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油樟根、莖、葉總dna的提取畢業(yè)論文-資料下載頁

2025-07-27 06:12本頁面
  

【正文】 色,通常羽狀脈,中脈兩面凸起,側(cè)脈約56對,兩面凸起,脈腋腹面泡狀隆起,背面有小窩孔,孔內(nèi)有短毛,橫脈和細(xì)脈背面較明顯,葉柄長23 cm,無毛。圓錐花序腋生,纖細(xì),疏散,通常長10 cm以上,無毛,花梗長13 cm,無毛;花被長約2 mm,外側(cè)無毛,內(nèi)側(cè)密被毛,裂片卵形, mm,花后花被上部自花被管的頂端處整齊環(huán)裂脫落;雄蕊長約1 mm,被柔毛,第3輪的花絲基部有1對具短柄狀的腺體, mm,被毛,近心形;雌蕊無毛,子房近圓球形狀,花柱較子房為長,柱頭小,盤狀。果闊倒卵狀,頂端平或微凹,歪斜,稍扁,長9 mm,直徑8 mm,果托碟狀,全緣, mm;果梗長45 mm,向上增粗?;ㄆ?5月;果期89月[1]。油樟在四川有大量分布,產(chǎn)于敘永、宜賓、屏山、娥眉、雅安、邛崍等地。宜賓是油樟的分布中心。在經(jīng)歷了許多坎坷之后,油樟終于閃現(xiàn)出了它那金子般的光芒。1951年修建成渝鐵路時,油樟被成批地砍伐用作枕木;1958年大辦鋼鐵時,油樟竟老嫩不拘,被用作燒泡炭的燃料;1960年生活困難時,為了熬煮樟油,對幸存的樟樹進行了掠奪性的采摘。這些事實都導(dǎo)致珍貴的油樟資源招到了大規(guī)模的破壞,幸好在1978年十一屆三中全會以來,各項林業(yè)政策得到了落實,油樟林也逐漸得以恢復(fù)。1978年樟油產(chǎn)量增長為356t,比1959年的305 %,到1985年全縣已有油樟林35130畝,采葉油樟樹達到369萬余株,全縣樹齡達到100年以上的油樟64余株,200年以上的9株。二.現(xiàn)狀分析1986年宜賓縣被列為四川油樟基地[2],由于大力發(fā)展油樟,到1995 年,宜賓全縣油樟面積由1980 萬hm2 萬hm2 ,樟油產(chǎn)量從1980 年的400 多噸 ,增加到1995 年的1200 t ,占全國同類產(chǎn)品產(chǎn)量的75 %,占全省產(chǎn)量的90 %,產(chǎn)品暢銷日本、德國、法國、美國等50多個國家和地區(qū),為國家創(chuàng)匯450多萬美元[3]。宜賓縣被稱為全國保存和發(fā)展最好的天然香料油源基地。,被稱為中國桉葉油[4],1984年被評為四川省優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。1999年,為適應(yīng)西部大開發(fā)的趨勢,增加長江中上游綠色植被,加大力度保護油樟樹這一獨特資源,建設(shè)全國最大的木本香料油基地,宜賓縣又決定到2001年,用3年時間,㎡的油樟樹基地。三.趨向預(yù)測油樟樹具有生長快、材質(zhì)好,萌發(fā)力強、干形通直,樹形美觀等特點,葉、枝、根、莖、花、果富含芳香油,是提煉天然香料的優(yōu)良樹種,也是目前全國保存和發(fā)展最好的天然香料油源。它含有1.8桉葉油素、α萜品醇(松香醇)和香穗烯等40多種成分,經(jīng)過深度加工可以提取多種重要的天然單離原料,是國防、輕工、香料、醫(yī)藥和高級電鍍工業(yè)的稀有原料[5]。特別是從中提取的1.8桉葉油素物性穩(wěn)定、芳香純正,在國際貿(mào)易中被稱為“中國桉葉油”,在世界各國都屬免檢產(chǎn)品。為了充分開發(fā)利用油樟這一優(yōu)勢資源,國家科委于1996年將其列入了國家 “星火計劃”和名特優(yōu)經(jīng)濟林商品基地建設(shè)項目[6]。宜賓縣地處金沙江和岷江下游“金三角”地帶,是全國最大的油樟基地,樟油產(chǎn)量占全國的75%,占四川的90%,被中外客商譽為“油樟王國”。