【正文】 年發(fā)現(xiàn)麻風(fēng)桿菌，G+，無動(dòng)力無芽無莢，人是唯一的宿主和傳染源，分瘤型和結(jié)核型。多數(shù)非發(fā)酵菌培養(yǎng)溫度以30度為宜，故常規(guī)應(yīng)先培養(yǎng)于35—37，再培養(yǎng)于30或室溫，觀察動(dòng)力以30或室溫12—24小時(shí)滴片為準(zhǔn)。氧化—發(fā)酵試驗(yàn)是確定非發(fā)酵與發(fā)酵菌是否利用糖的基本試驗(yàn)。HUGH—LEIFSON設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基只含0。2%蛋白胨，1%糖，指示劑是溴香草酚蘭。銅綠假單胞菌：G，有鞭毛，20—42度長，最適是35，4度不長，液面可形成菌膜，色素有：綠膿素（溶于水和氯仿），熒光素是綠色熒光素（溶于水不溶于氯化）。不動(dòng)桿菌的特征是：氧化酶，硝酸鹽還原，動(dòng)力試驗(yàn)均陰性。主要是鮑曼和洛菲。流感嗜血桿菌要新鮮血液（含X和V因子），用石碳酸復(fù)或美藍(lán)單染呈現(xiàn)兩端濃染，有衛(wèi)星現(xiàn)象，副流感嗜血桿菌生長只要V因子。軍團(tuán)菌：1976年，USA費(fèi)城，常規(guī)不易著色，最適為36度，初次分離要L—半膀氨酸，含鐵鹽可促進(jìn)生長，主要可用活性碳—酵母浸出液平板（BCYE），不分解糖。百日咳鮑特菌和副百日咳鮑特菌是百日咳病原菌，常用鮑—金培養(yǎng)基，有百日咳毒素，絲狀血細(xì)胞凝聚素和腺嘌呤環(huán)化毒素。衣原體：沙眼，鸚鵡，肺炎。原體：姬染紫紅色，無繁殖力有傳染性。始體（網(wǎng)狀體），姬染蘭色，為繁殖型無傳染性，二分裂式。營專性細(xì)胞內(nèi)寄生。鼠亞種沙眼不侵犯人類，性病肉芽腫由沙眼LGV生物亞種（L1,L2,L3）三血清型引起。立克次體：人畜共患，有復(fù)雜的酶系統(tǒng)，對(duì)多種抗生素敏感。發(fā)熱多是稽留熱，恙蟲M染色是藍(lán)色，G染色呈暗紅色。除羅沙利馬體，巴爾通體外其它立克次體只能活在真核細(xì)胞內(nèi)，普氏（流行性和復(fù)發(fā)型斑疹）以人的體虱為傳播媒介，莫氏（地方性斑疹），印鼠客蚤，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是立克次體最常用的方法。支原體：無細(xì)胞壁，僅有細(xì)胞膜（外，中，內(nèi)，中間是脂質(zhì)，內(nèi)外是蛋白質(zhì)），—，D在95%N2，5%CO2中生長好，菌落呈“荷包蛋）樣，肺炎支原體：分離培養(yǎng)是確診支原體感染的可靠方法之一，40倍鏡下可見油滴狀菌落，100倍下可見桑椹狀菌落。對(duì)人致病的厭氧主要是衣氏和牛氏放線菌，可見硫磺顆粒（放射狀），需氧主要是諾卡菌和馬杜拉放線菌（主要致病是足分枝菌）。星形諾卡菌致病最強(qiáng)，其次是巴西和脯鼠，抗酸染色有一定抗酸性可初步確定為諾卡菌。鉤體是致病性螺旋體中唯一能人工培養(yǎng)的，常用柯氏培養(yǎng)基，對(duì)酸堿敏感，—，，最適溫28—30，12小時(shí)分裂一次，伯氏疏螺旋體引起萊姆病。肝素抗凝全血不影響病毒培養(yǎng)。乙腦病毒以接種卵黃囊最佳，嗜神經(jīng)病毒最好接種小鼠腦內(nèi)，包涵體檢查不是特異性檢查。流感病毒：核心，基質(zhì)蛋白（M蛋白），包膜（由血凝素（HA）神經(jīng)氨酸酶（NA））后者是劃分流感病毒亞型的依據(jù)，易變異?？乖儺愋r(shí)是漂移，大時(shí)（形成新的亞種）是轉(zhuǎn)變。