【正文】 的噴槍、刷子、尼龍清潔塊等。手工清潔方式的特征是：清洗前通常需要將設備進行一定程度的拆卸，并轉移到專門的清洗場所。很多固體制劑的生產設備如制粒機、壓片機、膠囊填充機，因死角較多或生產的產品易粘結在設備表面等情況而難以清潔，大多采用人工清洗方式。（二） 自動清潔方式該方式由專門的清洗裝置按一定的程序自動完成整個清潔過程。自動清潔方式的特征是：只要將清洗裝置同待清洗的設備相連接，即可完成整個清潔過程，亦稱在線清潔方式。某些體積龐大且內表面光滑無死角的設備，殘留的物料易溶于水或某種清潔劑，如注射用水貯罐、大容量注射劑的配制系統(tǒng)大多采用自動或半自動的在線清洗方式。清潔劑和淋洗水在泵的驅動下以一定的溫度、壓力、速度和流量流經待清洗設備的管道，或通過專門設計的噴淋頭均勻噴灑在設備內表面從而達到清洗的目的二、 清潔程序不管采取何種清潔方式清潔設備，都必須制定設備清潔程序，從而保證每個操作人員都能以相同的方式實施清洗，并獲得相同的清潔效果。清潔程序的要點如下：1. 拆卸 規(guī)定設備在清潔前需要拆卸的程度，如制粒機，大容量注射劑、小容量注射劑的灌裝機等在清潔前均需要預先拆卸到一定程度。拆卸應制訂包括拆卸操作步驟、示意圖等內容的拆卸指導文件，以使操作人員容易理解。2. 預洗 預洗的目的是除去可見的殘留物料，為清洗和淋洗等操作創(chuàng)造一個基本一致的起始條件。預洗操作可手持水管或手持高壓噴槍，用熱自來水或經過濾處理的自來水，持續(xù)噴淋機器的所有表面以除去所有可見的殘留物料。判斷預洗質量的標準是目測不易清潔的部位無可見的殘留顆粒。3. 清洗 清洗是用清潔劑以一定的操作程序除去設備上肉眼觀察不到的殘留物。操作程序必須明確規(guī)定清潔劑的名稱、規(guī)格、組成、使用濃度、配制該清潔劑的方法。配制清潔劑的水可根據(jù)需要采用自來水或純化水。清洗是溶劑對殘留物的溶解過程，而溶解往往隨溫度的升高而加快，因此，清洗時必須規(guī)定清潔劑的溫度范圍及控制溫度的方法。為提高清洗效率，可采用多步清洗的方式，往往在兩步清洗之間插入一步淋洗操作。4. 淋洗 在清洗步驟雖然已除去了大部分殘留物，但設備上殘留的清潔劑中仍然含水、清潔劑和殘留的物料。淋洗是用水對設備表面進行充分沖洗，使殘留物的濃度降至預定限度以下，自動執(zhí)行淋洗程序（包括壓力、流速、淋洗持續(xù)時間及水溫）較人工淋洗的效果可靠。為了防止造成新的潛在污染，淋洗水應根據(jù)產品的類型選用符合藥典標準的純化水或注射用水。5. 干燥 除去設備表面的殘留水分可防止微生物生長。設備是否需要干燥可根據(jù)具體情況決定，如須暴露保存的設備應進行干燥，如設備淋洗后要進行滅菌處理，或是采用高溫、無菌的注射用水淋洗后并保持密閉的設備則不一定要進行干燥處理。6. 目檢　通常經過驗證的清潔程序應保證清潔后的設備無可見的殘留物。目檢如發(fā)現(xiàn)殘留物，應及時采取糾偏措施。7. 儲存 規(guī)定已清潔設備和部件的儲存條件和最長儲存時間，以防止再次污染。8. 裝配 應規(guī)定將被拆卸部件重新裝配的各步操作，附以圖表和示意圖以利于操作者理解。此外，要注意裝配期間避免污染設備和部件。三、 清潔劑的選擇原則清潔劑的選擇原則有以下幾點：1. 清潔劑應能有效溶解殘留物，不腐蝕設備，且本身易被清除；2. 清潔劑組成簡單、成分確切，可運用一般分析手段檢測清潔劑的殘留情況；3. 清潔廢液有可靠的方法回收或進行無害化處理；根據(jù)這些原則，對于水溶性殘留物水是首選的清潔劑，亦可選擇一定濃度的酸、堿溶液，但一般家用清潔劑因其組成不詳細、質量不易控制，因此不宜采用。第二節(jié) 清潔驗證的合格標準清潔驗證是證實對某一臺確定設備按清潔程序清潔后是否合格。