【正文】 02 21 92 1HHHOO2 32 4甾體母核部分的 C17位上連接的六元不飽和內(nèi)酯環(huán)即 △ αβ,γδ 雙烯 δ 內(nèi)酯 ，故乙型強(qiáng)心苷元共由 24個(gè)碳原子組成。 強(qiáng)心苷多為無(wú)色晶體或無(wú)定形粉末，中性物質(zhì)，有旋光性。味苦， C17側(cè)鏈 α 構(gòu)型的味不苦，但無(wú)療效。 (1)溶解性 強(qiáng)心苷一般可溶于水、甲醇、丙酮等極性溶劑，難溶于乙醚、苯、石油醚等非極性溶劑。與皂苷類(lèi)化合物相似，結(jié)構(gòu)中的糖基的數(shù)量和苷元中羥基等極性基團(tuán)的數(shù)量的多少及位置，決定了化合物的溶解性，使各個(gè)強(qiáng)心苷的溶解性差別較大。一般羥基數(shù)量多，有利于同極性溶劑生成更多的分子間氫鍵而增加溶解度。 (2)水解反應(yīng) 強(qiáng)心苷的苷鍵： 酸、酶水酸。酸水解方法包括溫和的酸水解、強(qiáng)烈的酸水解 (注意反應(yīng)條件 )。 苷元結(jié)構(gòu)中的不飽和內(nèi)酯環(huán)： 堿水解 ① 溫和的酸水解 主要針對(duì) 2去氧糖與苷元 形成的苷鍵。因苷元和 2去氧糖之間的苷鍵及兩個(gè) 2去氧糖之間的苷鍵極易被酸水解，對(duì)苷元影響小，不致引起脫水反應(yīng)，但是 2羥基糖 (如葡萄糖 )和 2去氧糖之間的苷鍵在此條件下不易斷裂，因此水解產(chǎn)物中常得到二糖或三糖。 方法：用稀酸 (～ )在含水醇中經(jīng)短時(shí)間 (半小時(shí)至數(shù)小時(shí) )加熱回流，可使強(qiáng)心苷水解成苷元和糖。 ② 強(qiáng)烈的酸水解 對(duì)于不含 2去氧糖的強(qiáng)心苷在稀酸條件下水解較為困難。較劇烈的條件： 3％～ 5％ HCl, 增加作用時(shí)間或同時(shí)加熱，才能使其水解。 上述條件引起苷元發(fā)生脫水反應(yīng)，得不到原來(lái)的苷元。其中， C14羥基和 5β 羥基均系叔羥基，最易發(fā)生脫水反應(yīng)， C16羥基也可與 C17氫脫水。 ③ 酶水解 含強(qiáng)心苷的植物中： 有 選擇性水解 β D葡萄糖苷鍵的酶共存， 沒(méi)有 可以水解 2去氧糖苷鍵的酶。 與強(qiáng)心苷共存的酶只能使末位的葡萄糖脫離，而不能水解 2去氧糖，從而去除分子中的葡萄糖而保留 2去氧糖。 酶的水解能力： 乙型強(qiáng)心苷較甲型強(qiáng)心苷更易被酶水解；一般糖基比乙?；腔馑俣瓤?。 由于酶解法具有條件溫和，選擇性好，產(chǎn)率高等特點(diǎn)，在強(qiáng)心苷生成中有很重要的作用。 應(yīng)用： 利用酶解法使植物體內(nèi)的原生苷水解成強(qiáng)心作用更強(qiáng)的次生苷。因?yàn)閺?qiáng)心苷的強(qiáng)心作用與分子中糖基數(shù)目有關(guān)，即苷的強(qiáng)心作用強(qiáng)度為：?jiǎn)翁擒?二糖苷 三糖苷。 ④ 堿水解 強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)中，除了苷元上具有不飽和的內(nèi)酯環(huán)，在苷元以及所連接的糖基上常有乙酰取代。堿試劑可使強(qiáng)心苷分子中的 酰基水解、內(nèi)酯環(huán)開(kāi)裂、△ 20(22)轉(zhuǎn)位及苷元異構(gòu)化等 。同樣的 ,可以進(jìn)行 溫和的和劇烈的 堿水解。 溫和的堿水解： 試劑有碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣和氫氧化鋇。可選擇性地水解?；挥绊憙?nèi)酯環(huán)。 劇烈的堿水解： 試劑有氫氧化鈉、氫氧化鉀。 在水溶液中，氫氧化鈉、氫氧化鉀能使強(qiáng)心苷的內(nèi)酯環(huán)開(kāi)裂，酸化后又可重新閉環(huán)。在醇溶液中，氫氧化鈉、氫氧化鉀也能使內(nèi)酯環(huán)開(kāi)裂，但同時(shí)還使其結(jié)構(gòu)異構(gòu)化，故酸化也不再有可逆變化。 碳酸氫鈉或碳酸氫鉀主要使 2氧糖上的?；?，而 2羥基糖及苷元的酰基往往不被其水解；氫氧化鈣或氫氧化鋇可以使 2去氧糖、 2羥基糖及苷元上的 2羥基糖及苷元酰基水解。 (3)顯色反應(yīng) 強(qiáng)心苷除了一般苷類(lèi)的顯色反應(yīng)外，由于強(qiáng)心苷分子中有 甾體母核、不飽和內(nèi)酯環(huán)和 α去氧糖等結(jié)構(gòu)部分，可與一些化學(xué)試劑發(fā)生反應(yīng)而顯特定的顏色。 ① 甾體母核的顯色反應(yīng) 無(wú)水條件下，強(qiáng)心苷經(jīng)強(qiáng)酸 (如硫酸、鹽酸 )、中強(qiáng)酸 (如磷酸、三氯乙酸 )、路易斯酸 (如三氯化銻 )的作用，甾體母核脫水形成雙鍵，由于雙鍵移位、縮合等形成較長(zhǎng)的共軛系統(tǒng)，并在濃酸溶液中形成多烯正碳離子的鹽而呈現(xiàn)一系列的顏色變化。 a．乙酐 濃硫酸反應(yīng)： 強(qiáng)心苷溶于氯仿，加冷乙酐 濃硫酸 (3： 2)混合液數(shù)滴，反應(yīng)液呈黃 紅 藍(lán) 紫 綠的顏色變化，最后褪色。本反應(yīng)的顏色變化過(guò)程隨分子中羥基、雙鍵的數(shù)目與位置不同而異，羥基多、有不飽和雙鍵的作用較快。 b． Salkowski反應(yīng)： 強(qiáng)心苷溶于氯仿，沿管壁緩緩加入濃硫酸靜置，氯仿層呈血紅色或青色，硫酸層有綠色熒光。 c．三氯化銻反應(yīng) d． Tschugaev反應(yīng) e．磷酸反應(yīng) f．三氯醋酸一氯胺 T反應(yīng) ② α ,β 不飽和內(nèi)酯環(huán)的顯色反應(yīng) 甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，雙鍵由 20(22)轉(zhuǎn)移到 20(21)，生成 C22活性亞甲基；乙型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中不能產(chǎn)生活性亞甲基。故能用活性亞甲基試劑顯色作用區(qū)別甲型和乙型強(qiáng)心苷。 常用活性亞甲基試劑： b．間二硝基苯試劑 c． 3,5二硝基苯酸甲試劑d．堿性苦味酸試劑 a．亞硝酰鐵氰化鈉試劑： 取樣品 1~2mg，溶于2~3滴吡啶中，加 1滴 3％亞硝酰鐵氰化鈉溶液和 1滴 2mol／ L的氫氧化鈉溶液，反應(yīng)液呈深紅色并逐漸褪去。 ③ α 去氧糖的顯色反應(yīng) a． KellerKiliani(k k)反應(yīng)： 取樣品 lmg溶于 5mL冰醋酸中，加 l滴 20％三氯化鐵水溶液，傾斜試管，沿管壁徐徐加入 5mL濃硫酸，觀察界面和乙酸層的顏色變化。如有 α 去氧糖存在，乙酸層漸呈藍(lán)色。界面的顏色隨苷元羥基、雙鍵位置和數(shù)目不同而異。 b．過(guò)碘酸 對(duì)硝基苯胺反應(yīng)： 本試劑對(duì)強(qiáng)心苷分子中的 α 去氧糖反應(yīng)機(jī)理是：過(guò)碘酸能使強(qiáng)心苷分子中的 α 去氧糖氧化生成丙二醛，丙二醛與對(duì)硝基苯胺試液反應(yīng)呈深黃色。 提取分離單體強(qiáng)心苷的難度：成分復(fù)雜；含量較低；發(fā)生水解、脫水及異構(gòu)等反應(yīng)。 強(qiáng)心苷有親脂性苷、弱親脂性苷或水溶性苷： 70％～ 80％的乙醇為提取溶劑，析膠濃縮后用氯仿和氯仿 乙醇溶液依次萃取，將強(qiáng)心苷按極性大小劃分成幾個(gè)部分。 各個(gè)部分中如有含量較高的組分，可用適當(dāng)?shù)娜軇┙Y(jié)晶，再進(jìn)一步用適當(dāng)?shù)娜軇┨崛『笫怪Y(jié)晶或純化，但一般還需要用各種色譜方法分離。 常用的色譜方法有硅膠、反相硅膠和氧化鋁吸附色譜及各種分配色譜等。硅膠和氧化鋁吸附色譜一般可用氯仿 甲醇，乙酸乙酯 甲醇等溶劑系統(tǒng)洗脫，反相硅膠吸附色譜可用水 甲醇、甲醇 氯仿等溶劑系統(tǒng)洗脫。以上方法綜合應(yīng)用，常能使復(fù)雜的強(qiáng)心苷混合物得以分離。 (1)紫外光譜 強(qiáng)心苷類(lèi)化合物：分子中苷元部分存在五元或六元不飽和內(nèi)酯環(huán)，其紫外吸收光譜的特征較顯著。 △ αβ五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的甲型強(qiáng)心苷元：200~217nm(~)處呈現(xiàn)最大吸收 。 △ αβ,γδ六元不飽和內(nèi)酯環(huán)的乙型強(qiáng)心苷元：295~300nm()處呈現(xiàn)最大吸收 。 兩類(lèi)強(qiáng)心苷元的紫外吸收光譜的特征吸收區(qū)別顯著，可供結(jié)構(gòu)鑒別。 (2)紅外光譜 υc=o峰為特征吸收峰。 △ αβ五元不飽和內(nèi)酯環(huán)：1800~1700 cm1 處有兩個(gè)強(qiáng)吸收峰。 △ αβ,γδ六元不飽和內(nèi)酯環(huán)兩個(gè)吸收峰較五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的相應(yīng)吸收分別向低波數(shù)位移約 40 cm1 。