生物化學(xué)技術(shù)補(bǔ)充1-吸收光譜分析法-資料下載頁
2025-07-25 15:29本頁面
【正文】 和強(qiáng)度保持不變，而讓物質(zhì)所發(fā)生的熒光通過單色器色散，依次將不同波長的熒光照射到單色器上，并依次測定其熒光強(qiáng)度，然后以熒光強(qiáng)度對相應(yīng)的熒光作圖，得到該物質(zhì)的熒光發(fā)射光譜 三、散射光譜分析法 散射光譜分析法 測定光通過溶液混懸顆粒后的吸光度或光散射程度的一類定量方法 散射比濁法 是指一定波長的光沿水平軸照射，通過溶液時遇到 抗原抗體復(fù)合物粒子，光線被粒子顆粒 折射 ，發(fā)生 偏轉(zhuǎn) ，光線偏轉(zhuǎn)的角度與發(fā)射光的波長以及抗原抗體復(fù)合物顆粒大小、數(shù)目密切相關(guān)。 散射光的強(qiáng)度與復(fù)合物的含量成正比 透射比濁法 是測定一定體積的溶液通過的光線量 (光通量 )，當(dāng)光線通過時，由于溶液中存在 抗原 — 抗體復(fù)合物粒子對光線的反射和吸收，引起透射光的減少 ，測得的 光通量和抗原抗體復(fù)合物的量成反比 發(fā)射光譜分析法 (一 )散射免疫比濁分析 1．散射顆粒與散射光的關(guān)系 懸浮在反應(yīng)溶液中的分子，無論是固體還是膠體粒子都可以是散射中心。當(dāng)入射光通過時，如果顆粒直徑比入射光的波長小很多，則散射光比較均勻的分布于顆粒的四周，稱為 Rayleigh散射 ；如果顆粒直徑遠(yuǎn)遠(yuǎn)地大于入射光的波長，則散射光的分布呈明顯不勻稱為 Mie散射 抗原 — 抗體結(jié)合反應(yīng)中，遵守典型的 Heidelberger曲線 (二 )免疫透射比濁分析 原 理 試驗中設(shè)計檢測 抗體 過量，待測樣品中的 Ig在反應(yīng)介質(zhì)中與相應(yīng)的檢測抗體發(fā)生 抗原 — 抗體 反應(yīng)，形成不溶性 復(fù)合物 ，在聚乙二醇 (PEG)的作用下，加速抗原 抗體復(fù)合物的形成并增加其穩(wěn)定性，使 反應(yīng)介質(zhì)的濁度發(fā)生改變 ，利用分光光度計測定光線被吸收的量，待測 樣本的抗原含量與吸光度成正比，光通量與抗原含量成反比 。利用標(biāo)準(zhǔn)品做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，待測樣本的濁度變化在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出來
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