【正文】 (Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白 )能與 PS高親和力特異性結(jié)合。將 AnnexinV進(jìn)行熒光素（ FITC、 RPE）或 biotin標(biāo)記，以標(biāo)記了的 AnnexinV作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡以及共聚焦激光掃描顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。l 細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)改變的檢測(cè)：l CLONTECH公司的 ApoAlertTMGlutathioneDetectionKit通過(guò)熒光染料 monochlorobimane（ MCB）體外檢測(cè)凋亡細(xì)胞 細(xì)胞質(zhì)中谷光苷肽的減少 來(lái)檢測(cè)凋亡早期細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)的變化。87l 細(xì)胞色素 C的定位檢測(cè)： 通過(guò) Western雜交用細(xì)胞色素 C抗體和 COX4抗體標(biāo)示細(xì)胞色素 C和COX4的存在位置，從而判斷凋亡的發(fā)生。l 線粒體膜電位變化的檢測(cè)：l 端粒酶檢測(cè)： l mRNA水平的檢測(cè)：l 蛋白印跡法 :檢測(cè)細(xì)胞凋亡的相關(guān)蛋白分析 :如caspase、 Fas家族蛋白等 .l :88p 細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)存在的問題細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)存在的問題l （ 1）細(xì)胞凋亡的判斷標(biāo)準(zhǔn) :目前 ,檢測(cè)細(xì)胞凋亡的許多方法的結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)不一。形態(tài)學(xué)檢查是其他各種檢測(cè)方法的基礎(chǔ) ,任何方法的檢查結(jié)果必須結(jié)合形態(tài)學(xué)檢查來(lái)判斷。梯帶狀圖像并不必然與細(xì)胞凋亡相關(guān) 。TUNEL法在壞死細(xì)胞群中也可出現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞。89l （ 2）細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果分析 :在一個(gè)檢測(cè)體系中檢出了發(fā)生凋亡的細(xì)胞,生理性還是病理性，需進(jìn)行致病因素的相關(guān)性分析 .p 細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)存在的問題細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)存在的問題90p 細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)存在的問題細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)存在的問題l （ 3）細(xì)胞凋亡的定量分析：定量分析包括 2個(gè)方面 ,一是群體細(xì)胞凋亡的定量 ,二是細(xì)胞凋亡程度的定量。目前 ,流式細(xì)胞儀常用作群體細(xì)胞凋亡的定量分析 ,但在檢測(cè)中的漏檢率和錯(cuò)檢率都很高。 TUNEL法雖可進(jìn)行群體定量 ,但工作量大 ,同時(shí)易出現(xiàn)壞死細(xì)胞的假陽(yáng)性。91展 望92☆☆ 現(xiàn)代生命科學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài)現(xiàn)代生命科學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài) 細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué) 與與 分子生物學(xué)分子生物學(xué) (包括分子遺傳學(xué)與生包括分子遺傳學(xué)與生物化學(xué)物化學(xué) ) 相互滲透與交融是總的發(fā)展趨勢(shì)。相互滲透與交融是總的發(fā)展趨勢(shì)。 　 （細(xì)胞凋亡研究所處的地位）（細(xì)胞凋亡研究所處的地位）93生命科學(xué)的研究從宏觀上可以分為生命科學(xué)的研究從宏觀上可以分為 三個(gè)層次三個(gè)層次：：　　　　　核心層次　　　核心層次 （包括分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)學(xué)科）（包括分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)學(xué)科） 　　　　　　　個(gè)體生物學(xué)層次　　　個(gè)體生物學(xué)層次 （對(duì)多個(gè)物種及種群的結(jié)構(gòu)及功能研究）（對(duì)多個(gè)物種及種群的結(jié)構(gòu)及功能研究）　　　生物圈層次　　　生物圈層次 ?！　　o(wú)論是對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的深入研究，還是對(duì)細(xì)　　　無(wú)論是對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的深入研究，還是對(duì)細(xì)胞重大生命活動(dòng)規(guī)律的探索，都需要用分子生物學(xué)的胞重大生命活動(dòng)規(guī)律的探索，都需要用分子生物學(xué)的新概念與新方法，在分子水平上進(jìn)行研究，換句話說(shuō)新概念與新方法，在分子水平上進(jìn)行研究，換句話說(shuō)， 細(xì)胞分子生物學(xué)細(xì)胞分子生物學(xué) 或或 分子細(xì)胞生物學(xué)分子細(xì)胞生物學(xué) 將是今后相當(dāng)一將是今后相當(dāng)一段時(shí)間的主流。