制訂驗證合格標準遇到的關鍵技術問題是如何確定最難清潔物質、最難清潔部位、最大允許殘留限度和相應的檢測方法。一、 確定最難清潔物質一個清潔過程實際上是溶劑對殘留物的溶解過程，因此最難溶解的物質的殘留量最大，也就是最難清潔的物質。在清潔驗證中，可以采取制定最難溶解物質的殘留量限度標準來證明設備的清潔效果。對于一個復方制劑，處方中各種組分的活性成分殘留物對下批產品的質量、療效和安全性影響更大，所以一般將殘留物中的活性成分確定為最難清潔物質。當制劑中存在兩個以上活性成分時，通常將其中最難溶解的成分定為最難清潔物質。以復方18氨基酸注射液為例，它有18種氨基酸，均為活性成分。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其確定為最難清潔物質。二、 確定最難清潔部位和采樣點無論手工清潔方式還是自動清潔方式，清洗過程總是先依靠機械摩擦力和清潔劑對殘留物的溶解作用，然后依靠流動的清洗液對殘留物的沖擊作用，最終實現(xiàn)預定的清洗效果。因此從溶解的化學動力學與流體力學的角度評價，以下幾種情況應視為最難清潔部位：1. 死角、清潔劑不易接觸的部位，例如，混合攪拌機中攪拌葉片與軸之間的連接處；2. 管道內壓力、流速迅速變化的部位，例如，有歧管或岔管處、管徑由小變大處排氣管等；3. 容易吸附殘留物的部位，例如，內表面不光滑處。顯然，采樣點應包括各類最難清潔部位。三、 確定殘留量限度藥品生產中，產品不同使用的工藝設備亦不同，因此為清潔驗證設立統(tǒng)一的限度標準和檢驗方法顯然是不妥當?shù)?。歐美國家采用的確定殘留量限度標準的一般性原則，目前已被世界各國普遍接受。我國制藥企業(yè)可作為清潔驗證的內控限度標準。①分析方法能達到的靈敏度能力；②生物學活性限度； ③以目測為依據(jù)的限度。其中第③項可作為①、②項限度標準的補充。（一） 分析方法能達到的靈敏度能力：殘留物濃度限度標準（10106）殘留物濃度限度標準規(guī)定：由上一批產品殘留在設備中的物質全部溶解到下一批產品中所致的濃度不得高于10106。對液體制劑而言，這就是進入下批各瓶產品的殘留物濃度。殘留物濃度限度（10106）也可進一步簡化成最終淋洗水中的殘留物濃度限度為10mg/kg。取10106為殘留物濃度限度的理論依據(jù)是高效液相色譜儀、紫外可見分光光度計、薄層色譜儀等常規(guī)實驗分析儀器的靈敏度一般都能達到10106以上。驗證時一般采用收集清潔程序最后一步淋洗結束時的水樣，或淋洗完成后在設備中加入一定量的水（小于最小生產批次量），使其在系統(tǒng)內循環(huán)后采樣，測定相關物質的濃度。（二） 生物學活性限度：最低日治療劑量的1/1000上述推算過程的前提是殘留物溶解到下批產品后均勻分配到各瓶／片產品中。而在實際生產中，殘留物并不是均勻分布的，可能存在某些特殊表面，如灌封頭，殘留物溶解后并不均勻分散到整個批中，而是全部進入一瓶或幾瓶產品中。在這種情況下上述限度就不適用了，必須為這些特殊部位制定特殊的限度。依據(jù)藥物的生物學活性數(shù)據(jù)——最低日治療劑量（minimum treatment daily dosage，MTDD）確定殘留物限度是制藥企業(yè)普遍采用的方法。取最低日治療劑量的1/1000為殘留物限度的理論依據(jù)是：不同人群對不同藥物產生活性或副作用的劑量存在個體差異，某些患者即使服用較最低日治療劑量更小的某種藥物仍會產生藥理反應。根據(jù)臨床藥理學、毒理學和臨床應用的統(tǒng)計和報導，至今尚未見到這種個體差異達到1000倍的報導，也就是說，即使對于某些高敏患者，MTDD的1/1000殘留量也不會產生藥理反應。