核酸的結(jié)構(gòu)與功能(1)-資料下載頁(yè)
2025-08-16 02:05本頁(yè)面
【正文】 應(yīng) ） , DNA的功能恢復(fù) 。 DNA的變性過(guò)程 加熱 部分雙螺旋解開(kāi) 無(wú)規(guī)則線團(tuán) 鏈內(nèi)堿基配對(duì) 雜交 ?具有互補(bǔ)序列的不同來(lái)源的單鏈核酸分子，按堿基配對(duì)原則結(jié)合在一起稱為雜交（ hybridization）。雜交可發(fā)生在DNADNA、 RNARNA和 DNARNA之間。雜交是分子生物學(xué)研究中常用的技術(shù)之一，利用它可以分析基因組織的結(jié)構(gòu)，定位和基因表達(dá)等，常用的雜交方法有 Southern印跡法， Northern印跡法和原位雜交（ insitu hybridization）等。 分子雜交的原理示意圖 不 同 來(lái) 源 的DNA單鏈間或單鏈 DNA與 RNA之間只要有堿基配對(duì)的區(qū)域 ， 在復(fù)性時(shí)可形成局部雙螺旋區(qū) ， 稱核酸 分 子 雜 交 （hybridization）制備特定的探針（ probe） 通過(guò)雜交技術(shù)可進(jìn)行基因的檢測(cè)和定位研究 。 實(shí)例：southern印跡法 Southern印跡法 DNA分子 限制片段 限制性酶切割 瓊脂糖電泳 轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上 與放射性標(biāo)記DNA探針雜交 放射自顯影 帶有 DNA片段的凝膠 凝膠 濾膜 用緩沖液轉(zhuǎn)移 DNA 吸附有 DNA片段的膜 Tm： 熔解溫度（ melting temperature） Poly d(AT) DNA Poly d(GC) DNA的變性發(fā)生在一個(gè)很窄的溫度范圍內(nèi) ， 通常把熱變性過(guò)程中 A260達(dá)到最大值一半時(shí)的溫度稱為該DNA的熔解溫度 ， 用Tm表示 。 Tm的 大小與 DNA分子中 （ G+C） 的百分含量成正相關(guān) ， 測(cè)定 Tm值可推算核酸堿基組成及判斷 DNA純度 。 某些 DNA的 Tm值 60 80 100 1 .0 1 .4 1 .2 100% A260 t \ 0C Tm Tm Tm 1 2 3 1 2 3 沉降系數(shù)（ S） 生物大分子在單位離心力場(chǎng)作用下的沉降速度稱為沉降系數(shù) 。 即沉降系數(shù)是微顆粒在離心力場(chǎng)的作用下 ， 從靜止?fàn)顟B(tài)到達(dá)極限速度所需要的時(shí)間 。 其單位用Svedberg， 即 s表示 ， s=1 1013秒 。 沉降系數(shù)（ S） 與分子量（ M） 的關(guān)系 M = RTs D(1??) Svederg方程 : 第六節(jié) DNA研究進(jìn)展 一 、 人類(lèi)基因組計(jì)劃簡(jiǎn)介 （ Human Genome Project， HGP） 二 、 DNA芯片技術(shù)簡(jiǎn)介 （ DNA chip） 人類(lèi)基因組計(jì)劃簡(jiǎn)介 （ Human Genome Project， HGP） 該計(jì)劃是美國(guó)科學(xué)家在 1985年率先提出， 1990年正式啟動(dòng)。美、英、德、法、日先后參加了此項(xiàng)工作，1999年我國(guó)成為 HGP的第六個(gè)成員國(guó)。 HGP旨在闡明人類(lèi)基因組 DNA所具有的 3 109核苷酸的序列，發(fā)現(xiàn)所有的人類(lèi)基因并闡明其在染色體上的位置，破譯人類(lèi)的全部遺傳信息，使得人類(lèi)第一次在分子水平上全面地認(rèn)識(shí)自我。 到目前為止，已完成了人類(lèi)基因組的框架圖，測(cè)序的工作已基本完成。 HGP的實(shí)施，揭開(kāi)了生命科學(xué)新的一頁(yè)，它可以造福于人類(lèi)，但也面臨的倫理的挑戰(zhàn)。 HGP取得的成就 ? 完成了人類(lèi)基因組工作草圖繪制 ,揭示了人類(lèi)基因組若干細(xì)節(jié) ? 基本上測(cè)定了人類(lèi)基因組上的堿基序列 ? 一些模式生物 (果蠅、擬南介等 )和作物（如水稻）基因草圖繪制成功，測(cè)序基本完成 ? 促進(jìn)了生物信息學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、糖組學(xué)的迅猛發(fā)展 ? 人類(lèi)基因組草圖繪就，中國(guó)科學(xué)家功不可沒(méi) HGP面臨的挑戰(zhàn) ? 基因的隱私權(quán)問(wèn)題 ? 基因組圖譜和信息的使用與人的社會(huì)權(quán)利問(wèn)題 ? 基因資源問(wèn)題 ? 基因知識(shí)的濫用問(wèn)題 DNA芯片技術(shù)簡(jiǎn)介 DNA芯片 (DNA chip)技術(shù)是采用寡核苷酸原位合成或顯微打印手段，將數(shù)以萬(wàn)計(jì)的 DNA探針片段有序地固化于支持物表面上，產(chǎn)生二維 DNA探針陣列，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)生物樣品的快速、并行、高效地檢測(cè)或診斷。 由于常用硅芯片作為固相支持物，且在制備過(guò)程中運(yùn)用了計(jì)算機(jī)芯片的制備技術(shù)，所以稱為 DNA芯片技術(shù)。 人類(lèi)將進(jìn)入生物經(jīng)濟(jì)時(shí)代 基因 —— 操縱生命的工具 基因組 —— 潛藏著巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值 基因技術(shù) —— 21世紀(jì)的投資熱點(diǎn) 誰(shuí)掌握了人類(lèi)基因圖譜，就等于誰(shuí)破譯了人類(lèi)的生命密碼，獲得了操縱生命的工具。 與互聯(lián)網(wǎng)相比，網(wǎng)絡(luò)只是對(duì)人類(lèi)的信息溝通帶來(lái)了巨大的革命，而基因領(lǐng)域的革命則能夠從根本上改變?nèi)祟?lèi)的命運(yùn)，基因工程所帶來(lái)的商業(yè)機(jī)會(huì)將會(huì)大大超過(guò)網(wǎng)絡(luò)。 問(wèn)答題 某 DNA樣品含腺嘌呤 15%（ 按摩爾堿基計(jì) ） ， 計(jì)算其余堿基的百分含量 。 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)有些什么基本特點(diǎn) ？ 這種結(jié)構(gòu) 與 DNA生物學(xué)功能有什么關(guān)系 ？ tRNA的結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn) ？ 有何功能 ？ DNA和 RNA的結(jié)構(gòu)有何異同 ？ 5. RNA分為哪三種 ?各 有何功能 ? 6 、 試比較核酸、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的異同 . 名詞解釋 變性和復(fù)性 分子雜交 增色效應(yīng)和減色效應(yīng) Tm 堿基當(dāng)量定律
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