段時(shí)間的主流。94l 2022年 《 美國(guó)科學(xué)院院報(bào) 》 （ PNAS）的一篇文章中，通過(guò)數(shù)學(xué)方法，對(duì)科學(xué)雜志的引用關(guān)系進(jìn)行了分析，對(duì)當(dāng)前的 88個(gè)研究領(lǐng)域進(jìn)行了排序。l 分子與細(xì)胞生物學(xué)分子與細(xì)胞生物學(xué) 當(dāng)之無(wú)愧成為 最大熱門。9596對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的研究成為當(dāng)今生命科學(xué)發(fā)展的瓶頸對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的研究成為當(dāng)今生命科學(xué)發(fā)展的瓶頸細(xì)胞生命活動(dòng)細(xì)胞生命活動(dòng)突變體分析突變體分析 突變體分析突變體分析 蛋白修飾分析蛋白修飾分析基因表達(dá)基因表達(dá) 多肽定性分析多肽定性分析生物信息學(xué)生物信息學(xué)序列測(cè)定序列測(cè)定雙向電泳分析雙向電泳分析DNA分離與克隆分離與克隆 機(jī)器人技術(shù)機(jī)器人技術(shù) (robotics) 功能基因組學(xué)功能基因組學(xué)蛋白質(zhì)分離與制備蛋白質(zhì)分離與制備 蛋白質(zhì)組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)9798重點(diǎn)研究領(lǐng)域：重點(diǎn)研究領(lǐng)域：l　　 染色體染色體 DNA與蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系與蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系 　　　 — 主要是非組蛋白對(duì)基因組的作用l　 細(xì)胞增殖、分化、凋亡的相互關(guān)系及其調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、凋亡的相互關(guān)系及其調(diào)控 　　　 　 細(xì)胞增殖、分化、凋亡與衰老是細(xì)胞最重要的生命活動(dòng)現(xiàn)象，它們既相互聯(lián)系又相互制約并受到一系列基因的調(diào)控。一切動(dòng)植物的生長(zhǎng)發(fā)育都是依靠細(xì)胞增殖、分化與凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的。l　 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究 包括細(xì)胞間信號(hào)傳遞、受體與信號(hào)跨膜傳導(dǎo)、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞途徑l　 細(xì)胞結(jié)構(gòu)體系的組裝細(xì)胞結(jié)構(gòu)體系的組裝 生物大分子如何逐級(jí)裝配并最終形成生物賴以進(jìn)行生命活動(dòng)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)體系的問題 99l 美國(guó)科學(xué)情報(bào)研究所（ ISI） 1997年以來(lái) SCI（Science Citation Index）收錄及引用論文檢索，全世界自然科學(xué)研究中論文發(fā)表最集中的幾個(gè)領(lǐng)域分別是：l ?細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) （ signal transduction）；l ?細(xì)胞凋亡 （ cell apoptosis）；l ?基因組與后基因組學(xué)研究 （ genome and postgenomic analysis）。100?Apoptosis is a multistep, multipathway celldeath programme that is inherent in every cell of the body. ?Apoptosis can be initiated either through the deathreceptor or the mitochondrial pathway. Caspases that cleave cellular substrates leading to characteristic biochemical and morphological changes are activated in both pathways. The apoptotic process is tightly controlled by various proteins. ?Immune cells (T cells amp。 natural killer cells) can kill tumour cells using the granule exocytosis pathway or the deathreceptor pathway. ?Cancer treatment by chemotherapy and irradiation kills target cells primarily by inducing apoptosis. Therefore, modulation of the key elements of apoptosis signalling directly influences therapyinduced tumourcell death. Summary101102