液配制 Your pany slogan LOGO 正
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