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核酸的結構與功能ppt課件-資料下載頁

2025-01-14 22:25本頁面
  

【正文】 3′端具有多聚腺苷酸尾 巴。 ? 出現(xiàn)在 mRNA分子上最多的二級結構部件也是莖環(huán)結構。 mRNA分子的二級結構,特別是兩端的二級結構對于翻譯有影響,而某些mRNA借助于末端特殊的二級結構對基因的表達進行調控。 核酸的理化性質 ? 紫外吸收 ? 酸堿解離 ? 變性 ? 復性和雜交 DNA的變性和復性 變性 ? 核酸的變性是指核酸受到加熱、極端的 pH或離子強度的降低等因素或特殊的化學試劑的作用,其雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,變成單鏈的過程,其中并不涉及共價鍵斷裂。 ? 核酸在變性時,紫外吸收和浮力密度升高,粘度降低,生物活性(主要是 RNA)降低和喪失,其中紫外吸收增加的現(xiàn)象稱為增色效應。 ? 雙鏈 DNA熱變性是在很窄的溫度內發(fā)生的,與晶體在熔點時突然熔化的情形相似,因此 DNA也具有“熔點”,用 Tm表示。 Tm實際是 DNA的雙螺旋有一半發(fā)生熱變性時相應的溫度。 ? DNA的 Tm值受到 DNA的均一性、 GC含量、離子強度和特殊的化學試劑的影響。 GC含量對 DNA Tm的影響 DNA分子中的 GC含量與 DNA Tm之間的關系曲線 復性 ? 核酸變性在一定條件下也是可逆的。當各種變性因素不復存在的時候,變性時解開的互補單鏈全部或部分恢復到天然雙螺旋結構的現(xiàn)象稱為復性。熱變性 DNA 一般經緩慢冷卻后即可復性,此過程被稱為退火。 ? 伴隨著 DNA復性的是其浮力密度和紫外吸收的減少、粘度的增加和生物活性的恢復,其中紫外吸收減少的現(xiàn)象被稱為減色效應。 ? 影響 DNA復性的因素有溫度、離子強度、 DNA濃度和DNA序列的復雜度等。 DNA的復性歷程 不同 DNA的復性動力學曲線 核酸的水解 ? 酸水解 核酸分子內的糖苷鍵和磷酸二酯鍵對酸的敏感性不同:糖苷鍵>磷酸酯鍵;而嘌呤糖苷鍵>嘧啶糖苷鍵 ? 堿水解 RNA的磷酸二酯鍵對堿異常敏感,得到 2′或 3′核苷酸的混合物; DNA對堿的作用并不敏感,其抗堿水解的生理意義在于作為遺傳物質的 DNA應更穩(wěn)定,不易水解。而RNA(主要是 mRNA)是 DNA的信使,完成任務后應該迅速降解。 ? 3. 酶促水解 類別 名稱 作用方式 底物 產物 RNA酶 DNA酶 核酸酶 R N A RNase T1 內切 - GpN- Gp, - Gp RNase A 內切 - PypN- Pyp, - Pup RNase U2 內切 - PupN- Pup, - Pup RNase T2 內切 - NpN- Np RNase H 內切 與 DNA雜交的RNA pN D N A DNase I 內切 DNA pN, pN- DNase II 內切 DNA Np, - Np 鏈球菌 DNase 內切 DNA pN, pN- 限制性內切酶 ( RE) 內切 , 切點位于特殊的堿基序列 雙鏈 DNA 粘端 DNA, 平端 DNA R N A, D N A 核酸酶 P1 內切 、 外切 DNA、 RNA pN 核酸酶 M 內切 DNA、 RNA Np 核酸酶 S1 內切 單鏈 DNA 或RNA pN 牛脾磷酸二酯酶 外切 DNA、 RNA Np 蛇毒磷酸二酯酶 外切 DNA、 RNA pN 不同性質的核酸酶
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