藥品標(biāo)準(zhǔn)實(shí)務(wù)總結(jié)-資料下載頁
2025-08-05 16:18本頁面
【正文】 注。 校正因子的測定需要用到特定雜質(zhì)及主成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)具備量值準(zhǔn)確的特點(diǎn)，符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（對照品）的相關(guān)要求；其次，確定校正因子的分析方法應(yīng)與最終確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法一致，色譜條件等需經(jīng)篩選優(yōu)化后確定，如有變更，需考慮對校正因子的影響，必要時(shí)重新確定；第三，要關(guān)注影響待測物UV吸收的各種因素，如溶液制備所用溶劑最好與最終確定的流動相相同，檢測波長最好在特定雜質(zhì)及主成分UV曲線的峰或谷處，避開吸收值急劇變化波段，以保證測定方法具有較好的耐用性，并保持測定結(jié)果的恒定。 一般情況下，校正因子可視具體情況通過如下幾種方法確定： （1）單濃度點(diǎn)測定：制備適當(dāng)濃度的特定雜質(zhì)對照品溶液和主成分對照品溶液，分別進(jìn)樣測定，照上式計(jì)算，得到校正因子。 （2）多濃度點(diǎn)測定：制備適當(dāng)?shù)母?、中、低三水平濃度的特定雜質(zhì)對照品溶液和主成分對照品溶液（涵蓋定量限、標(biāo)準(zhǔn)限度），分別進(jìn)樣測定，照上式計(jì)算各校正因子，計(jì)算RSD，求平均值，得到校正因子。 （3）標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定：精密稱取雜質(zhì)對照品和主成分對照品，分別制備系列溶液（涵蓋定量限、標(biāo)準(zhǔn)限度），分別進(jìn)樣后，按最小二乘法以進(jìn)樣量對響應(yīng)值（峰面積等）進(jìn)行線性回歸，求得兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，兩曲線斜率之比即為校正因子。 （4）吸收系數(shù)比值法：對于UV檢測器來講，兩物質(zhì)的相對校正因子實(shí)際上也是兩物質(zhì)以流動相為溶劑，在檢測波長處的紫外吸收系數(shù)E1cm1%之比，故可按吸收系數(shù)法測定法的相關(guān)技術(shù)要求測定各自吸收系數(shù)，如對照品級別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、高中低三水平濃度測定、～、至少5臺不同型號的UV分光光度計(jì)、2份供試液同時(shí)平行制備測定、同臺儀器2份供試液的平行測定結(jié)果不超過177。%等。測定兩物質(zhì)的吸收系數(shù)后，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析確定兩物質(zhì)吸收系數(shù)，計(jì)算比值，求得校正因子。 根據(jù)雜質(zhì)研究相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則，為確保雜質(zhì)測定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，一般情況下，～，直接采用不加校正因子的自身對照法定量；超出該范圍，如采用主成分自身對照法的定量方式，須用校正因子進(jìn)行校正，即“加校正因子的主成分自身對照法”以保證雜質(zhì)定量的準(zhǔn)確性；～，表明雜質(zhì)與主成分的UV吸收相差過大，校正因子的作用會受到顯著影響，此時(shí)應(yīng)改變檢測波長等檢測條件，使校正因子位于上述范圍內(nèi)，或使用結(jié)構(gòu)或UV吸收與該雜質(zhì)接近的另一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為參照物質(zhì)（如對照品易于獲得、標(biāo)準(zhǔn)已采用對照品外標(biāo)法定量的另一特定雜質(zhì)），重新確立校正因子；如校正因子仍無法調(diào)節(jié)至適當(dāng)范圍，需考慮采用雜質(zhì)對照品外標(biāo)法等適當(dāng)?shù)碾s質(zhì)方式定量。 校正因子的應(yīng)用同吸收系數(shù)的使用類似，需要具備一定的前提條件，比如相同的檢測波長、分析方法、色譜條件等。