因此高活性、敏感性的藥物宜使用本法確定殘留物限度。（三） 肉眼觀察限度：不得有可見的殘留物清潔規(guī)程中都要求在清潔完成或某些步驟完成后目檢不得有可見的殘留物。雖然這是非常經驗化的數(shù)據(jù)，與個人的視力、照明、設備的尺寸形狀和觀察的角度等許多因素有關，不可能作為定量、半定量的依據(jù)也無法驗證，但是目檢最簡單，而且能直觀、定性地評估清潔的程度，有助于發(fā)現(xiàn)已驗證的清潔程序在執(zhí)行過程中發(fā)生的偏差，可以作為上述定量標準的補充，對于日常監(jiān)控是有價值的。（四） 殘留物成分不穩(wěn)定時限度標準的確定方法上述殘留物濃度限度、生物學活性限度方法的合格標準是最難清潔物質的殘留量或產品中的活性成分應低于規(guī)定的限度，而對活性成分的化學穩(wěn)定性未加考慮。應該看到，清洗過程中和清洗結束后殘留物以薄膜形式，充分暴露在水分、氧氣和通常較高的溫度下（如需高溫清洗和滅菌），其活性成分的化學性質不很穩(wěn)定，有可能通過化學反應部分轉變?yōu)槠渌镔|。清潔驗證的合格標準自然失去了意義。另一方面，通過化學反應生成的其它物質可能對人體有更大的毒性，則更須嚴格限制其在后續(xù)成品中的含量。因此，殘留物成分不穩(wěn)定時制定限度標準必須考慮這類物質對下批產品帶來的不利影響。四、確定微生物污染限度微生物污染限度的確定應滿足生產和質量控制的要求。如滅菌制劑強調生產過程中降低或消除微生物及熱原對注射劑的污染，對葡萄糖、氨基酸產品而言，它們的殘留物對微生物生長有利，因此清潔驗證的可接受標準確定為殘留物小于10106，最終淋洗水pH必須與原來注射用水一致，雜菌＜25CFU/ml；內毒素＜25EU/ml。又如設備清洗后存放的時間越長，被微生物污染的機率就越大，制藥企業(yè)應綜合考慮其生產實際情況自行制定控制微生物污染的限度及清洗后到下次生產的最長貯存期限。第三節(jié) 采樣與采樣方法的驗證清潔驗證的另一關鍵技術難題是采樣與采樣方法的驗證。一、 擦拭采樣1. 采樣原則擦拭采樣的原則是選擇最難清潔部位采樣，通過驗證其殘留物水平來評價整套生產設備的清潔狀況。通過選擇適當?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過程中未溶解的，已“干結”在設備表面或溶解度很小的物質擦拭下來。2. 擦拭工具常用的擦拭工具為擦拭棒，為一定長度的尼龍或塑料棒，一端纏有不掉纖維的織物，該織物應能被擦拭溶劑良好潤濕。3. 擦拭溶劑擦拭溶劑用于溶解殘留物，并將吸附在擦拭工具上的殘留物萃取出來以便檢測。用于擦拭和萃取的溶劑可以相同也可不同，一般為水、有機溶劑或兩者的混合物。選擇溶劑時，應注意保證擦拭采樣有較高的回收率并不得對隨后的檢測產生干擾。4. 擦拭采樣操作規(guī)程（1） 最小采樣面積的確定　每個擦拭采樣面積應保證擦拭獲取殘留物的量能用常規(guī)檢測方法檢測。通常設定大于25cm2。（2） 擦拭采樣軌跡　取用適宜溶劑潤濕的擦拭棒，使棒頭按在采樣表面上，平穩(wěn)而緩慢地擦拭采樣表面。在改變擦拭移動方向時翻轉擦拭棒，用擦拭棒的另一面進行擦拭，擦拭過程應覆蓋整個表面。（3） 擦拭完成后，將采樣擦拭棒放入試管，并用螺旋蓋旋緊密封，在試管上注明有關采樣信息。用同樣溶劑潤濕的空白擦拭棒作為對照樣品放入試管并旋緊密封，送檢。5. 采樣驗證采樣過程需經過驗證。通過回收率試驗驗證采樣過程的回收率和重現(xiàn)性。要求包括采樣回收率和檢驗方法回收率在內的綜合回收率不低于50%，體現(xiàn)重現(xiàn)性的多次采樣回收率的相對標準差（RSD）不大于20%。