免疫組化染色操作步驟-資料下載頁
2025-07-07 12:48本頁面
【正文】 3次；6. 復(fù)染浸入蘇木精溶液中復(fù)染，放置5 min后，用自來水反復(fù)涮洗至水不變色，再用1%鹽酸酒精分化1—2 s后，自來水沖洗后，反藍(lán)水洗2 min。7. 脫水、透明和封片①依次放入95％、95％乙醇溶液的玻璃缸中，每缸浸泡5 min，取出；②依次放入2個(gè)無水乙醇的玻璃缸中，每缸浸泡5 min，取出。③依次放入2個(gè)裝有二甲苯的玻璃缸中，每缸浸泡5 min，取出。④滴加適量中性樹膠，封片，晾干。8. 注意事項(xiàng)①整個(gè)染色過程中組織塊要保持濕潤，不能干片，否則會導(dǎo)致非特異性染色。②組織切片邊緣易干，因此抗體、封閉液、顯色液等試劑要充分覆蓋組織塊，避免干片。四、結(jié)果判定1. 陽性細(xì)胞判斷DAB顯色呈黃色。每批染色都要有特異性陽性和陰性對照為基礎(chǔ)，才能對染色結(jié)果作出判斷?？乖磉_(dá)必須在特定部位，對于臨床診斷來說，不在抗原所在部位的陽性著色，一概不能視為陽性。盡量避開出血、壞死及切片刀痕和界面邊緣細(xì)胞的著色多系內(nèi)源干擾或人為因素所致，不能視為陽性。2. 抗原表達(dá)評價(jià)免疫顯色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞密度是定性定量指標(biāo)，實(shí)際工作中常采用強(qiáng)度和密度結(jié)合的方法綜合計(jì)量，我們常用的免疫組化評分方法如下：細(xì)胞染色強(qiáng)度評分：0（無染色），1（弱染色），2（中染色），3（強(qiáng)染色）腫瘤細(xì)胞陽性率評分：0（0~9%），1（10%~25%），2（26%~50%），3（51%~75%），4（76%~100%）將染色強(qiáng)度評分和陽性細(xì)胞率評分的乘積作為該切片評分值。
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