抗氧化自由基-資料下載頁
2025-08-05 06:11本頁面
【正文】 在ORAC方法未推出之前，因為抗氧化測試的極其復雜性，商業(yè)界（極其復雜的實驗方案不可能被商業(yè)界所應用，當時一個嚴謹?shù)目寡趸瘜嶒炌枰獛讉€月，且費用巨貴，是商業(yè)界無法接受的）無法有效、全面的測試出樣品的抗氧化力，然而商業(yè)是科技創(chuàng)新的動力，就像蘋果公司。ORAC抗氧化測試包括對：過氧化自由基（含親水性、親脂性）、羥基自由基、過氧亞硝基、單線態(tài)氧、超氧陰離子 這五種人體最主要的活性氧自由基進行全面的分析，能有效得出樣品的抗氧化實際能力及分布情況。ORAC抗氧化生物測試是比普通抗氧化測試的更高一層的測試方案。利用人體細胞有效測試出樣品的抗氧化力（生物利用度）。ORAC已被美國AOAC評定為抗氧化測試標準方法，是國際主流測試方法。其他評價方法抗氧化不僅僅是一個概念，對生物體抗氧化的效果是可以量化測定的，作為動物實驗一般是服用抗氧化劑一定時間后，測定血液中的酯質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛變化、以及肝臟勻漿中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽過氧化物酶GSHPX的活力變化。從上述兩種酶和MDA的變化狀況來判定抗氧化的強度及效果。作為人體不可能測肝臟勻漿，可以測定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXHPX來判定抗氧化的效果。食物中氧化劑長期以來倍受國內(nèi)外學者關注，這是因為：① 食物中抗氧化劑能夠保護食物免受氧化損傷而變質(zhì)。② 在人體消化道內(nèi)具有抗氧化作用，防止消化道發(fā)生氧化損傷。③ 吸收后可在機體其他組織器官內(nèi)發(fā)揮作用。④ 來源于食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作為治療藥品。抗氧化劑的作用機理包括鰲合金屬離子、清除自由基、淬滅單線態(tài)氧、清除氧、抑制氧化酶活性等。體外評價方法雖然很多，但主要基于兩類一個是通過測定樣品抑制脂類物質(zhì)氧化的能力來評定被測物的抗氧化能力另一個是用樣品對人工合成的自由基的清除能力來反映待測物的抗氧化活性?？寡趸瘎┰谑称泛蜕矬w系中的抗氧化活性受很多因素的影響，其中主要包括抗氧化劑在水相和油相間的分配效應，氧化條件和環(huán)境，被氧化底物物理狀態(tài)等。1．抗油脂過氧化力測定脂類包括的范圍很廣，是構成生物膜的主要成分，脂類中的不飽和脂肪酸可以過氧化，脂類過氧化過程中會產(chǎn)生L、LO、LOO等自由基以及LOOH，這些產(chǎn)物會損傷生物細胞。因此，能夠抑制脂類過氧化具有重要的生物學意義。A硫氰酸鐵法FTC：硫氰酸鐵鹽(FTC)比色法是基于在酸性條件下，脂質(zhì)氧化形成的過氧化物可將Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+與硫氰酸根離子可形成在480515nm內(nèi)有最大吸收的紅色絡合物。通常用500nm處吸光值的高低表示物質(zhì)抗脂質(zhì)過氧化的能力，吸光值越小，表明物質(zhì)的抗脂質(zhì)過氧化能力越強。B硫代巴比妥酸反應物TBARs法：是評價油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亞油酸氧化后的終產(chǎn)物主要是丙二醛，這些過氧化產(chǎn)物與硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，該有色化合物在530 nm左右有吸收。2．清除DPPH能力的側(cè)定DP是一種早期合成的有機自由基，常用來評估抗氧化物的供氫能力，它在有機溶劑中非常穩(wěn)定，呈紫色，而且在處有一個特征吸收峰，當遇到自由基清除劑時，DPPH的孤對電子被配對而使其退色，也就是在最大吸收波長處的吸光值變小。因此，可通過測定吸光值的變化來評價樣品對DPPH自由基的清除效果。3．還原能力的測定還原力的測定是檢驗樣品是否是良好的電子供體的方法，還原力強的樣品應該是良好的電子供應者，它供應的電子不僅能使Fe3+還原為Fe2+，也可以與自由基反應。還原力的測定是用來評價抗氧化劑活性的常用方法。4．抑制 LOX酶實驗脂肪氧化酶LOX在植物中分布廣泛是一種非血紅素鐵蛋白，分子量為90一100KD。這種酶蛋白有多個多膚鏈組成，含有三價鐵離子金屬輔基則有活性，而包含二價鐵離子的金屬輔基則缺乏活性。在生物體內(nèi)的主要作用是，專一催化含有順，順一戊二烯結構的多元不飽和脂肪酸的加氧反應，生成具有共扼雙鍵的多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物。在生物體內(nèi)的主耍底物是甘油脂類〔如磷脂）釋放的游離不飽和脂肪酸，其中動物體內(nèi)的主要底物是花生四烯酸，植物體內(nèi)的主要底物是亞油酸和亞麻酸，主要產(chǎn)物為過氧羚基型脂肪酸。
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