初次分離以接種羊膜腔最佳。副黏病毒：呼吸道合胞病毒是引起嬰幼兒下呼吸道疾病最常見的病毒，合胞體形成細(xì)胞融合多核巨細(xì)胞，胞內(nèi)有嗜酸性包涵體。副流感病毒（單負(fù)股RNA）最敏感的細(xì)胞是原代人胚腎和原代猴腎細(xì)胞，最常用的方法是紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)，血清學(xué)診斷難。腺病毒：不能在雞胚中增殖，只能在人源的組織細(xì)胞中增殖，有嗜堿性包涵體，24小時(shí)換培養(yǎng)液一次，避免細(xì)胞毒效應(yīng)。腸道病毒（單正股RNA）是人類最常見最重要的病毒。流腦病毒的結(jié)構(gòu)蛋白有：M（包膜內(nèi)），C（衣殼內(nèi)），E（嵌在包膜上的糖蛋白）三種，組成血凝素，最易感染的動(dòng)物是出生2—3天的乳鼠，通過三帶喙庫蚊傳播，豬是最重要的宿主和傳染源。森林腦炎由蜱傳播。出血熱病毒（單負(fù)股RNA）：漢坦病毒：可在人肺傳代細(xì)胞（A549）非洲綠猴腎細(xì)胞（VER—E6）人胚肺二倍體細(xì)胞（2BS）及地鼠腎細(xì)胞中增殖不引起明顯變化，我國流行的是I和II型，伴三痛（頭，眼眶，腰）及紅（面，頸，上胸部）。新疆出血熱病毒，登革熱：四個(gè)血清型，接種白紋伊蚊的傳代細(xì)胞（C6/36株）。病毒分離培養(yǎng)是HSV感染實(shí)驗(yàn)室診斷的最敏感方法，水痘—帶狀皰疹（VZV，雙股DNA）能在人胚二倍體細(xì)胞（HFDK）或人胚二倍體肺細(xì)胞（HFDL）中增殖，巨細(xì)胞病毒種屬特異性高，只能感染人，只能在成人纖維細(xì)胞中增殖，核內(nèi)有嗜堿性包涵體形似貓頭鷹眼。EB病毒一般用人臍血淋巴細(xì)胞或從外周血分離的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，主要侵犯B細(xì)胞，引起增殖和非增殖感染，狂大病毒：（單負(fù)股RNA）外形如子彈狀，在中樞神經(jīng)細(xì)胞中形成嗜酸性包涵體稱內(nèi)基小體。絕大部分致病性真菌屬于半知菌亞門。形態(tài)有單細(xì)胞和多細(xì)胞兩種，基本結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，鹿角狀菌絲僅見于黃癬菌，假菌絲與真菌絲的主要區(qū)別是它壁兩邊有時(shí)交叉，是由孢子延長而來，有性孢子有：卵，接合，子囊，擔(dān)。無性孢子有：葉狀，分生，孢子子囊。最常用沙保弱氏，最適溫22—28，最適PH5—6，培養(yǎng)4周以上，真菌菌落三型：酵母型，酵母樣，絲狀?？捎?0%氫氧化鉀加熱使標(biāo)本透明。血清出芽試驗(yàn)有芽管出者為白念菌，念珠菌中僅白念菌產(chǎn)厚壁孢子，試管培養(yǎng)是真菌分離，傳代，保存菌種最常用的方法。鑒定曲霉常用察氏瓊脂，以煙曲霉菌居多。藥敏：K—B法（半定量），公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)法，采用水解酪蛋白（M—H）瓊脂，90mm內(nèi)徑，注入25—30ml，厚度為4mm，吸水量20微升。校正后的菌液應(yīng)在15分鐘內(nèi)接種。各藥敏紙片間距不少于24mm，距平板內(nèi)緣不小于15mm。對(duì)所有產(chǎn)ESBLS的菌株應(yīng)報(bào)告耐所有青霉素，頭孢類及氨曲南。自泌尿道分離的腸桿菌不報(bào)氯霉素的敏感性。