抗氧化自由基-資料下載頁(yè)
2025-08-05 06:11本頁(yè)面
【正文】 在ORAC方法未推出之前，因?yàn)榭寡趸瘻y(cè)試的極其復(fù)雜性，商業(yè)界（極其復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)方案不可能被商業(yè)界所應(yīng)用，當(dāng)時(shí)一個(gè)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目寡趸瘜?shí)驗(yàn)往往需要幾個(gè)月，且費(fèi)用巨貴，是商業(yè)界無法接受的）無法有效、全面的測(cè)試出樣品的抗氧化力，然而商業(yè)是科技創(chuàng)新的動(dòng)力，就像蘋果公司。ORAC抗氧化測(cè)試包括對(duì)：過氧化自由基（含親水性、親脂性）、羥基自由基、過氧亞硝基、單線態(tài)氧、超氧陰離子 這五種人體最主要的活性氧自由基進(jìn)行全面的分析，能有效得出樣品的抗氧化實(shí)際能力及分布情況。ORAC抗氧化生物測(cè)試是比普通抗氧化測(cè)試的更高一層的測(cè)試方案。利用人體細(xì)胞有效測(cè)試出樣品的抗氧化力（生物利用度）。ORAC已被美國(guó)AOAC評(píng)定為抗氧化測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)方法，是國(guó)際主流測(cè)試方法。其他評(píng)價(jià)方法抗氧化不僅僅是一個(gè)概念，對(duì)生物體抗氧化的效果是可以量化測(cè)定的，作為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)一般是服用抗氧化劑一定時(shí)間后，測(cè)定血液中的酯質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛變化、以及肝臟勻漿中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽過氧化物酶GSHPX的活力變化。從上述兩種酶和MDA的變化狀況來判定抗氧化的強(qiáng)度及效果。作為人體不可能測(cè)肝臟勻漿，可以測(cè)定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXHPX來判定抗氧化的效果。食物中氧化劑長(zhǎng)期以來倍受國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注，這是因?yàn)椋孩?食物中抗氧化劑能夠保護(hù)食物免受氧化損傷而變質(zhì)。② 在人體消化道內(nèi)具有抗氧化作用，防止消化道發(fā)生氧化損傷。③ 吸收后可在機(jī)體其他組織器官內(nèi)發(fā)揮作用。④ 來源于食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作為治療藥品。抗氧化劑的作用機(jī)理包括鰲合金屬離子、清除自由基、淬滅單線態(tài)氧、清除氧、抑制氧化酶活性等。體外評(píng)價(jià)方法雖然很多，但主要基于兩類一個(gè)是通過測(cè)定樣品抑制脂類物質(zhì)氧化的能力來評(píng)定被測(cè)物的抗氧化能力另一個(gè)是用樣品對(duì)人工合成的自由基的清除能力來反映待測(cè)物的抗氧化活性?？寡趸瘎┰谑称泛蜕矬w系中的抗氧化活性受很多因素的影響，其中主要包括抗氧化劑在水相和油相間的分配效應(yīng)，氧化條件和環(huán)境，被氧化底物物理狀態(tài)等。1．抗油脂過氧化力測(cè)定脂類包括的范圍很廣，是構(gòu)成生物膜的主要成分，脂類中的不飽和脂肪酸可以過氧化，脂類過氧化過程中會(huì)產(chǎn)生L、LO、LOO等自由基以及LOOH，這些產(chǎn)物會(huì)損傷生物細(xì)胞。因此，能夠抑制脂類過氧化具有重要的生物學(xué)意義。A硫氰酸鐵法FTC：硫氰酸鐵鹽(FTC)比色法是基于在酸性條件下，脂質(zhì)氧化形成的過氧化物可將Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+與硫氰酸根離子可形成在480515nm內(nèi)有最大吸收的紅色絡(luò)合物。通常用500nm處吸光值的高低表示物質(zhì)抗脂質(zhì)過氧化的能力，吸光值越小，表明物質(zhì)的抗脂質(zhì)過氧化能力越強(qiáng)。B硫代巴比妥酸反應(yīng)物TBARs法：是評(píng)價(jià)油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亞油酸氧化后的終產(chǎn)物主要是丙二醛，這些過氧化產(chǎn)物與硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，該有色化合物在530 nm左右有吸收。2．清除DPPH能力的側(cè)定DP是一種早期合成的有機(jī)自由基，常用來評(píng)估抗氧化物的供氫能力，它在有機(jī)溶劑中非常穩(wěn)定，呈紫色，而且在處有一個(gè)特征吸收峰，當(dāng)遇到自由基清除劑時(shí)，DPPH的孤對(duì)電子被配對(duì)而使其退色，也就是在最大吸收波長(zhǎng)處的吸光值變小。因此，可通過測(cè)定吸光值的變化來評(píng)價(jià)樣品對(duì)DPPH自由基的清除效果。3．還原能力的測(cè)定還原力的測(cè)定是檢驗(yàn)樣品是否是良好的電子供體的方法，還原力強(qiáng)的樣品應(yīng)該是良好的電子供應(yīng)者，它供應(yīng)的電子不僅能使Fe3+還原為Fe2+，也可以與自由基反應(yīng)。還原力的測(cè)定是用來評(píng)價(jià)抗氧化劑活性的常用方法。4．抑制 LOX酶實(shí)驗(yàn)脂肪氧化酶LOX在植物中分布廣泛是一種非血紅素鐵蛋白，分子量為90一100KD。這種酶蛋白有多個(gè)多膚鏈組成，含有三價(jià)鐵離子金屬輔基則有活性，而包含二價(jià)鐵離子的金屬輔基則缺乏活性。在生物體內(nèi)的主要作用是，專一催化含有順，順一戊二烯結(jié)構(gòu)的多元不飽和脂肪酸的加氧反應(yīng)，生成具有共扼雙鍵的多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物。在生物體內(nèi)的主耍底物是甘油脂類〔如磷脂）釋放的游離不飽和脂肪酸，其中動(dòng)物體內(nèi)的主要底物是花生四烯酸，植物體內(nèi)的主要底物是亞油酸和亞麻酸，主要產(chǎn)物為過氧羚基型脂肪酸。
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