【正文】 得有關(guān)結(jié)構(gòu)信息。 一、紫外光譜 ? 可用于 確定黃酮母核類型及確定某些位置是否含有羥基 。 ? 一般程序： ①測定樣品在甲醇中的 UV譜以了解母核類型； ②在甲醇溶液中分別加入各種診斷試劑后測 UV譜和可見光譜以了解 3,5,7,3’,4’有無羥基及鄰二酚羥基； ③苷類可水解后（或先甲基化再水解），再用上法測苷元的 UV譜以了解糖的連接位置 。 黃酮（醇）： 帶 II、帶 I均強(qiáng) 母核光譜特征 二氫黃酮類、異黃酮類：帶 II強(qiáng)、 帶 I弱 母核的推斷 （甲醇） 查耳酮、橙酮：帶 II弱、帶 I強(qiáng) 取代基： OH等，為助色團(tuán) 依紅移規(guī)律推斷取代基團(tuán) 甲醇鈉：強(qiáng)堿，所有酚羥基解離 醋酸鈉：堿性弱，酸性強(qiáng)的酚羥基解離 加入診斷試劑 醋酸鈉 /硼酸：鄰二酚羥基絡(luò)和 相應(yīng)吸收峰紅移 三氯化鋁： 3OH， 4羰基 5OH， 4羰基 絡(luò)和 鄰二酚羥基 OOROOROOR++ 苯甲酰系統(tǒng) 桂皮酰系統(tǒng) （帶 II 220~280nm） （帶 1 300~400nm） 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系 多數(shù)黃酮類化合物由兩個主要吸收帶組成： 帶 I在 300400nm區(qū)間，由 B環(huán)桂皮酰系統(tǒng)的電子躍遷所引起； 帶 II在 240285nm區(qū)間，由 A環(huán)苯甲酰系統(tǒng)的電子躍遷所引起。 OOOOOOOO 帶 II(240285nm)（ 苯甲酰系統(tǒng) ） 帶 I(300400nm) 桂皮酰系統(tǒng) 類 型 說 明 250285 304350 黃酮類 OH 越多 ，帶 I帶 II越紅移 , Ⅰ 、 Ⅱ 皆強(qiáng) B 環(huán) 3’,4’有 OH， 帶 II為雙峰 （ 主峰伴肩峰 ） 328357 黃酮醇類 (3OR) 352385 黃酮醇類 (3OH) 245270 270295 300400 （肩峰） 異黃酮類 二氫黃酮（ 醇 ） Ⅰ 弱 Ⅱ 強(qiáng) B環(huán)上有 OH, OCH3對帶 I影響不大 220270 （低強(qiáng)度） 340390 查耳酮類 查耳酮 2’OH使帶 I向紅移影響大 370430(34個小峰 ) 橙酮類 圖 1 黃酮和黃酮醇類 木犀草素（黃酮）￣ ； 槲皮素（黃酮醇） ﹉ 圖 2 異黃酮及二氫黃酮類 7羥基異黃酮￣ ； 7， 4， 二羥基二氫黃酮 ﹉ 圖 3 查耳酮及橙酮類 2， 3， 4三羥基查耳酮￣； 3， ， 4， 二羥基橙酮 ﹊ 黃酮及黃酮醇類： 主要特征為峰形相似（ Ⅰ 、Ⅱ 皆強(qiáng)）。帶 Ⅱ 峰位相似，帶 Ⅰ 峰位不同：其最大吸收波長為黃酮 ﹤ 黃酮醇。 異黃酮和二氫黃酮（醇）類： 主要特征為帶 Ⅱ 為強(qiáng)吸收峰（都有苯甲?；?，帶 Ⅰ 均為弱（肩）峰（ B環(huán)未與 C環(huán)羰基共軛）。帶 Ⅱ 峰位：異黃酮 ﹤ 二氫黃酮（醇）類。 查耳酮及橙酮類： 主要特征是帶 Ⅰ 為強(qiáng)吸收峰，而帶 Ⅱ 則較弱，為次強(qiáng)峰。帶 Ⅰ 峰位：橙酮﹥ 查耳酮。 （ 2）取代基團(tuán)對共軛吸收的影響 ? 黃酮類核中引入 OH（酚羥基）等供電基團(tuán)，使共軛程度增強(qiáng)，相 應(yīng)的吸收峰紅移。 