利福平不能單獨(dú)用于化療。至今還未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶的肺鏈。至今未發(fā)現(xiàn)肺鏈對(duì)萬古的抑菌圈小于17mm。定量評(píng)價(jià)抗菌藥物殺菌效力的試驗(yàn)主要是最低殺菌濃度（MBC）和殺菌曲線。抑菌濃度指數(shù)（FIC），—1相加作用，1—2無關(guān)作用，2拮抗作用。目前院內(nèi)感染主要是G桿菌。 寄生蟲學(xué)：宿主分：終，中間，儲(chǔ)存或保蟲，轉(zhuǎn)續(xù)。寄生蟲對(duì)宿主：奪取營養(yǎng)，機(jī)械損傷，化學(xué)毒，變應(yīng)原作用。流行特點(diǎn)：地方性，季節(jié)性，自然疫源性。土源性蠕蟲不用中間宿主生物源性要，蛔蟲感染期2—3個(gè)月，成蟲在小腸以空腸多。鞭蟲寄生于肓腸生活史約一個(gè)月，人是唯一傳染源，蟯蟲寄生于回肓部，鉤蟲的絲狀蚴為感染期成蟲在小腸部可致大糞毒，黃腫病，異嗜癥，桑葉黃。絲蟲絲狀蚴寄生于大淋巴管或淋巴結(jié)內(nèi)可致流火，象皮腫，乳糜尿。吸蟲除血吸蟲外都是雌雄同體。旋毛蟲：成蟲和幼蟲在同一宿主，不用在外發(fā)育，但要轉(zhuǎn)換宿主，被寄生的宿主又是中間宿主，致病分：侵入期，幼蟲移行期，囊包形成期。檢驗(yàn)心活組織最可靠，免疫學(xué)檢驗(yàn)是臨床最常用的方法。吸蟲除血吸蟲（圓柱狀，雌雄異體，蟲卵致病最重）外都是兩側(cè)對(duì)稱，華枝睪吸蟲卵最小，姜片蟲蟲卵最大，肺吸蟲第一中間宿主為川卷螺，第二為淡水石蟹，囊蚴是感染期，致病分：膿腫期，包囊期，纖維瘢痕期。人是豬帶絳蟲唯心史觀一終宿主，豬或人是中間宿主。人是牛帶絳蟲唯一終宿主，只被成蟲寄生。痢疾阿米巴：包囊—小滋養(yǎng)體包囊。杜氏利什曼蟲：黑熱病，分人源型（平原型），犬源型（山丘型），野生動(dòng)物型（荒漠型），主要要防治白蛉。陰道滴蟲有4根前鞭毛和1根后鞭毛。隱孢子蟲以空腸上端感染最重，是艾滋病主要死因之一。實(shí)驗(yàn)室管理：1946年Belk和Sunderman首先調(diào)查了不同實(shí)驗(yàn)室間差異很大。1950年Levey和Jennings首先將Shewhart（USA，首先提出）工業(yè)質(zhì)量管理上的控制圖移植到醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中來。誤差是測(cè)定值與真值的差。精密度是每次測(cè)定值與算術(shù)平均值的符合程度。系統(tǒng)誤差決定正確度，可以校正和設(shè)法消除增加次數(shù)不能減少。隨機(jī)誤差決定精密度，不能修正，但可增加次數(shù)來減小。含有過失誤差的值為異常值。有效數(shù)字按照：四舍六入五單雙的原則。平均數(shù)是統(tǒng)計(jì)學(xué)中應(yīng)用最廣最重要的一個(gè)指標(biāo)體系，用來說明一組變量值的集中趨勢(shì)，中心位置或平均水平。均數(shù)應(yīng)用于：描述一組變量的平均水平具有代表性因而需同質(zhì)，用于呈正態(tài)分布的資料，只能反應(yīng)數(shù)據(jù)集中趨勢(shì)。正態(tài)分布總面積為1或100%，理論上：u+o 占總面積68%，u+%， u+%。質(zhì)控品要瓶間變異小，酶類項(xiàng)目一般CV%應(yīng)小于2%，其它分析物應(yīng)小于1%，凍干品其復(fù)溶后穩(wěn)定，2—8度不少于24小時(shí)，零下20度不少于20天，某些不穩(wěn)定成份復(fù)溶前后4小時(shí)變異小于2%。