大力發(fā)展油樟,對農(nóng)民致富、出口創(chuàng)匯、增加稅收、綠化荒山以及維持長江上游的生態(tài)環(huán)境等都起著十分重要的作用。綜上所述,油樟由于其巨大的商業(yè)價值而受到社會個界人士的的密切關(guān)注,政府和農(nóng)民通過不斷的擴大種植面積來提高收益。然而土地資源畢竟是有限的,而且油樟只適合生長在酸性土壤中,因此光靠擴大種植面積來提煉樟油是遠遠不能滿足日愈膨脹的市場需求的,在不斷提高提煉樟油的技術(shù)水平的同時,我們也應(yīng)該為油樟的長遠發(fā)展做出考慮了。油樟的生命力很強,可以通過種子育苗,試管育苗,甚至是扦插成活。但在我們考察油樟林之后發(fā)現(xiàn),在油樟基地油樟林樹下,幾乎很難再見到其他草本或木本植物,說明油樟對其他植物的生長影響很大,那么當(dāng)我們把成片的土地用來種植油樟后,莊稼也會受到嚴(yán)重影響。那么我們是否可以從分子水平研究油樟的基因結(jié)構(gòu),找出決定油樟油細(xì)胞產(chǎn)生的DNA片斷,再將其通過轉(zhuǎn)基因的方法將該DNA片斷植入其它植物細(xì)胞核中表達?;谶@樣的設(shè)想,本研究就決定以油樟的根莖葉為實驗材料,提取油樟的DNA,從而為分子生物學(xué)分析打下基礎(chǔ)。在探尋適合油樟DNA提取方法的過程中,我查閱了大量的文獻資料,其中包括[8][15]號文獻,,從而提取出高質(zhì)量DNA,并通過電泳圖譜分析和紫外光譜分析對根莖葉DNA的質(zhì)量和得率進行比較分析。CTAB法的基本原理是: 由于植物染色體DNA與組蛋白等結(jié)合成為脫氧核糖核蛋白復(fù)合體(deoxyribonuleoprotein, DNP),存在于細(xì)胞核中,因而,從細(xì)胞中提取DNA時,首先需要把DNP抽提出來,其次把蛋白質(zhì)除去,然后除去細(xì)胞中的糖,核糖核酸(RNA)及無機離子等,從中分離出DNA。DNP和核糖核蛋白復(fù)合物(RNP)在鹽溶液中的溶解度受鹽濃度的影響不同,DNP在高鹽溶液(≥)中可以穩(wěn)定存在,但如果降低鹽濃度,DNP的溶解度也隨之降低,當(dāng)鹽濃度≤,這時與CTAB結(jié)合的DNP就會沉淀出來。而RNP在鹽溶液中的溶解度受鹽濃度的影響較小,在低鹽溶液中溶解度較大[12]。另外大部分的蛋白質(zhì)和多糖仍溶于溶液中,所以利用這個原理,我們不僅能分離DNP和RNP這兩種核蛋白,還能將大部分的蛋白質(zhì)和多糖除去,得到DNA粗提物。再經(jīng)過進一步的純化,便可提取出高質(zhì)量的DNA。參考文獻:[1] 方文培,趙能,孔憲需.《四川植物志》第一卷(種子植物).四川人民出版社,1981[2].《農(nóng)村經(jīng)濟與科技》.[3] .《農(nóng)村經(jīng)濟與科技》. [4] 羅中杰,李維一,魏琴,.《四川師范大學(xué)學(xué)報》[5] .《農(nóng)村經(jīng)濟與科技》.[6] .《農(nóng)村經(jīng)濟與科技》.[7] 魏琴,周黎軍,宣樸等. 組培條件對油樟試管苗玻璃化的影響.《四川師范大學(xué)學(xué)報》[8] 周延清.《DNA分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用》.[9] 顧紅雅,瞿禮佳等.《植物基因與分子操作》.[10] 張龍翔,安錫培.《遺傳學(xué)手冊》.湖南科學(xué)技術(shù)出版社,1989[11] 陳璋,朱秀英,.《遺傳》.[12] 陳昆松,(4).529531[13] 王齊紅,黃驥,(5).479180[14] 陳章良,瞿禮佳.《植物學(xué)報》.33(5).390。[15] [美]..《精編分子生物實驗指南》.
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