采樣驗證程序如下：（1） 準備一塊與設備表面材質相同的500mm500mm的平整光潔的板材，一般為不銹鋼板；（2） 在鋼板上劃出400mm400mm的區(qū)域，并每隔100mm劃線，形成16塊100mm100mm的方塊；（3） %的溶液，定量裝入噴霧器；（4） 將約10ml溶液盡量均勻地噴在400400mm的區(qū)域內；（5） 根據(jù)實際噴出的溶液量計算單位面積的物質量（約1μg／cm2）；（6） 自然干燥或用電吹風吹干不銹鋼板；（7） 用選定的擦拭溶劑潤濕擦拭工具，按前述擦拭采樣操作規(guī)程擦拭鋼板，每擦一個方塊（100cm2）換一根擦拭棒，共擦6～10個方塊；（8） 將擦拭棒分別放入試管中，蓋上試管蓋，加入預定溶劑10ml，加塞，輕搖試管，并放置10min，使物質溶出；（9） 用預定的檢驗方法檢驗，計算回收率和回收率的相對標準差。擦拭采樣能有效彌補淋洗采樣的缺點，檢驗的結果能直接反應出各采樣點的清潔狀況，為優(yōu)化清潔規(guī)程提供依據(jù)。擦拭采樣的缺點是很多情況下須拆卸設備后方能接觸到采樣部位。二、 最終淋洗水采樣1. 采樣方法最終淋洗水采樣為大面積采樣方法。該方法根據(jù)淋洗水流經設備的線路，選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為采樣口，分別按照微生物檢驗樣品和化學檢驗樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結束時的水樣。對于殘留物難溶于水或干結在設備表面時，可采用淋洗完成后在設備中加入一定量的工藝用水（用量必須小于最小生產批量），使其在系統(tǒng)內循環(huán)后在相應位置采樣，其結果的可靠性要好一些。2. 適用范圍（1） 適用于設備表面平坦、管道多而長的液體制劑的生產設備；（2） 適用于擦拭采樣不宜接觸到的表面，因此對不便拆卸或不宜經常拆卸的設備也能采樣。對淋洗水樣一般檢查殘留物濃度和微生物污染水平。如生產有檢查澄明度與不溶性微粒項目的制劑，通常要求淋洗水符合相關劑型不溶性微粒和澄明度的標準。第四節(jié) 清潔驗證方案的實施與再驗證清潔驗證不是驗證某一設備，而是驗證某一設備的清潔規(guī)程。一、 清潔驗證方案一般包括驗證目的、清潔規(guī)程、建立驗證小組、確定殘留物限度標準、確定采樣方法及檢驗方法、驗證報告等內容。（一） 驗證目的驗證設備（或生產線）按清潔規(guī)程進行清洗后的清洗效果能否始終達到預定要求。（二） 清潔規(guī)程待驗證的清潔規(guī)程應根據(jù)設備的結構、產品中物料的性能與特點在驗證工作開始前制定。清潔規(guī)程應明確清潔方法、清潔工具、清潔劑、清潔時間與相應的清潔程序、待清潔設備的結構以及設備清潔后如何預防再污染的措施等內容。（三） 驗證小組建立驗證小組，列出驗證小組成員名單，明確各自的職責，確定相關操作人員的培訓要求。（四） 確定殘留物限度標準確定殘留物限度標準的依據(jù)，確定該限度標準的計算過程和結果。（五） 確定采樣方法及檢驗方法為了能正確評估清潔后污染物的殘留量，選擇合適的采樣方法和正確的檢測方法是非常重要的。如選擇擦拭采樣，由于擦拭速度、擦拭軌跡和擦拭力不能有效地控制等原因，樣品采集容易產生較大誤差。檢測方法的選擇應注意其他成分對被檢物的干擾及儀器的靈敏度。確定采樣方法和檢測方法后，必須用示意圖、文字等方法指明采樣點的具體位置和采樣計劃，說明采樣方法、工具、溶劑，主要檢驗儀器，采樣方法和檢驗方法的驗證情況等。（六） 可靠性判斷標準為證明待驗證清潔規(guī)程的可靠性，應規(guī)定驗證試驗必須重復的次數(shù)（一般為連續(xù)3次），所有數(shù)據(jù)均應符合限度標準。