質(zhì)控品到實(shí)驗(yàn)室后有效期一年以上。失控檢查測(cè)定方法本身才是最有效的方法。最有意義的是真失控批數(shù)和假失控批數(shù)和與之相應(yīng)的誤差檢出率（Ped，類似診斷試驗(yàn)的靈敏度）和假失控率（Pfr，相當(dāng)于診斷試驗(yàn)的特異性），一般臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制上Pfr值為何。功效函數(shù)圖的重要作用是在控制方法的設(shè)計(jì)上保證常規(guī)試驗(yàn)達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量水平，并表達(dá)當(dāng)分析批中存在隨機(jī)誤差或系統(tǒng)誤差時(shí)決定分析批失控的概率。病人數(shù)據(jù)質(zhì)量控制種類：正態(tài)均值法（1965年Hoffmann Waid），眾數(shù)判斷法，移動(dòng)均值法（由Bull建立，用于血液學(xué)。）Delta—檢驗(yàn)系統(tǒng)，陰離子隙法，酸堿平衡法。允許總誤差可用為室內(nèi)質(zhì)控方法設(shè)計(jì)的起點(diǎn)亦可為室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)，能力評(píng)價(jià)采用Z比分?jǐn)?shù)時(shí)：Z小于或等于2時(shí)為滿意，大于2小于3時(shí)為有問題，大于3時(shí)為不滿意。每一次活動(dòng)每一分析項(xiàng)目未能達(dá)到至少80%可接受成績(jī)稱為本次活動(dòng)該分析項(xiàng)目不滿意。實(shí)驗(yàn)室對(duì)文件記錄必須保存兩年以上。計(jì)劃必須提供每次活動(dòng)至少5個(gè)標(biāo)本，一年三次。要保留所有發(fā)給出組織者的文件的復(fù)印件，實(shí)驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)：重復(fù)性試驗(yàn)：考察候選方法的隨機(jī)誤差?；厥赵囼?yàn)：主要用于確定比例誤差。干攏試驗(yàn)：衡量候選方法的準(zhǔn)確度形成恒定系統(tǒng)誤差。其他相關(guān)常識(shí)：呂文虎克（荷蘭，發(fā)明顯微鏡），琴納（英國，創(chuàng)制牛痘疫苗），巴斯德（巴氏消毒法），李斯德（創(chuàng)消毒外科），郭霍（首先用固體培養(yǎng)基分離細(xì)菌和創(chuàng)郭霍氏鑒定原則），赫賽夫（建議用瓊脂作培養(yǎng)基），貝林（制白喉抗毒素獲諾貝爾），艾利希（抗體形成體液說），梅奇尼可夫（蘇聯(lián)，細(xì)胞免疫學(xué)說），伊凡洛夫基證明煙草花葉病是病毒引起。湯非凡（中國，1957年發(fā)現(xiàn)沙眼衣原體，）landsteiner(ABO血型發(fā)現(xiàn)者)和wiener于恒河猴（Rhesus Monkey）發(fā)現(xiàn)Rh血型，最早組織開展臨床檢驗(yàn)室間質(zhì)控的人：Belk和Sunderman，1959年Yallow等開發(fā)出放射免疫分析法，1975年Kohler等創(chuàng)建單克隆抗體技術(shù)，英國人Bence Jonec發(fā)現(xiàn)本周氏蛋白。