最權(quán)威最齊全的pcr匯總及其原理-程序-資料下載頁
2025-07-14 14:38本頁面
【正文】 R原理熒光定量PCR 應用領(lǐng)域 TL988型實時熒光定量PCR儀應用領(lǐng)域臨床疾病診斷：各型肝炎、艾滋病、禽流感、結(jié)核、性病等傳染病診斷和療效評價；地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測；腫瘤標志物及瘤基因檢測實現(xiàn)腫瘤病診斷；遺傳基因檢測實現(xiàn)遺傳病診斷。 動物疾病檢測：禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。 食品安全：食源微生物、食品過敏源、轉(zhuǎn)基因、乳品企業(yè)阪崎腸桿菌等檢測。 科學研究：醫(yī)學、農(nóng)牧、生物相關(guān)分子生物學定量研究。 應用行業(yè)：各級各類醫(yī)療機構(gòu)、大學及研究所、CDC、檢驗檢疫局、獸醫(yī)站、食品企業(yè)及乳品多重PCR多重PCR所屬現(xiàn)代詞，指的是一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產(chǎn)生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定。多重PCR 簡介 一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產(chǎn)生一個核酸片段，(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同.多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物，某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定，是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物，，可系統(tǒng)組合的有:①肝炎病毒的感染，在同一病人或同一供血者體內(nèi)，有時存在多種肝炎病毒重疊感染，有時是甲乙丙型肝炎病毒重疊。有時可能是甲乙型肝炎病毒重疊。有時是乙丙型肝炎病毒重疊.②腸道致病性細菌的檢測，如傷寒，痢疾和霍亂，有時具有較相同的腸道癥狀，有時痢疾霍亂同存一病人并同時發(fā)病.③性病的檢測，如梅毒，淋病及艾滋病的診斷.④戰(zhàn)傷細菌及生物戰(zhàn)劑細菌的檢測，如破傷風桿菌，產(chǎn)氣莢膜桿菌，炭疽桿菌，鼠疫桿菌等偵檢.⑤需特殊培養(yǎng)的無芽胞厭氧菌，如脆弱類桿菌、艱難桿菌的鑒定等. 某些病原微生物，某些遺傳病或癌基因，型別較多，或突變或缺失存在多個好發(fā)部位，多重PCR可提高其檢出率并同時鑒定其型別及突變等可系統(tǒng)應用的有:乙型肝炎病毒的分型。乳頭瘤病毒的分型。單純皰疹病毒的分型。杜氏肌營養(yǎng)不良癥的分型及癌基因的檢測等. 多重PCR 多重PCR的特點 ①高效性，在同一PCR反應管內(nèi)同時檢出多種病原微生物，或?qū)τ卸鄠€型別的目的基因進行分型，特別是用一滴血就可檢測多種病原體.②系統(tǒng)性，多重PCR很適宜于成組病原體的檢測，如肝炎病毒，腸道致病性細菌，性病，無芽胞厭氧菌，戰(zhàn)傷感染細菌及細菌戰(zhàn)劑的同時偵檢.③經(jīng)濟簡便性，多種病原體在同一反應管內(nèi)同時檢出，將大大的節(jié)省時間，節(jié)省試劑，節(jié)約經(jīng)費開支，為臨床提供更多更準確的診斷信息. 遞減PCR遞減PCR(touchdown PCR)是一種PCR（聚合酶鏈式反應）方法，用來避免非特異性序列的擴增。PCR中引物的黏合溫度(annealing temperature)決定了黏合的特異性，溫度越高特異性越強，但過高則不能實現(xiàn)引物和模板的結(jié)合，而過低會產(chǎn)生大量非特異性產(chǎn)物。因此進行PCR時需要尋找合適的黏合溫度。遞減PCR開始先設定一個比較高的黏合溫度，每個循環(huán)黏合溫度下降1℃，到一個較低溫度以后每個循環(huán)的黏合溫度保持不變直到結(jié)束。在剛下降到特異性結(jié)合可以進行的最高溫度時，可以達到最高的特異性。這樣在起初的幾個循環(huán)中，特異性擴增序列可以相對非特異性序列多擴增若干倍，從而減輕非特異性擴增對結(jié)果的干擾。這種方法可用于省去多次試驗最佳黏合溫度的工作。此外，遞減PCR還可與簡并引物(degenerate primer)結(jié)合使用，用來推出一段已知肽鏈的氨基酸序列所對應的DNA堿基序列。不對稱PCR不對稱PCR 簡介一對引物使用不同的濃度，剛開始擴增出雙鏈DNA，當一種引物耗盡，則只產(chǎn)生單鏈DNA，該單鏈可用于測序，或作用探針。
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