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ch2核酸的結(jié)構(gòu)與功能,2h-資料下載頁(yè)

2025-04-26 08:33本頁(yè)面
  

【正文】 ) 真核生物(以小鼠肝為例) 小亞基 30S 40S rRNA 16S 1542個(gè)核苷酸 18S 1874個(gè)核苷酸 蛋白質(zhì) 21種 占總重量的 40% 33種 占總重量的 50% 大亞基 50S 60S rRNA 23S 5S 2940個(gè)核苷酸 120個(gè)核苷酸 28S 5S 4718個(gè)核苷酸 160個(gè)核苷酸 120個(gè)核苷酸 蛋白質(zhì) 31種 占總重量的 30% 49種 占總重量的 35% ? 18S rRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu) 四、小分子 RNA參與了基因表達(dá)的調(diào)控 ?細(xì)胞的不同部位存在的許多其他種類的小分子 R N A, 統(tǒng)稱為 非編碼小 RNA(small nonmessenger RNAs, snmRNAs),其功能是調(diào)節(jié)基因表達(dá) 。 ? snmRNAs ? 核酶 某些小 RNA分子具有催化特定 RNA降解的活性 , 這種具有催化作用的小 RNA亦被稱為 核酶 (ribozyme)或 催化性 RNA (catalytic RNA)。 RNA具有酶活性的發(fā)現(xiàn) ? Sidney Altman, Thomas R. Cech ? ( 1939) ( 1947) ? The Nobel Prize in Chemistry 1989 ? for their discovery of catalytic properties of RNA 核酸的理化性質(zhì) The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid 第四節(jié) 一、核酸是具有很 強(qiáng)酸性的生物大分子 ?核酸的酸堿及溶解度性質(zhì) ?核酸為多元酸 , 具有較強(qiáng)的酸性 。 ?核酸的高分子性質(zhì) 核酸在波長(zhǎng) 260nm 處有強(qiáng)烈的吸收,是由堿基的 共軛雙鍵 所決定的。這一特性常用作核酸的定性和定量分析。 二、核酸分子具有強(qiáng)烈的紫外吸收 三、 DNA變性是雙鏈解離為單鏈的過(guò)程 在某些理化因素作用下, DNA雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈的過(guò)程,其 本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂 。 ? 定義 常見(jiàn)因素: 過(guò)量酸,堿,加熱,變性試劑如尿素、酰胺以及某些有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮等。 協(xié)同性的DNA解鏈 高溫或極端的 pH ? DNA的變性 ? 部分變性 DNA的電鏡圖像 變性后理化性質(zhì)變化: OD260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸堿滴定曲線改變 生物活性喪失 ?增色效應(yīng) (hyperchromic effect): DNA變性時(shí)其溶液 OD260增高的現(xiàn)象 。 ? DNA解鏈時(shí)的紫外吸收變化 ? DNA的解鏈曲線 連續(xù)加熱 DNA的過(guò)程中以溫度相對(duì)于A260值作圖 , 所得的曲線稱為 解鏈曲線 。 解鏈過(guò)程中 , 紫外吸光度的變化達(dá)到最大變化值的一半時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度 。 解鏈溫度( Tm): ? G+C 含量越高 , 解鏈溫度就越高 。 ? 解鏈曲線的變化 三、核酸的變復(fù)性是分子雜交的基礎(chǔ) ?當(dāng)變性條件緩慢地除去后 , 兩條解離的互補(bǔ)鏈可重新配對(duì) , 恢復(fù)原來(lái)的雙螺旋結(jié)構(gòu) ,這一現(xiàn)象稱為 DNA復(fù)性 (renaturation) 。 ?減色效應(yīng): DNA復(fù)性時(shí) , 其溶液 OD260降低 。 ?熱變性的 DNA經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性 , 這一過(guò)程稱為 退火 (annealing) 。 ?不同種類的 DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中 , 只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對(duì)關(guān)系 , 在適宜的條件可以在不同的分子間形成 雜化雙鏈 (heteroduplex)。 ?這種雜化雙鏈可以在不同的 DNA與 DNA之間形成 , 也可以在 DNA和 RNA分子間或者 RNA與 RNA分子間形成 。 這種現(xiàn)象稱為 核酸分子雜交 。 ? 核酸分子雜交 (hybridization) ? 核酸分子雜交 第五節(jié) (自習(xí)) 常用的核酸分離純化技術(shù) Technology of DNA Isolation and Purification ?酚 氯仿 、 酚 異戊醇抽提法 ?層析法 ( 離子交換 /凝膠 /親和層析 ) ?密度梯度離心法 ?凝膠電泳法 思考題: ? 名詞解釋: Tm 、 ribozyme 、 增色效應(yīng) 、 核酸分子雜交 ? 試比較蛋白質(zhì)與核酸的異同 ? ? 簡(jiǎn)述 tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)和三級(jí)結(jié)構(gòu)? ? DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的要點(diǎn)是什么? ? 請(qǐng)簡(jiǎn)要回答 DNA與 RNA組成上的異同。
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