，50年代，Skeggs首次介紹管道式自動(dòng)生化分析儀（Techicon公司產(chǎn)），連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀，隔離連續(xù)分析，分立式自動(dòng)生化分析儀模擬手工，應(yīng)用最多,能同測(cè)多項(xiàng)。，1969年Aderson設(shè)計(jì)離心式自，生化分析儀，能同步分析，但只能同測(cè)一項(xiàng)目。，80年代KODAK公司開發(fā)干片式自動(dòng)生化分析儀，評(píng)價(jià)生化儀的指標(biāo)：自動(dòng)化程度，分析效率，應(yīng)用范圍，分析準(zhǔn)確度。1809年P(guān)erice發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象，1937年，瑞典Tiselins建立自由電泳，1948年Wieland和Fischer建立濾紙電泳。PT：能力對(duì)比分析，起源于美國，是EQAS（全球室間質(zhì)量保證系統(tǒng)）的主要組成內(nèi)容，CLIA88：美國88年臨床實(shí)驗(yàn)室修正案，S1為某一項(xiàng)目得分，S2為總項(xiàng)目得分，滿意為S1，S2均在80分以上，SOP：標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程EQA：室間質(zhì)量評(píng)價(jià)QC：質(zhì)控IQC：室內(nèi)質(zhì)控，國際通用真空采血管顏色標(biāo)志：紅色：普通血清管，橘紅色：快速血清管（內(nèi)含促凝劑），金黃色：惰性分離膠促凝管，綠色：肝素抗凝管，淺綠色：血漿分離管（肝素鋰），黑色：枸椽酸鈉血沉管，淺蘭色：枸椽酸鈉血凝管，紫色：EDTA抗凝管，灰色：草酸鉀/氟化鈉抗凝管（測(cè)血糖時(shí)常用），生化試劑第一，二代為手工配制，三代為凍干粉，四代為液體雙生化試劑。，第一次檢查尿中是否有蛋白的是中國人，既“泡沫尿會(huì)有疾病”，第一次測(cè)血糖的是埃及人，用是否會(huì)吸引螞蟻來檢驗(yàn)。，LIS：實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)。止血帶壓迫最好不過半分鐘。生化儀校準(zhǔn)法：1，K因素法，適用于濃度與吸光度成比例變化，較常用。2，非線性法（曲線擬合法），適用于濃度與吸光度不成比例變化。常用流動(dòng)相的極性大小是：水甲醇乙醇丙醇正丁醇乙酸乙酯氯仿乙醚甲苯四氯化碳環(huán)已烷石油醚。離子選擇電極測(cè)定的是離子活度，而不是離子濃度，a=fc,F是活度系數(shù)?？俁NA測(cè)定法有：異硫氰酸胍—氯化銫超速離心法，鹽酸胍—有機(jī)溶劑法。Broin和Henri于1902，03年提出中間產(chǎn)物學(xué)說。腦脊液中蛋白質(zhì)少，測(cè)定用考馬斯亮蘭染料結(jié)合法（線性差，手工多用），鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法（線性好，多用自動(dòng)分析）。1977年Sanger創(chuàng)建雙脫氧核苷酸末端終止法（利用大腸桿菌DNA聚合酶I的催化活性），人類基因組多態(tài)性變化有：?jiǎn)螇A基改變，小衛(wèi)星DNA，微衛(wèi)星DNA。RFLP（限制性片段長度多態(tài)性）法是測(cè)定遺傳病診斷的常用手段。16 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