需要注意的是，雜質(zhì)的保留時(shí)間差別較大時(shí)，峰形及峰面積會有較大差別，對校正因子的校準(zhǔn)作用也會產(chǎn)生明顯影響，因此色譜峰的保留時(shí)間要相對恒定，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)需要對相關(guān)特定雜質(zhì)的色譜峰規(guī)定相對保留時(shí)間的限定。 在目前的申報(bào)資料中，校正因子的研究和使用中存在一些需要關(guān)注的問題。主要表現(xiàn)在如下幾個(gè)方面： （1）特定雜質(zhì)直接采用主成分自身對照法定量，沒有進(jìn)行校正因子的研究以及測定結(jié)果校正前后的數(shù)據(jù)對比，無法判斷定量方式的合理性和測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。 （2）測定的校正因子超過指導(dǎo)原則中不需校正的范圍，仍直接采用不加校正因子的主成分自身對照法。如某藥物中雜質(zhì)I、II、但質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)仍采用不加校正因子的主成分自身對照法測定包括上述三個(gè)雜質(zhì)的各種雜質(zhì)。 （3）測得的校正因子不能有效校正測定結(jié)果，在沒有充分的數(shù)據(jù)支持的情況下，仍采用加校正因子的主成分自身對照法。，該數(shù)值校正能否準(zhǔn)確定量雜質(zhì)，沒有相應(yīng)研究工作的論證和對比檢測數(shù)據(jù)的支持顯然是不夠的。關(guān)于強(qiáng)制降解試驗(yàn)中物料平衡的問題首先，主成分峰降解強(qiáng)度為10％左右，不超過10％。有雜質(zhì)對照品時(shí)，計(jì)算出校正因子，將校正因子代入計(jì)算。做主峰的峰純度檢查（DAD、MS），二極管陣列檢測的作用不僅是峰純度檢查，另外，還反映出雜質(zhì)及主藥的總體紫外吸收情況，可以計(jì)算在不同波長處的物料平衡情況（按具體品種而定）。計(jì)算方法：具體做法：建議取一定量的樣品溶解，作為母液，分別從母液中取一定量進(jìn)行多個(gè)因素的降解試驗(yàn)，再與此母液做的正常樣（減小誤差）對照，通過與正常樣的總分面積對比。峰純度檢查歸一化比較光譜：分別取色譜峰的前沿、峰頂和峰尾處的光譜圖進(jìn)行比較， 如果色譜峰是純凈物形成的， 那么在色譜峰各點(diǎn)所得的光譜僅在振幅響應(yīng)上有差別， 用歸一化方法， 所得的紫外一可見光譜應(yīng)完全一致， 用匹配因子來衡量， 其值應(yīng)接近于。若在色譜峰的不同部位得到的吸收光譜中， 吸收最大值或最小值發(fā)生了位移， 則證明該色譜峰中有雜質(zhì)存在。要使雜質(zhì)含量低于， 則純度匹配因子應(yīng)在以上。這種鑒定方法的靈敏度主要取決于物質(zhì)和雜質(zhì)的光譜區(qū)別、相對吸收度及保留時(shí)間的差別。最近等人漢通過直接計(jì)算吸收光譜對之間的相關(guān)系數(shù)，有效地鑒定了多吠的重疊峰。吸收比法：對于任何在紫外一可見光區(qū)有吸收的純物質(zhì)在兩個(gè)選定波長下的吸收比為一常數(shù)，且與濃度無關(guān)。在組分的洗脫過程中，吸收比應(yīng)恒定。以這一比值對分析時(shí)間作圖，純物質(zhì)應(yīng)是恒定值的方波形。雜質(zhì)存在將使其產(chǎn)生扭曲。比值圖不僅可以用于估計(jì)峰純度，而且還可確定峰種類。吸收比法的可靠性依賴于波長的選擇及吸收值的差別，波長應(yīng)盡量選擇在具有最大吸收差別處。光譜抑制法：簡稱光譜抑制法是吸收比法的進(jìn)一步發(fā)展， 本法測定二波長的信號差△A對分析時(shí)間t作圖得到差示色譜，純物質(zhì)應(yīng)為零信號，雜質(zhì)則將產(chǎn)生非零偏差。應(yīng)用光譜抑制法，至少要知道一個(gè)洗脫組分的光譜， 而且光譜差異要大。MS分析：對產(chǎn)生的碎片離子峰進(jìn)行對比，便很清晰的知道峰的純度。注：前三種方法采用的DAD檢測器，根據(jù)DAD得到時(shí)間—波長—吸光度三維圖譜的原理?，F(xiàn)場確認(rèn)1 時(shí)間鏈原料，對照品采購發(fā)票時(shí)間2 物料平衡樣品生產(chǎn)記錄、研究消耗用量，剩余量對照品購買量，每次研究的消耗量3電子圖譜參考2008年下發(fā)的《化學(xué)藥品研究資料及圖譜真實(shí)性問題判定標(biāo)準(zhǔn)》用Excel核對每一張圖譜的進(jìn)樣時(shí)間，保密相片機(jī)上拍照時(shí)間4儀器使用記錄注意色譜工作站LOG里的記錄，天平稱量記錄5對照品存取記錄6穩(wěn)定性樣品存取記錄10
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