一般， A環(huán)引入 – OH，帶 II紅移， B環(huán)引入 – OH帶 I紅移。 ? 羥基甲基化或苷化后，原酚羥基的供電能力下降，引起相應(yīng)的吸收峰紫移。 3OH甲基化或苷化，帶 I紫移， 5OH（與羰基形成分子內(nèi)氫鍵）甲基化，帶 I、帶 II均紫移 5~15nm， 4′OH甲基化，帶 I紫移 3~10nm。 ? 羥基乙?；?，乙酰基的吸電作用，使原來酚羥基對共軛系統(tǒng)的供電能力消失，對光譜的影響亦將完全消失。 2．加入診斷試劑后引起的位移及結(jié)構(gòu)測定 診斷試劑可使黃酮類化合物的酚羥基解離或形成螯合物，導(dǎo)致光譜的特征性改變，根據(jù)這些變化可以推斷酚羥基等取代基的位置或數(shù)目。 以下以黃酮、黃酮醇類為例介紹其對黃酮類化合物紫外光譜的影響及其在結(jié)構(gòu)測定中的意義。 加入試劑 帶 II 帶 I 說明 樣品+MeOH 250285 304385 兩峰強(qiáng)度基本相同 ， 具體位置與母核上電負(fù)性取代基 (OH, OCH3)有關(guān) ， OH, OCH3越多 ，越長移 +NaOMe 或+NaOH A 環(huán)有 OH ， 紅移小 ， 無意義 ?4060nm（ ?不變或增強(qiáng) ） ?5060nm（ ?下降 ） 有 4’OH， 無 3OH 有 3OH， 無 4’ OH 有 3,4’OH或 3,3’,4’OH（ 衰減更快 ） 7OH 帶 I， II隨加 NaOMe時間延長 ， 逐漸衰減 320330nm有小峰 +NaOAc (未熔溶 ) ?520 有 3OH,4’OH 也發(fā)生紅移 ，但意義不大 7OH 加入試劑 帶 II 帶 I 說明 +NaOAc/ H3BO3 ?510 ?1230 有 6,7OH 或 7,8OH (5,6OH無 ) B環(huán)有鄰二酚羥基 AlCl3/ HCl ?60 ?5060 ?3555 ?1720 ?0 有 3OH 有 3,5二 OH 有 5OH， 無 3OH 有 6OR 無 3OH, 5OH或 6OR存在 AlCl3光譜 AlCl3/ HCl光譜 3040 5065 0 B環(huán)有鄰二酚羥基 A,B環(huán)皆有鄰二酚羥基 A,B環(huán)皆無鄰二酚羥基 第六節(jié) 實(shí)例 一、黃芩 功效： 清熱燥濕，瀉火解毒，止血，安胎的功能。 化學(xué)成分 ： 黃芩苷主主要有效成分，具有抗菌作用，還含有黃芩素、漢黃芩素、漢黃芩苷、千層紙素、千層紙素苷等 30余種黃酮類化合物。有些還具有抗癌作用。 理化性質(zhì)： 黃芩苷在黃芩酶的作用下水解成黃芩素，黃芩素含有鄰三酚羥基，易被氧化成醌類化合物而顯綠色，主是保存或炮制不當(dāng)黃芩變綠的主要原因。 提取分離過程中應(yīng)注意防止酶解和氧化。 二、槐米 功效： 涼血止血，清肝瀉火。 化學(xué)成分： 蕓香苷、槲皮素、另皂苷等。 理化性質(zhì)： 蕓香苷為槲皮素 3O蕓香糖。在冷水中的溶解度很小，在沸水中可溶等。 黃酮類化合物思考題： 1．葡聚糖凝膠（ Sephadex G 型和 Sephadex LH – 20型）柱色譜用于分離黃酮類化合物（苷及苷元）的原理、方法及洗脫規(guī)律。 2．聚酰胺柱色譜用于分離黃酮類化合物（苷、苷元）的原理、方法及洗脫規(guī)律。如何理解黃酮類化合物聚酰胺色譜分離的“雙重色譜”性能。 3．簡述黃酮類化合物的酸性規(guī)律及在黃酮苷元分離中的應(yīng)用。 4．何謂交叉共軛體系，它與黃酮類化合物顏色的關(guān)系如何？